本文關(guān)鍵詞：自身免疫性肝病Kupffer細(xì)胞抗原呈遞分子的表達(dá)變化

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【摘要】：目的:肝臟kupffer細(xì)胞抗原呈遞功能的變化在自身免疫性肝病(autoimmune liver disease,ALD)的發(fā)病機(jī)制中占有重要位置,本文擬探討肝臟kupffer細(xì)胞抗原呈遞分子的表達(dá)在自身免疫性肝病中的變化情況。首先觀察肝穿組織CD40/CD68、CD80/CD68、HLA-DR/CD68免疫熒光共定位染色的情況,明確抗原呈遞分子CD40、CD80、HLA-DR均在肝臟kupffer細(xì)胞上表達(dá),進(jìn)而比較肝穿組織中CD40、HLA-DR免疫組化染色結(jié)果,探索其在自身免疫性肝病中的表達(dá)情況,并探討CD40、HLA-DR是否具有相關(guān)性。最后分析CD40、HLA-DR與肝功能、凝血功能等化驗(yàn)結(jié)果的關(guān)系,揭示肝臟kupffer細(xì)胞抗原呈遞分子的表達(dá)在自身免疫性肝病發(fā)病機(jī)制中的作用。方法:(1)選擇2010年1月至2015年6月在天津市總醫(yī)院消化內(nèi)科就診并行肝穿檢查的患者,按照自身免疫性肝炎(autoimmunehepatitis,AIH)、原發(fā)性膽汁性膽管炎(primary biliary cholangitis,PBC)、PBC-AIH重疊綜合征(PBC-AIH Overlap syndrome,PBC-AIH OS)的診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分組,并將酒精性肝病、脂肪肝、慢性病毒性肝炎作為非自身免疫性肝病患者組用于對照(以下簡稱為非自免肝組),并記錄入選患者的血生化、凝血功能等檢查結(jié)果。(2)對入選患者肝穿的冰凍切片分別進(jìn)行CD40/CD68、CD80/CD68、HLA-DR/CD68免疫熒光共定位染色,觀察CD40、CD80、HLA-DR在肝臟組織中的表達(dá)情況。(3)對入選患者肝穿的石蠟切片分別進(jìn)行CD40、HLA-DR免疫組化染色,隨機(jī)選取10個高倍鏡視野(400倍),統(tǒng)計CD40+kupffer細(xì)胞及HLA-DR+kupffer細(xì)胞的數(shù)量,取均值,利用方差分析進(jìn)行組間比較。(4)將CD40、HLA-DR的免疫組化結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性比較。(5)將CD40、HLA-DR的免疫組化結(jié)果與肝功能、凝血功能等生化指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果:(1)免疫熒光雙染結(jié)果顯示CD40、CD80、HLA-DR均在肝臟CD68+kup ffer細(xì)胞上表達(dá)。(2)免疫組化試驗(yàn)中,CD40在自身免疫性肝病組的陽性細(xì)胞數(shù)低于對照組。CD40免疫組化陽性產(chǎn)物呈棕褐色或棕黃色顆粒狀著色,主要位于細(xì)胞膜,少部分位于細(xì)胞質(zhì)。分別計算自身免疫性肝炎、原發(fā)性膽汁性膽管炎和非自身免疫性肝病3組肝穿標(biāo)本中的CD40陽性的kupffer細(xì)胞數(shù)絕對值,結(jié)果顯示:3組間CD40陽性的kupffer細(xì)胞的計數(shù)絕對值比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.04,P0.05)。AIH與PBC組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.428,P0.05);AIH與非自免肝組比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.02,P0.05)(3)免疫組化中,HLA-DR在自身免疫性肝病組的陽性細(xì)胞數(shù)低于對照組,HLA-DR免疫組化染色陽性產(chǎn)物呈棕褐色顆粒,主要位于細(xì)胞膜。分別統(tǒng)計AIH、PBC和非自身免疫性肝病3組的HLA-DR陽性的kupffer細(xì)胞計數(shù)的絕對值,結(jié)果顯示3組比較其結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.015,P0.05),AIH與非自身免疫性肝病組比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.017,P0.05),(4)CD40與HLA-DR進(jìn)行相關(guān)性分析,結(jié)果顯示呈正相關(guān)。(5)CD40、HLA-DR結(jié)果與肝功能、凝血功能化驗(yàn)檢查結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析,結(jié)果顯示CD40、HLA-DR與AIH患者的谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase,AST)具有相關(guān)性。結(jié)論:(1)CD40、HLA-DR、CD80主要在肝臟kupffer細(xì)胞上表達(dá),抗原呈遞分子的變化可能引起抗原呈遞功能的改變。(2)自身免疫性肝病患者組的肝穿石蠟切片免疫組化染色顯示CD40及HLA-DR表達(dá)較非自身免疫性肝病組數(shù)量減少,且CD40、HLA-DR與自身免疫性肝炎的ALT、AST變化相關(guān),提示自身免疫性肝病可能存在kupffer細(xì)胞抗原呈遞功能減弱,是導(dǎo)致自身免疫性肝病肝損害的原因之一。
【關(guān)鍵詞】：自身免疫性肝病 kupffer細(xì)胞 抗原呈遞 抗原呈遞分子 自身免疫
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R575
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語/符號說明10-12
• 前言12-16
• 研究現(xiàn)狀、成果12-15
• 研究目的、方法15-16
• 一、自身免疫性肝病患者肝穿組織免疫熒光染色觀察kupffer細(xì)胞CD40、CD80、HLA-DR的表達(dá)情況16-27
• 1.試驗(yàn)對象和方法16-22
• 1.1 試驗(yàn)對象16
• 1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)16
• 1.3 主要試劑及試驗(yàn)方法16-22
• 1.3.1 CD40、CD68免疫熒光染色16-18
• 1.3.2 CD80、CD68免疫熒光染色18-20
• 1.3.3 HLA-DR、CD68免疫熒光染色20-22
• 2.結(jié)果22-24
• 2.1 CD40、CD68免疫熒光染色結(jié)果22
• 2.2 CD80、CD68免疫熒光染色結(jié)果22-23
• 2.3 HLA-DR、CD68免疫熒光染色結(jié)果23-24
• 3.討論24-26
• 4.小結(jié)26-27
• 二、自身免疫性肝病肝組織免疫組化CD40、HLA-DR的表達(dá)27-44
• 1.試驗(yàn)對象和方法27-34
• 1.1 試驗(yàn)對象27-28
• 1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)28-29
• 1.3 主要試劑及試驗(yàn)方法29-34
• 1.3.1 CD40染色29-32
• 1.3.2 HLA-DR染色32-34
• 1.4 試驗(yàn)結(jié)果判斷方法34
• 1.5 統(tǒng)計學(xué)方法34
• 2.結(jié)果34-40
• 2.1 CD40在自身免疫性肝炎、原發(fā)性膽汁性膽管炎、PBS-AIH重疊綜合征及非自身免疫性肝病患者的表達(dá)34-36
• 2.1.1 自身免疫性肝病的肝臟標(biāo)本HE染色的特點(diǎn)34-35
• 2.1.2 CD40在肝臟組織中的表達(dá)35-36
• 2.2 HLA-DR在自身免疫性肝炎、原發(fā)性膽汁性膽管炎、PBS-AIH重疊綜合征及非自身免疫性肝病患者的表達(dá)36-38
• 2.3 CD40與HLA-DR的相關(guān)性分析38
• 2.4 CD40與HLA-DR在自身免疫性肝病患者的臨床化驗(yàn)因素的關(guān)系38-40
• 3.討論40-42
• 4.小結(jié)42-44
• 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-49
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明49-50
• 綜述50-58
• 綜述參考文獻(xiàn)55-58
• 致謝58-59
• 個人簡歷59

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3 謝t，

本文編號：652552