本文關(guān)鍵詞：草珊瑚浸膏在體外對(duì)幽門(mén)螺桿菌的抑菌作用及其與抗生素的協(xié)同作用

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【摘要】：背景與目的:幽門(mén)螺桿菌(H.pylori)的感染和多種胃腸道疾病的發(fā)生密切相關(guān),有效根除H.pylori對(duì)防治H.pylori相關(guān)性疾病極為重要。目前H.pylori的根除治療有質(zhì)子泵抑制加2種抗生素的三聯(lián)方案和質(zhì)子泵抑制加鉍劑再加2種抗生素的四聯(lián)方案,由于H.pylori對(duì)抗生素的耐藥,這些方案的H.pylori根除率仍不盡人意。為了提高H.pylori的根除率,人們通過(guò)延長(zhǎng)療程,增加抗生素劑量,抗菌藥物種類(lèi)由2種增加到3種(如序貫方案、伴同方案、雜合方案)。那么,隨著H.pylori對(duì)抗生素的耐藥率的逐年增高,這些方案對(duì)H.pylori的根除率是否與三聯(lián)方案一樣逐漸下降到不可接受的水平。因此,人們?cè)噲D從非抗生素途徑尋找治療H.pylori感染的方法,以克服H.pylori對(duì)抗生素耐藥的影響,提高H.pylori根除率,中藥就是其中一種。作為天然中藥的草珊瑚具有抗炎和廣譜抗菌作用,其是否有抗H.pylori作用,目前未見(jiàn)報(bào)道。為此,本文采用瓊脂稀釋法研究了草珊瑚浸膏(sarcandra glabra extract,SGE)對(duì)H.pylori的抑菌作用,同時(shí)觀察了它與我國(guó)第四次幽門(mén)螺桿菌感染診治共識(shí)推薦的6種抗生素是否具有協(xié)同作用,尤其是可否降低對(duì)H.pylori耐藥抗生素的最低抑菌濃度(minimum inhibitory concentration,MIC),從而克服H.pylori對(duì)抗生素的耐藥。此外,還觀察了SGE作用H.pylori后細(xì)菌內(nèi)容物的外滲,以探索SGE抗H.pylori作用的增加H.pylori對(duì)抗生素敏感性的可能機(jī)制,為SGE用于H.pylori相關(guān)性疾病的治療提供依據(jù)。方法:1、H.pylori菌株:從南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化研究所保存的2010年6月~2013年8月期間已-行濃度梯度法(E-test)或紙片擴(kuò)散法(Kirby-Bauer,K-B)藥敏感檢測(cè)的653例H.pylori菌株中,篩選出對(duì)我國(guó)第四次共識(shí)推薦的6種抗生素(A-阿莫西林,C-克拉霉素,M-甲硝唑,L-左氧氟沙星,T-四環(huán)素和F-呋喃唑酮)中,至少對(duì)其中一種耐藥的H.pylori 32株,其中對(duì)3種及3種以上抗生素耐藥的有8株,對(duì)2種抗生素耐藥的有16株,對(duì)1種抗生素耐藥的有8株。2、瓊脂二倍稀釋法驗(yàn)證上述32株H.pylori的最小抑菌濃度(minimalinhibitory concentration,MIC)。3、瓊脂二倍稀釋法檢測(cè)SGE對(duì)上述32株H.pylori的MIC。4、草珊瑚與6種抗生素的聯(lián)合效應(yīng):遵照CLSI細(xì)菌藥敏實(shí)驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn),按照棋盤(pán)法設(shè)計(jì)組合系列不同濃度的兩種抗菌藥物,用瓊脂平板法測(cè)定6種抗菌藥物在單用和與SGE聯(lián)用時(shí)的MIC。計(jì)算部分抑菌濃度指數(shù)(fractional inhibitory concentration index,FICI)以評(píng)估藥物之間的聯(lián)合效應(yīng)。當(dāng)FICI≤0.5為協(xié)同作用,0.5FICI≤1為相加作用,1FICI≤2為無(wú)關(guān)作用,FICI2為拮抗作用。5、SGE對(duì)H.pylori外膜屏障功能的影響:分別選取多重耐藥和對(duì)6種抗菌藥物均敏感菌株的H.pylori各1株,與95μg/m L的SGE溶液作用24h后取上清液測(cè)其中葡萄糖含量及天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性,以判定細(xì)菌內(nèi)容物滲漏情況,每株菌重復(fù)2次。結(jié)果:1、SGE對(duì)32株H.pylori的MIC分布在11.9~47.5μg/m L之間。2、SGE與6種抗生素之間的聯(lián)合效應(yīng):(1)SGE+A:FICI≤0.5(80%),0.5FICI≤1(20%);(2)SGE+M:FICI≤0.5(70%),0.5FICI≤1(30%);(3)SGE+L:FICI≤0.5(60%),0.5FICI≤1(40%);(4)SGE+F:FICI≤0.5(90%),0.5FICI≤1(10%);(5)SGE+T:FICI≤0.5(90%),0.5FICI≤1(10%);(6)SGE+C:FICI≤0.5(80%),0.5FICI≤1(20%)。3、無(wú)論是對(duì)抗菌藥物耐藥株還是敏感株,95μg/m L的SGE與其作用24h后,上清液中AST和Glu含量與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01),SGE組的AST和GLU含量顯著高于對(duì)照組。表明SGE可破壞H.pylori的外膜屏障功能。結(jié)論1、SGE體外對(duì)耐藥H.pylori菌株有明顯的抑制效果。2、SGE與6種抗生素聯(lián)合對(duì)耐藥H.pylori菌株的體外聯(lián)合效應(yīng)表現(xiàn)為協(xié)同和相加作用,且以協(xié)同作用為主。3、SGE可破壞H.pylori的外膜屏障功能,這可能是其抗H.pylori作用和與其它抗菌藥物具有協(xié)同作用的機(jī)制之一。
【關(guān)鍵詞】：草珊瑚浸膏 幽門(mén)螺桿菌 MIC FICI
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R57
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-10
• 第1章 引言10-13
• 第2章 材料與方法13-26
• 2.1 材料13-19
• 2.1.1 菌株13-15
• 2.1.2 主要試劑和材料15
• 2.1.3 主要儀器15-16
• 2.1.4 主要溶液配置16-19
• 2.2 方法19-25
• 2.2.1 細(xì)菌的蘇復(fù)、培養(yǎng)19-20
• 2.2.2 檢測(cè)草珊瑚浸膏體外對(duì)H.pylori的抑制作用及MIC20
• 2.2.3 草珊瑚浸膏與6種抗生素(AC、FR、CH、LE、TC、MZ)體外抗耐藥幽門(mén)螺桿聯(lián)合效應(yīng)研究：20-23
• 2.2.4 草珊瑚浸膏對(duì)H. pylori外膜屏障功能的影響：23-25
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理25-26
• 第3章 結(jié)果26-34
• 3.1 草珊瑚浸膏體外對(duì)H.pylori抑菌作用結(jié)果26-27
• 3.2 草珊瑚浸膏與抗生素聯(lián)合效應(yīng)27-33
• 3.2.1 瓊脂二倍稀釋法再次驗(yàn)證所選菌株對(duì)抗生素的MIC27-28
• 3.2.2 草珊瑚與6種抗生素的協(xié)同作用28-32
• 3.2.3 質(zhì)控結(jié)果32-33
• 3.3 草珊瑚浸膏對(duì)H.pylori的作用機(jī)制33-34
• 第4章 討論34-37
• 第5章 結(jié)論37-38
• 致謝38-39
• 參考文獻(xiàn)39-42
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果42-43
• 綜述43-47
• 參考文獻(xiàn)46-47

【參考文獻(xiàn)】

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