乙型肝炎病毒X蛋白相關微小RNA差異表達在乙型肝炎病毒復制中的作用研究
本文關鍵詞:乙型肝炎病毒X蛋白相關微小RNA差異表達在乙型肝炎病毒復制中的作用研究
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【摘要】:背景乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)在乙型肝炎病毒復制及肝癌形成中扮演著重要的角色。研究HBX相關微小RNA(miRNAs)的差異表達有可能為調(diào)控乙型肝炎病毒復制、闡明肝癌發(fā)展進程及開展預后干預提供重要信息。目的探討肝癌細胞中HBX相關miRNAs的差異表達及其在乙型肝炎病毒復制中的作用。方法選取2014年1—10月第二軍醫(yī)大學附屬東方肝膽外科醫(yī)院收治的13例肝癌患者的肝癌組織及距離肝癌組織2 cm癌旁組織的新鮮石蠟包埋標本,采用微陣列技術分析HBX相關miRNAs的差異表達,實時熒光定量反轉錄聚合酶鏈式反應(RT-q PCR)法定量分析肝癌組織與癌旁組織中7個與肝臟功能相關的miRNAs及HBX mRNA表達水平,同時分析過表達hsa-miR-373或抑制hsa-miR-22對乙型肝炎病毒復制的影響。結果微陣列技術分析顯示,HepG2-X細胞系和HepG2-CAT細胞系中有46種miRNAs差異表達,與HepG2-CAT細胞系相比,HepG2-X細胞系中20種miRNAs表達上調(diào),26種miRNAs表達下調(diào)。肝癌組織與癌旁組織中hsa-miR-22、hsa-miR-373、hsa-miR-92、hsa-miR-155及HBX mRNA表達水平比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);肝癌組織與癌旁組織中hsa-miR-181a、hsa-miR-34a、hsa-let-7i表達水平比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。Pearson相關性分析結果顯示,hsa-miR-22表達水平與HBX mRNA表達水平呈正相關(r=0.415,P=0.018),hsa-miR-373、hsa-miR-92、hsa-miR-155表達水平與HBX mRNA表達水平呈負相關(r=-0.322,P=0.043;r=-0.369,P=0.028;r=-0.426,P=0.016);hsa-miR-181a、hsa-miR-34a、hsa-let-7i表達水平與HBX mRNA表達水平無直線相關關系(r=0.076,P=0.363;r=0.017,P=0.676;r=0.122,P=0.242)。第2天和第3天hsa-miR-22抑制劑組、hsamiR-373前體組HepG2.2.15細胞系及HepAD-38細胞系乙型肝炎病毒拷貝數(shù)較陰性對照組降低(P0.05);第2天和第3天hsa-miR-373前體組Hep G2.2.15細胞系乙型肝炎病毒拷貝數(shù)較hsa-miR-22抑制劑組降低(P0.05)。第2天hsa-miR-373前體組Hep AD-38細胞系乙型肝炎病毒拷貝數(shù)較hsa-miR-22抑制劑組升高,第3天hsa-miR-373前體組Hep AD-38細胞系乙型肝炎病毒拷貝數(shù)較hsa-miR-22抑制劑組降低(P0.05)。第2天和第3天hsa-miR-373前體組HepG 2.2.15細胞系乙型肝炎病毒拷貝抑制率較hsa-miR-22抑制劑組升高(P0.05)。第2天hsa-miR-373前體組Hep AD-38細胞系乙型肝炎病毒拷貝抑制率較hsa-miR-22抑制劑組降低,第3天hsa-miR-373前體組Hep AD-38細胞系乙型肝炎病毒拷貝抑制率較hsa-miR-22抑制劑組升高(P0.05)。結論 HBX相關miRNAs的差異表達可通過靶向相關信號轉導通路影響乙型肝炎病毒在肝癌細胞內(nèi)的復制。
【作者單位】: 上海市締達生物科技有限公司;第二軍醫(yī)大學附屬東方肝膽外科醫(yī)院;國際合作信號轉導實驗室;
【關鍵詞】: 肝腫瘤 乙型肝炎病毒X蛋白 微小RNA 病毒復制
【基金】:國家自然科學基金資助項目(91029723)
【分類號】:R512.62
【正文快照】: 微小RNA(microRNA,miRNAs)是一類長度為19~25個核苷酸分子的小RNA,在動、植物體內(nèi)介導轉錄后基因沉默,在細胞生長、增殖、分化、凋亡過程中扮演重要的角色[1-2]。研究miRNAs差異表達、miRNAs的調(diào)控網(wǎng)絡及其對細胞功能的影響,對病毒感染以及腫瘤發(fā)生發(fā)展具有重要意義[3]。肝癌
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,本文編號:618552
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