發(fā)布時(shí)間：2017-07-16 23:15

  本文關(guān)鍵詞：齊墩果酸抑制HMGB1-TLR4-中性粒細(xì)胞正反饋環(huán)減輕小鼠肝缺血再灌注損傷

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【摘要】：目的:探討齊墩果酸(oleanolic acid,OA)對(duì)小鼠肝缺血(ischemiareperfusion,IR)再灌注損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制。方法:將Balb/c雄性小鼠隨機(jī)分為4組:假手術(shù)對(duì)照組(Control組)、齊墩果酸對(duì)照組(OA組)、肝缺血再灌注模型組(IR組)和齊墩果酸干預(yù)組(OA+IR組)。肝缺血再灌注模型組(IR組)干預(yù)方式:小鼠麻醉好后,沿著腹白線剖開,暴露門脈三聯(lián)管(小葉間動(dòng)脈、小葉間靜脈和小葉間膽管)用無創(chuàng)小號(hào)血管夾將其夾閉,使70%的肝臟缺血3 h再灌注6 h。齊墩果酸的給藥劑量為100 mg/kg,給藥方式為灌胃3次,每次間隔8 h(最后一次灌胃在術(shù)前半小時(shí))。小鼠肝臟再灌注6 h后獲得血清,檢測(cè)其丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(aspartate transaminase,AST)活性水平;取缺血再灌注肝葉(中葉或者左葉)做石蠟切片后再用蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin,HE)染色,觀察肝臟組織病理變化;原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)TUNEL(transferase-mediated deoxyuridine triphosphate nick end labeling)和蛋白印記法(Western blot)檢測(cè)有關(guān)調(diào)控凋亡的信號(hào)分子bax、bcl-2、cleavedcaspase-3、cleavedcaspase-7和cleavedcaspase-9評(píng)價(jià)肝臟組織的壞死程度和細(xì)胞凋亡情況。免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry,ihc)定性檢測(cè)高遷移率族蛋白b1(highmobilitygroupbox-1protein,hmgb1)的表達(dá)情況;實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄pcr(quantitativereversetranscriptionpcr,qrt-pcr)檢測(cè)toll樣受體4(tolllikereceptor4,tlr4)、腫瘤壞死因子-?(tumornecrosisfactor-alpha,tnf-?)和白細(xì)胞介素-1?(interleukin-1beta,il-1?)mrna的表達(dá);酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linkedimmunosorbentassay,elisa)檢測(cè)血清中tnf-?和il-1?的表達(dá);westernblot分析肝臟組織中磷酸化的絲裂原活化蛋白酶(mitogen-activatedproteinkinases,mapks):磷酸化的細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(phosphorylatedextracellularsignal-regulatedkinase,p-erk)、磷酸化的p-c-jun氨基末端激酶(phosphorylatedc-junn-terminalkinase,p-jnk)和磷酸化的p-38(p-p38)蛋白水平的變化;流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometry,fcm)分析中性粒細(xì)胞募集程度。結(jié)果:oa+ir組與ir組相比,oa預(yù)處理后,血清中alt和ast的活性水平顯著降低,肝臟組織病理損傷程度減小以及凋亡細(xì)胞明顯減少,由核內(nèi)釋放到細(xì)胞外的hmgb1極大地減少,tlr4和磷酸化的mapks蛋白表達(dá)水平均明顯下調(diào),tnf-?和il-1?的mrna和蛋白表達(dá)水平顯著降低,中性粒細(xì)胞的募集極大地減少。結(jié)論:齊墩果酸對(duì)小鼠肝缺血再灌注誘導(dǎo)的損傷具有保護(hù)作用。其保護(hù)作用機(jī)制可能與抑制HMGB1-TLR4-中性粒細(xì)胞正反饋環(huán)從而阻斷了炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：齊墩果酸 肝缺血再灌注損傷 HMGB1 TLR4 中性粒細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R575
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對(duì)照4-5
• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-13
• 1 材料和方法13-30
• 1.1 材料13-23
• 1.2 方法23-30
• 2 結(jié)果30-38
• 2.1 OA對(duì)小鼠肝缺血再灌注損傷血清轉(zhuǎn)氨酶（ALT/AST）活性水平和肝臟組織損傷情況的影響30-32
• 2.2 OA對(duì)肝缺血再灌注損傷中細(xì)胞的凋亡的影響32-33
• 2.3 OA對(duì)小鼠肝缺血再灌注誘導(dǎo)的肝損傷中HMGB1、TLR4、p-ERK、p-JNK、p-P38蛋白表達(dá)水平的影響33-35
• 2.4 OA對(duì)炎癥因子TNF-a和IL-1b的轉(zhuǎn)錄和釋放的影響35-36
• 2.5 OA對(duì)小鼠肝缺血再灌注誘導(dǎo)的肝損傷中中性粒細(xì)胞募集的影響36-38
• 3 討論38-40
• 4 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-46
• 文獻(xiàn)綜述46-53
• 參考文獻(xiàn)50-53
• 致謝53-54
• 碩士期間發(fā)表的論文54

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1 孫悅平,呂式琪,姚嫻;齊墩果酸對(duì)小鼠肝臟的毒性作用[J];生理科學(xué);1983年05期

2 孫悅平;呂式琪;;齊墩果酸對(duì)小鼠肝臟的毒性作用[J];北京第二醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1983年04期

3 孫悅平;呂式琪;;齊墩果酸對(duì)小鼠肝臟的毒性作用[J];福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1983年04期

4 李樹殿;從龍牙id木中提取齊墩果酸的研究[J];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);1985年03期

5 馬伯良,王振宇,楊家海,李劍甫,崔永熙;齊墩果酸的降血脂研究[J];中藥藥理與臨床;1986年00期

6 田振坤;劉中申;匡海學(xué);;刺玫果中齊墩果酸的含量測(cè)定[J];中醫(yī)藥學(xué)報(bào);1987年03期

7 史東方;齊墩果酸的抗炎作用[J];中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào);1989年03期

8 張登科,孫文基,沙振方;35種植物的齊墩果酸含量比較[J];中藥材;1989年12期

9 李紅兵;馬占春;韓其昌;;薄層比色法測(cè)定槲寄生、連翹中齊墩果酸的含量[J];中成藥;1989年06期

10 武繼彪,黃文興,董榕;齊墩果酸對(duì)實(shí)驗(yàn)性動(dòng)脈粥樣硬化的預(yù)防作用[J];中藥藥理與臨床;1991年02期

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1 陳春風(fēng);付云芝;劉鳴華;;齊墩果酸成膠因素的探討及其結(jié)構(gòu)表征[A];中國化學(xué)會(huì)第29屆學(xué)術(shù)年會(huì)摘要集——第18分會(huì)：超分子組裝與軟物質(zhì)材料[C];2014年

2 張迪;王彥兵;劉繡華;;雙波長薄層掃描法測(cè)棗皮中齊墩果酸的含量[A];河南省化學(xué)會(huì)2012年學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2012年

3 吳勃巖;董靜;趙燕麗;;齊墩果酸對(duì)S_(180)荷瘤小鼠腫瘤細(xì)胞凋亡的影響[A];第十二次全國醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2014年

4 付全娟;張?jiān)?張立華;;石榴花中的齊墩果酸和熊果酸及抗氧化性能研究[A];山東植物生理學(xué)會(huì)第七次代表大會(huì)暨植物生物學(xué)與現(xiàn)代農(nóng)業(yè)研討會(huì)論文集[C];2012年

5 高大威;湯勝楠;段金婷;;齊墩果酸長循環(huán)脂質(zhì)體的制備及表征[A];中國化學(xué)會(huì)第28屆學(xué)術(shù)年會(huì)第3分會(huì)場(chǎng)摘要集[C];2012年

6 趙汗青;鄭鷺飛;張建軍;梁曉梅;王道全;;齊墩果酸肟酯化合物作為己糖胺酶(GlmS)抑制劑的設(shè)計(jì)、合成及活性研究[A];植保科技創(chuàng)新與病蟲防控專業(yè)化——中國植物保護(hù)學(xué)會(huì)2011年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2011年

7 陳星;張朝暉;楊瀟;劉玉楠;陳紅軍;饒為;;多壁碳納米管表面齊墩果酸印跡固相萃取復(fù)合材料制備及吸附性能研究[A];全國生物醫(yī)藥色譜及相關(guān)技術(shù)學(xué)術(shù)交流會(huì)（2012）會(huì)議手冊(cè)[C];2012年

8 容露萍;陳奕伸;廖華衛(wèi);萬正蘭;;復(fù)方貞芩肺寧膠囊藥材的提取工藝及制劑中齊墩果酸的含量測(cè)定研究[A];2014年廣東省藥師周大會(huì)論文集[C];2014年

9 劉小花;封士蘭;李蕓;;高效液相色譜法測(cè)定膚癢顆粒中齊墩果酸的含量[A];首屆中國中西部地區(qū)色譜學(xué)術(shù)交流會(huì)暨儀器展覽會(huì)論文集[C];2006年

10 趙汗青;宗廣輝;梁曉梅;張建軍;王道全;;齊墩果酸糖綴合物的合成及殺菌活性研究[A];公共植保與綠色防控[C];2010年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 杜向紅 劉偉;牛膝中齊墩果酸的薄層掃描測(cè)定[N];中國醫(yī)藥報(bào);2001年

2 記者　白毅;中國藥科大學(xué)研究發(fā)現(xiàn)：NO供體型齊墩果酸衍生物有特異性肝靶向作用[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

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1 陳小松;齊墩果酸通過膽汁酸受體TGR5減肥作用的分子機(jī)制研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 陳亞軍;齊墩果酸納米懸浮液研究[D];華中科技大學(xué);2005年

3 閆茂才;齊墩果酸衍生物的設(shè)計(jì)、合成與生物活性研究[D];沈陽藥科大學(xué);2008年

4 孫華;齊墩果酸類化合物的結(jié)構(gòu)改造及抗癌活性研究[D];沈陽藥科大學(xué);2007年

5 劉艷玲;高寒藏藥材麻花艽及其體細(xì)胞雜種齊墩果酸合成關(guān)鍵酶-β-amyrin合成酶基因克隆及其功能鑒定[D];山東大學(xué);2009年

6 劉佳;兩種天然產(chǎn)物抗腫瘤作用的分子機(jī)制[D];中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2014年

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1 楊蕊;齊墩果酸自微乳化制劑的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2008年

2 楊真真;組分中藥白花蛇舌草腸溶膠囊的制備及其體外釋放度的研究[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2015年

3 郭淑晶;齊墩果酸修飾與抗腫瘤活性研究[D];延邊大學(xué);2015年

4 王志琴;齊墩果酸對(duì)血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)乳小鼠心肌成纖維細(xì)胞增殖的影響及其機(jī)制[D];四川醫(yī)科大學(xué);2015年

5 李蔚雯;基于環(huán)糊精包合物的齊墩果酸親水凝膠骨架緩釋片研究[D];南昌大學(xué);2015年

6 王玄;齊墩果酸經(jīng)SIRT1/PML/AP-1信號(hào)通路對(duì)大鼠動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞增殖的調(diào)控[D];青島大學(xué);2015年

7 趙紫亮;中藥組方治療膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)研究[D];長春中醫(yī)藥大學(xué);2015年

8 趙曉明;齊墩果酸通過miR-122/Cyclin G1/MEF2D對(duì)肺癌細(xì)胞增殖影響的研究[D];濟(jì)南大學(xué);2015年

9 張夢(mèng);齊墩果酸“引經(jīng)”作用增強(qiáng)大黃素肝靶向性的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

10 徐亞沙;長期給予齊墩果酸對(duì)小鼠的肝毒性研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2016年

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本文編號(hào)：550988