本文關(guān)鍵詞：中和IL-17及受體對(duì)DSS誘導(dǎo)小鼠結(jié)腸炎的作用

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【摘要】：[目的與背景]炎癥性腸病(IBD,Inflammatory bowel disease)是慢性復(fù)發(fā)性胃腸道炎性疾病,由潰瘍性結(jié)腸炎(UC,ulcerative colitis)和克隆恩病(CD,Crohn's disease)構(gòu)成。近年發(fā)現(xiàn)Th17細(xì)胞在炎癥性腸病的發(fā)病機(jī)制中起重要的調(diào)控作用。因此Th17細(xì)胞所其分泌的細(xì)胞因子IL-17很有可能成為治療的潛在靶點(diǎn)。IL-17具有IL-17A和IL-17F兩種主要亞型;IL-17的受體主要有IL-17RA和IL-17RC兩種亞型。本研究中采用IL-17A、IL-17F的中和抗體阻斷IL-17細(xì)胞因子;IL-17RA和IL-17RC的中和抗體阻斷IL-17的受體。通過(guò)對(duì)DSS誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎模型的IL-17在兩個(gè)層面、4個(gè)主要位點(diǎn)的阻斷,消除IL-17的炎癥效應(yīng),削弱Th細(xì)胞的作用,并比較得出哪個(gè)位點(diǎn)的阻斷療效最佳。以期為炎癥性腸病的臨床治療提供新的靶點(diǎn)和方法。[材料與方法]84只C57BL/6J雌性小鼠隨機(jī)分為7組。正常對(duì)照組自由飲水;其余六組小鼠均飲用4%葡聚糖硫酸納(Dextran sulfate sodium)溶液。DSS組僅飲用4%DSS溶液外不加任何其他刺激;DSS+NS組腹腔內(nèi)注射生理鹽水;IL-17A+DSS組腹腔內(nèi)注射IL-17A抗體;IL-17F+DSS組腹腔內(nèi)注射IL-17F抗體;IL-17RA+DSS組腹腔內(nèi)注射IL-17RA抗體;IL-17RC+DSS組腹腔內(nèi)注射IL-17RC抗體。腹腔內(nèi)注射于造模后第2、4、6天給藥。7天后處死小鼠。取小鼠血ELISA法檢測(cè)IL-17A、IL-17F、IL-17RA、IL-17RC的含量。免疫組化及Western Blot法檢測(cè)小鼠結(jié)腸組織IL-17A、IL-17F、IL-17RA、IL-17RC的表達(dá)。流式細(xì)胞分析檢測(cè)小鼠血、脾臟、腸系膜淋巴結(jié)、腸粘膜固有層中Th1、Tc、Th17、Treg細(xì)胞的比侈例。[結(jié)果]1.在造模7天中,與正常對(duì)照組比較DSS組、DSS+NS組、IL-17A+DSS組、IL-17RA+DSS組、IL-17RC+DSS小鼠的體重下降、疾病活動(dòng)指數(shù)升高(p0.05)。而IL-17F+DSS組小鼠體重也有輕度下降、疾病活動(dòng)指數(shù)也輕度增高,但不如其余DSS組明顯。7天后處死小鼠,DSS組、NS+DSS組、IL-17A+DSS組、IL-17RA+DSS組、IL-17RC+DSS組與正常對(duì)照組比較小鼠的結(jié)腸長(zhǎng)度縮短、結(jié)腸組織的病理組織學(xué)評(píng)分增高(p0.01)。而IL-17F+DSS組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度縮短、結(jié)腸組織的病理組織學(xué)評(píng)分增高程度均低于其余DSS組(p0.01)。2.DSS誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎小鼠與正常對(duì)照組相比,結(jié)腸組織中的IL-17A、IL-17F、IL-17RA 和 IL-17RC 均明顯升高(p0.01)。與 DSS 組比較,給予 IL-17A 抗體、IL-17F抗體、IL-17RA抗體和IL-17RC抗體可分別降低結(jié)腸組織中的IL-17A、IL-17F、IL-17RA和IL-17RC的含量(p0.05)。IL-17F抗體可減少DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎小鼠的結(jié)腸組織中IL-17A、IL-17F、IL-17RA和IL-17RC的表達(dá)。3.與正常對(duì)照組相比,DSS誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎小鼠的血、脾臟、腸系膜淋巴結(jié)及腸粘膜固有層的Th1細(xì)胞、Tc細(xì)胞、Th17細(xì)胞增多,Treg細(xì)胞減少。給予IL-17F抗體可使得Th1細(xì)胞、Tc細(xì)胞、Th17細(xì)胞較模型組減少,Treg細(xì)胞較模型組增多。[結(jié)論]1.DSS誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎小鼠,其血及結(jié)腸組織中IL-17及其受體的表達(dá)明顯增高。并出現(xiàn)了全身及局部組織T細(xì)胞亞群的失衡。2.給予IL-17及受體的抗體,可降低IL-17及受體在外周血及結(jié)腸組織中的表達(dá)。3.IL-17F抗體可緩解DSS誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎小鼠的臨床癥狀及減輕病理組織學(xué)改變。.4.IL-17F抗體可降低實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎小鼠的血及結(jié)腸組織中IL-17及受體的表達(dá),n少Th17細(xì)胞,改善T細(xì)胞不同亞群的失衡狀態(tài),達(dá)到一定程度的治療效果。
【關(guān)鍵詞】：IL-17抗體 IL-17受體 炎癥性腸病 葡聚糖硫酸鈉 實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R574.62
【目錄】：

• 英文縮略詞表5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-16
• 第一部分 中和IL-17及受體對(duì)DSS誘導(dǎo)小鼠實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎的癥狀、病理學(xué)及血中IL-17及受體表達(dá)的影響16-36
• 材料16-18
• 方法18-22
• 結(jié)果22-32
• 討論32-36
• 第二部分 中和IL-17及受體對(duì)結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸組織中IL-17及受體的表達(dá)的影響36-55
• 材料36-40
• 方法40-43
• 結(jié)果43-53
• 討論53-55
• 第三部分 中和IL-17及受體對(duì)結(jié)腸炎小鼠T細(xì)胞亞群影響的研究55-93
• 材料55-57
• 方法57-61
• 結(jié)果61-89
• 討論89-93
• 全文結(jié)論93-94
• 參考文獻(xiàn)94-102
• 綜述102-110
• 參考文獻(xiàn)107-110
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況110-111
• 致謝111

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 Akiko Yamada;Rieko Arakaki;Masako Saito;Takaaki Tsunematsu;Yasusei Kudo;Naozumi Ishimaru;;Role of regulatory T cell in the pathogenesis of inflammatory bowel disease[J];World Journal of Gastroenterology;2016年07期

2 Aito Ueno;Abhisek Ghosh;Daniel Hung;Ji Li;Humberto Jijon;;Th17 plasticity and its changes associated with inflammatory bowel disease[J];World Journal of Gastroenterology;2015年43期

3 Danuta Owczarek;Dorota Cibor;Mikolaj K Glowacki;Tomasz Rodacki;Tomasz Mach;;Inflammatory bowel disease:Epidemiology,pathology and risk factors for hypercoagulability[J];World Journal of Gastroenterology;2014年01期

4 Tiago Nunes;Gionata Fiorino;Silvio Danese;Miquel Sans;;Familial aggregation in inflammatory bowel disease:Is it genes or environment?[J];World Journal of Gastroenterology;2011年22期

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本文編號(hào)：550901