本文關鍵詞：補腎解毒法與健脾解毒法對HBV慢性感染不同階段患者外周血樹突狀細胞介導的T淋巴細胞功能影響的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 擬運用HBV慢性感染過程不同階段的患者外周血DCs與T淋巴細胞體外共培養(yǎng)的細胞模型和中藥血漿藥理實驗方法,比較補腎解毒、健脾解毒哪種方法更能促進DCs活化特異性T淋巴細胞,哪種方法是提高HBV慢性感染后免疫細胞功能、免疫學應答恢復,治療慢性乙型肝炎的主要方法,為臨床提高中醫(yī)治療慢乙肝的療效提供客觀依據(jù)、治療思路和研究基礎。 方法： 本研究通過前后抽取HBV慢性感染免疫耐受期和免疫清除期共16例患者外周血80ml,另設健康對照組8例,分離培養(yǎng)出成熟的樹突狀細胞,在培養(yǎng)過程中采用補腎解毒與健脾解毒復方中藥藥物血漿分別對DCs進行體外干預,并負載HBV核心蛋白,然后與自身的T淋巴細胞共培養(yǎng)72小時,應用流式細胞技術檢測T細胞表面分子CD3、CD28、 CD4、CD8及PD-1的表達水平,并用ELISA試劑盒檢測T細胞上清液中IFN-γ分泌水平。比較哪種方法干預對免疫細胞功能的恢復影響更大。 結果： 1.干預前的T淋巴細胞(未經(jīng)中藥血漿干預也未與DCs共培養(yǎng)的T細胞)上CD4、CD28的表達水平,健康人組明顯高于免疫耐受組和免疫清除組,而以免疫耐受組的患者表達最低,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。CD8、PD-1的表達健康人組明顯低于免疫耐受組和免疫清除組,其中又以免疫耐受組的表達最高,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。CD3的檢測結果健康人和免疫清除期組患者差異無顯著意義(p0.05),但耐受期組患者表達明顯低下(p0.05)。上清液中分泌的IFN-γ水平在健康人和免疫清除期組患者差異無顯著意義(p0.05),在耐受期組患者分泌水平明顯低下(p0.05)。 2.在免疫耐受組和免疫清除組的HBV慢性感染患者經(jīng)補腎解毒(六味甘露中劑量)和健脾解毒(四君甘露小劑量)藥物血漿干預后的DC與T細胞共培養(yǎng),檢測其T細胞表面分子的表達率。兩種方法在一定程度上都能提高CD3、CD4、CD28的表達水平和上清液中分泌的IFN-γ水平,降低CD8、PD-1的表達水平。 結論： 1.慢性HBV感染免疫清除期和免疫耐受期患者存在T淋巴細胞功能的缺陷,以免疫耐受期患者細胞免疫功能是最低的。 2.通過補腎解毒、健脾解毒藥物血漿在一定程度上能夠促進HBV慢性感染患者樹突狀細胞的成熟,使得DCs激活T細胞的功能明顯提高,促進T細胞表面分子的表達,并且補腎解毒法對慢性HBV感染免疫耐受期患者細胞免疫學功能的影響更為顯著。
【關鍵詞】：慢性HBV感染 樹突狀細胞 T細胞 共培養(yǎng) 補腎解毒法 健脾解毒法
【學位授予單位】：湖南中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R512.62
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 英文~.略詞表11-13
• 引言13-15
• 第一部分15-26
• 1 材料16-17
• 1.1 血液標本采集16
• 1.2 實驗試劑16
• 1.3 實驗設備16-17
• 2 實驗方法17-20
• 2.1 外周血單個核細胞(PBMCs)的提取(密度梯度離心法)17
• 2.2 外周血DCs的分離、培養(yǎng)及鑒定17-18
• 2.3 外周血自體T細胞的分離18-19
• 2.4 DCs與自身T淋巴細胞共培養(yǎng)19
• 2.5 T淋巴細胞表面分子的流式檢測19-20
• 3 實驗結果20-24
• 3.1 倒置顯微鏡下觀察DCs培養(yǎng)過程中的形態(tài)結構變化20-21
• 3.2 電鏡下DCs的形態(tài)學特征21
• 3.3 健康人經(jīng)藥物血漿干預及未經(jīng)藥物血漿干預的DCs與T共培養(yǎng)后的T淋巴細胞表面分子表達的結果21-22
• 3.4 部分流式結果22-24
• 4 討論24-25
• 5 小結25-26
• 第二部分 大鼠補腎解毒與健脾解毒藥物血漿的制備及分析26-34
• 1 材料26-28
• 1.1 實驗動物26
• 1.2 實驗中藥復方26-27
• 1.3 主要器材與試劑27-28
• 2 實驗方法28-31
• 2.1 復方中藥湯劑的制備28
• 2.2 實驗動物分組28-29
• 2.3 實驗動物給藥方法29-30
• 2.4 大鼠腹主動脈采血30-31
• 3 實驗結果31-32
• 4 討論32-34
• 第三部分34-52
• 1 實驗資料34-35
• 1.1 病例來源34
• 1.2 病例納入標準34-35
• 1.3 病例排除標準35
• 2 實驗方法35-38
• 2.1 主要試劑35-36
• 2.2 主要儀器36
• 2.3 實驗分組36
• 2.4 具體實驗步驟36-38
• 2.5 統(tǒng)計學方法38
• 3 結果38-47
• 3.1 入組患者及健康人基本情況38-39
• 3.2 T淋巴細胞表面分子及功能檢測結果39-47
• 4 討論47-51
• 5 結論51-52
• 致謝52-54
• 參考文獻54-57
• 綜述57-68
• 參考文獻64-68
• 攻讀碩士學位期間主要研究成果及發(fā)表論文68

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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  本文關鍵詞：補腎解毒法與健脾解毒法對HBV慢性感染不同階段患者外周血樹突狀細胞介導的T淋巴細胞功能影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：415414