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人KCTD9真核表達(dá)質(zhì)粒及慢病毒表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定

發(fā)布時(shí)間:2024-04-10 20:28
  背景及目的 我國(guó)乙型病毒性肝炎發(fā)病率高(約5%),在慢性乙型肝炎基礎(chǔ)上誘發(fā)的重型肝炎病情尤為兇險(xiǎn),病情進(jìn)展迅速,病死率較高,可達(dá)到70%以上,一直備受臨床醫(yī)生和研究人員的重視。目前內(nèi)科治療對(duì)于該疾病的作用有限,雖然肝移植是終末期肝病治療的最終選擇,但因我國(guó)面臨嚴(yán)重的供體短缺、移植價(jià)格昂貴等問(wèn)題而受到臨床應(yīng)用的限制,因此免疫治療為重型肝炎的治療提供了新的思路。重型乙型肝炎發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,涉及到病毒和宿主雙重因素。其中免疫介導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷中,乙型肝炎病毒(HBV)抗原特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)細(xì)胞的作用及機(jī)制已經(jīng)得到較好闡明,而非特異性免疫在其中的作用卻尚不明確。本研究室的前期研究首次揭示肝臟自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)在病毒誘導(dǎo)的肝損傷中發(fā)揮至關(guān)重要的作用。 本研究室前期通過(guò)基因芯片對(duì)重癥乙型肝炎患者和輕中度慢性乙型肝炎患者的外周血單個(gè)核細(xì)胞的基因差異表達(dá)譜研究,發(fā)現(xiàn)離子通道相關(guān)基因--potassium channeltetramerisation domain containing9(KCTD9)在慢性乙肝的重癥階段患者的外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)中高度表達(dá),是重型乙型肝炎的一個(gè)下調(diào)...

【文章頁(yè)數(shù)】:57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖2陽(yáng)性菌落5個(gè),搖菌,菌液分別做PCR后凝膠電泳

圖2陽(yáng)性菌落5個(gè),搖菌,菌液分別做PCR后凝膠電泳

搖菌,菌液分別做PCR后凝膠電泳。圖中4bp與2000bp之間有清晰明亮條帶。的質(zhì)粒小提試劑盒提取pcDNA3.1/CT-KCTD9NotI雙....


圖3pcDNA3.1/CT-GFP載體圖譜及其酶切位點(diǎn)

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圖4雙酶切pcDNA3.1-KCTD9

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華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論酶切產(chǎn)物經(jīng)凝膠電泳鑒定,可見(jiàn)2條明亮帶,一條位于2k1000bp與2000bp之間,表明載體pcDNA3.1/CT-KC....


圖6與NCBI文庫(kù)中KCTD9蛋白氨基酸比對(duì),構(gòu)建成功pCDNA3.1-hKCTD9的中KCTD9蛋白氨基酸序列比對(duì)結(jié)果顯示第258位氨基酸為同義突變,不會(huì)影響蛋白質(zhì)空

圖6與NCBI文庫(kù)中KCTD9蛋白氨基酸比對(duì),構(gòu)建成功pCDNA3.1-hKCTD9的中KCTD9蛋白氨基酸序列比對(duì)結(jié)果顯示第258位氨基酸為同義突變,不會(huì)影響蛋白質(zhì)空

華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文5構(gòu)建成功pCDNA3.1-hKCTD9的測(cè)序。獲得的KCTD9基因與NCBI基因文庫(kù)中KCTD9因比對(duì)結(jié)果,除第69....



本文編號(hào):3950318

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