吲哚胺2,3-二氧化酶(IDO)與乙肝免疫耐受相關(guān)性研究
發(fā)布時(shí)間:2024-02-26 19:43
目的最近研究發(fā)現(xiàn),吲哚胺2,3-二氧化酶(IDO)在免疫調(diào)控中發(fā)揮著重要作用,可能是打破乙肝免疫耐受的重要靶點(diǎn)之一,但其具體機(jī)制尚不明確。本文通過觀察吲IDO的表達(dá)與乙肝病毒復(fù)制水平,以及T細(xì)胞亞群功能之間的關(guān)系,研究IDO在慢性乙肝免疫耐受中的作用及其可能機(jī)制,為重建機(jī)體主動(dòng)免疫提供一個(gè)新途徑。 方法1.病例選擇試驗(yàn)組:我院肝膽外科2007年9月至2008年1月,50例慢性乙肝患者,年齡28~65歲(43.9±56.1)歲;其中男38例,女12例;病程1個(gè)月到30年,中位數(shù)125個(gè)月。對照組:我院體檢中心同期50例健康體檢人員,年齡18~70歲;(33.9±68.1)歲;其中男28例,女22例。排除標(biāo)準(zhǔn):<18歲或>80歲,接受過激素治療,乙肝患者入院前2周接受過抗病毒治療,合并HCV感染,患有免疫缺陷病,血液系統(tǒng)疾病,機(jī)體有感染灶,包括膽道感染,病人不同意。2.標(biāo)本采集和處理方法采集50例慢性乙肝患者外周靜脈血內(nèi)淋巴細(xì)胞和血清,分別置于-80℃冷凍待測,同時(shí)采集同期50例健康體檢人員外周靜脈血淋巴細(xì)胞和血清作正常對照組。實(shí)時(shí)熒光定量PCR (Real-time fluo...
【文章頁數(shù)】:40 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
英漢縮略語名詞對照
摘要
ABSTRACT
正文:吲哚胺2,3-二氧化酶(IDO)與乙肝免疫耐受相關(guān)性研究
前言
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 試驗(yàn)標(biāo)本
1.2 主要實(shí)驗(yàn)材料及設(shè)備
1.2.1 主要實(shí)驗(yàn)材料
1.2.2 主要設(shè)備
2 試驗(yàn)方法和步驟
2.1 淋巴細(xì)胞的分離和血清的提取
2.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 法(RT-PCR)檢測IDOmRNA 的表達(dá)水平
2.2.1 總RNA 提取
2.2.2 逆轉(zhuǎn)錄
2.2.3 熒光定量PCR
2.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
2.3 Western Blot 法檢測IDO 蛋白含量
2.3.1 蛋白提取
2.3.2 SDS-PAGE 電泳
2.3.3 化學(xué)發(fā)光,顯影,定影
2.4 反相高效液相色譜檢測IDO 活性
2.5 HBV-DNA 滴度
2.6 流式細(xì)胞儀檢測T 細(xì)胞亞群功能
2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
本文編號:3911761
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【學(xué)位級別】:碩士
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英漢縮略語名詞對照
摘要
ABSTRACT
正文:吲哚胺2,3-二氧化酶(IDO)與乙肝免疫耐受相關(guān)性研究
前言
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 試驗(yàn)標(biāo)本
1.2 主要實(shí)驗(yàn)材料及設(shè)備
1.2.1 主要實(shí)驗(yàn)材料
1.2.2 主要設(shè)備
2 試驗(yàn)方法和步驟
2.1 淋巴細(xì)胞的分離和血清的提取
2.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 法(RT-PCR)檢測IDOmRNA 的表達(dá)水平
2.2.1 總RNA 提取
2.2.2 逆轉(zhuǎn)錄
2.2.3 熒光定量PCR
2.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
2.3 Western Blot 法檢測IDO 蛋白含量
2.3.1 蛋白提取
2.3.2 SDS-PAGE 電泳
2.3.3 化學(xué)發(fā)光,顯影,定影
2.4 反相高效液相色譜檢測IDO 活性
2.5 HBV-DNA 滴度
2.6 流式細(xì)胞儀檢測T 細(xì)胞亞群功能
2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
致謝
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本文編號:3911761
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