本文關(guān)鍵詞：黏液填充在消化道上皮微缺損及腸屏障功能作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景及目的小腸上皮細(xì)胞由隱窩基底部的干細(xì)胞不斷生成并在絨毛頂端脫落,這一過程形成腸上皮單層細(xì)胞間的微缺損(epithelial gaps)。然而,生理狀態(tài)下,97%的gaps被非通透性的物質(zhì)所填充,從而維持了腸上皮的屏障功能。但究竟被什么物質(zhì)所填充,目前尚不清楚。腸道被覆黏液主要是由杯狀細(xì)胞分泌的一種糖蛋白,其主要成分Muc2是含致密結(jié)構(gòu)的大分子0-糖基化膠樣黏蛋白,對(duì)黏膜上皮起保護(hù)和潤(rùn)滑作用,抵抗病原微生物及其他有害物質(zhì)對(duì)黏膜的損傷。無菌的致密的內(nèi)黏液層是阻止腸道細(xì)菌與上皮細(xì)胞接觸的重要的物理屏障,研究發(fā)現(xiàn),潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis,UC)患者,隨著內(nèi)黏液層的破壞,細(xì)菌入侵到原本無菌的內(nèi)黏液層。黏液的厚度及性質(zhì)在UC的發(fā)病機(jī)制中起重要作用。共聚焦激光顯微內(nèi)鏡(Confocal Laser Endomicroscopy, CLE)是先進(jìn)的內(nèi)鏡檢查技術(shù),擁有組織學(xué)水平的分辨率和放大優(yōu)勢(shì),可以清楚觀察上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)及亞細(xì)胞結(jié)構(gòu),并被譽(yù)為“光學(xué)活檢”。既往研究通過CLE可以觀察到人類回腸末端和直腸上皮中存在與單個(gè)上皮細(xì)胞大小相似的gaps結(jié)構(gòu)。本研究旨在探討?zhàn)ひ菏欠駞⑴c填充上皮微缺損,并進(jìn)一步評(píng)價(jià)黏液填充上皮微缺損在局部腸屏障功能中的作用。方法自2014年6月至2014年12月,取就診于山東大學(xué)齊魯醫(yī)院消化內(nèi)科行共聚焦腸鏡檢查的UC患者及對(duì)照者的回腸末端組織,用卡諾氏液(Carnoy's solution)固定過夜,常規(guī)石蠟切片后行過碘酸雪夫AB-PAS染色,并行免疫組化方法和免疫熒光方法觀察gaps及Muc2黏蛋白表達(dá)分布情況。另外,分析了自2013年1月至2014年12月至我院行CLE檢查的UC患者和對(duì)照者的CLE回腸末端圖片,選取圖像清晰病例,共有39例UC患者及34例對(duì)照者共聚焦圖像納入本研究。運(yùn)用改良Watson分級(jí)方法,Ⅱ級(jí)為功能性缺損,表現(xiàn)為單個(gè)細(xì)胞脫落伴熒光素滲出；Ⅲ級(jí)為結(jié)構(gòu)性缺損,表現(xiàn)為大片細(xì)胞脫落,伴上皮熒光素滲漏。評(píng)價(jià)Watson Ⅱ/Ⅲ gaps缺損周長(zhǎng)占所觀察視野絨毛周長(zhǎng)的百分比,用以評(píng)估回腸末端局部腸屏障功能。并分析兩組之間杯狀細(xì)胞占所觀察視野絨毛上皮細(xì)胞數(shù)目的百分比,用以評(píng)估分泌黏液的杯狀細(xì)胞在兩組之間是否有變化。結(jié)果在熒光顯微鏡及光學(xué)顯微鏡下,均觀察到黏液參與了填充上皮微缺損,且UC患者上皮微缺損未被黏液填充率增加,兩組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(27.52 (25,29.68) vs 12.27 (9.78 16.67), p0.001)。CLE下可清晰辨認(rèn)杯狀細(xì)胞和gaps結(jié)構(gòu),另外,分析CLE下回腸末端圖像發(fā)現(xiàn),UC患者存在明顯的局部腸屏障功能障礙,兩組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(5.33(3.48,6.62)vs 0.27(0.00,0.69),p0.001)；且UC患者分泌黏液的杯狀細(xì)胞數(shù)目占上皮細(xì)胞數(shù)目的比率明顯降低,兩組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(17.38(16.00,19.87)vs 23.44(20.24,26.18),p0.001)。對(duì)上皮微缺損(%)與杯狀細(xì)胞(%)進(jìn)行Spearman秩相關(guān)分析,兩組之間呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.74,p0.001)。結(jié)論1.明確了gaps存在時(shí),黏液填充gaps是腸上皮屏障功能維持的直接生理機(jī)制。2.共聚焦內(nèi)鏡下,UC患者gaps缺損率較對(duì)照組明顯增加,杯狀細(xì)胞數(shù)目較對(duì)照組明顯降低,兩者呈顯著負(fù)相關(guān)。3.本研究發(fā)現(xiàn),UC患者gaps未被黏液填充率增加,且存在局部腸屏障功能缺損。
【關(guān)鍵詞】：上皮微缺損 腸屏障功能 黏液 共聚焦激光顯微內(nèi)鏡 杯狀細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R574
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 符號(hào)說明11-12
• 前言12-16
• 資料與方法16-22
• 結(jié)果22-24
• 討論24-28
• 結(jié)論28-29
• 附表及附圖29-34
• 參考文獻(xiàn)34-38
• 綜述38-46
• 參考文獻(xiàn)43-46
• 致謝46-47
• 攻讀碩士期間發(fā)表的文章47-48
• 學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表48

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 楊澤武;藏墨如藏金[N];市場(chǎng)報(bào);2001年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 周曉艷;黏液填充在消化道上皮微缺損及腸屏障功能作用的研究[D];山東大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：黏液填充在消化道上皮微缺損及腸屏障功能作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號(hào)：355588