本文關(guān)鍵詞：ω-3長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸對(duì)腸道微生態(tài)的調(diào)節(jié)作用及其對(duì)小腸上皮細(xì)胞損傷的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：ω-3長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸(co-3PUFAs)是重要的保健功能成分,其對(duì)多種疾病具有防治效果。近年來,腸道微生態(tài)變化在人體健康和疾病發(fā)生過程中的作用越來越受到關(guān)注,而ω-3PUFAs對(duì)腸道微生態(tài)的調(diào)節(jié)作用目前尚不清楚。本文以高含量ω-3PUFAs魚油(60%)為材料,以灌胃方式給藥ICR小鼠,以生理鹽水作為對(duì)照,并收集處理組和對(duì)照組小鼠糞便,采用PCR-DGGE技術(shù)分析糞便樣品中優(yōu)勢(shì)菌群的變化,以探討ω-3PUFAs對(duì)腸道微生態(tài)的影響。結(jié)果表明,高含量ω-3PUFAs魚油的攝入可顯著改變ICR小鼠腸道微生態(tài),具體表現(xiàn)在于高含量ω-3PUFAs可引起小鼠糞便中螺旋桿菌、梭菌、鞘脂單胞菌、假單胞菌及其他多種菌的數(shù)量減少。采用qPCR對(duì)處理組和對(duì)照組中幽門螺旋桿菌數(shù)量變化進(jìn)行了定量測(cè)定,結(jié)果表明ω-3PUFAs處理后,ICR小鼠腸道幽門螺旋桿菌數(shù)量顯著降低,與PCR-DGGE結(jié)果相吻合。本實(shí)驗(yàn)說明了ω-3PUFAs可以調(diào)節(jié)腸道菌群微生態(tài),并能通過降低某些有害菌株數(shù)量,預(yù)防疾病發(fā)生。 現(xiàn)代環(huán)境問題與食品安全問題日益突出,人類健康受到嚴(yán)峻挑戰(zhàn),重金屬中毒的事例頻繁出現(xiàn),小腸上皮細(xì)胞是人體內(nèi)連接腸道內(nèi)外環(huán)境的最主要媒介,同時(shí)也是抵御病原菌入侵腸道的第一道防線,研究ω-3PUFAs對(duì)重金屬損傷的小腸上皮細(xì)胞的作用具有重要的現(xiàn)實(shí)意義,也有利于進(jìn)一步揭示ω-3PUFAs對(duì)腸道健康的影響。本文以大鼠小腸上皮細(xì)胞(IEC-6)為研究對(duì)象,探討ω-3PUFAs對(duì)重金屬損傷的IEC-6細(xì)胞的存活率的影響,并通過測(cè)定細(xì)胞中ROS、EGF和IL-6的含量變化,研究其影響機(jī)制。結(jié)果表明：ω-3PUFAs能緩解重金屬中毒所帶來的不良影響,提高小腸上皮細(xì)胞的存活率。該作用可能是通過抑制細(xì)胞中ROS、EGF及IL-6的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。由此推斷,其作用機(jī)制與氧化損傷和促炎因子分泌水平有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：ω-3PUFAs 腸道菌群 PCR-DGGE IEC-6細(xì)胞 重金屬損傷 炎性因子
【學(xué)位授予單位】：浙江工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R574
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-13
• 第一章 緒論13-24
• 1.1 微生態(tài)學(xué)13-14
• 1.2 腸道微生態(tài)及其研究現(xiàn)狀14-20
• 1.2.1 腸道菌群14-15
• 1.2.2 腸道微生態(tài)平衡及影響因素15-16
• 1.2.3 腸道菌群與常見疾病16-18
• 1.2.3.1 腸道菌群與炎癥性腸病16
• 1.2.3.2 腸道菌群與肥胖及相關(guān)代謝紊亂疾病16-17
• 1.2.3.3 腸道菌群與腎臟疾病17
• 1.2.3.4 腸道菌群與骨質(zhì)疏松17-18
• 1.2.3.5 腸道菌群與焦慮、抑郁癥18
• 1.2.4 微生態(tài)制劑的應(yīng)用18-20
• 1.3 小腸上皮細(xì)胞及其研究進(jìn)展20-22
• 1.3.1 小腸上皮細(xì)胞20
• 1.3.2 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)小腸上皮細(xì)胞的調(diào)控20-21
• 1.3.2.1 氨基酸對(duì)小腸上皮細(xì)胞的調(diào)控20
• 1.3.2.2 維生素對(duì)小腸上皮細(xì)胞的調(diào)控20-21
• 1.3.2.3 生長(zhǎng)因子對(duì)小腸上皮細(xì)胞的調(diào)控21
• 1.3.2.4 脂類對(duì)小腸上皮細(xì)胞的調(diào)控21
• 1.3.3 小腸菌群與小腸上皮細(xì)胞間關(guān)系的研究進(jìn)展21-22
• 1.4 ω-3PUFAs與腸道健康的研究進(jìn)展22-23
• 1.4.1 ω-3長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸22
• 1.4.2 ω-3PUFAs對(duì)腸道微生態(tài)的影響22
• 1.4.3 ω-3PUFAs對(duì)小腸上皮細(xì)胞的影響22-23
• 1.5 本課題選題及研究意義23-24
• 第二章 高ω-3PUFAs含量魚油對(duì)小鼠腸道菌群的影響24-42
• 2.1 引言24-25
• 2.2 實(shí)驗(yàn)材料與儀器25
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料25
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器25
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法25-32
• 2.3.1 魚油脂肪酸成份檢測(cè)25-26
• 2.3.2 小鼠處理及樣品收集26
• 2.3.3 DNA提取26-28
• 2.3.4 PCR-DGGE28-29
• 2.3.4.1 引物設(shè)計(jì)28-29
• 2.3.4.2 PCR擴(kuò)增29
• 2.3.4.3 DGGE29
• 2.3.4.4 DGGE條帶回收29
• 2.3.5 回收條帶DNA的純化和克隆29-30
• 2.3.6 DGGE條帶測(cè)序30-31
• 2.3.6.1 連接反應(yīng)30
• 2.3.6.2 連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化30
• 2.3.6.3 藍(lán)白斑篩選30-31
• 2.3.6.4 質(zhì)粒提取31
• 2.3.6.5 M13+/-測(cè)序31
• 2.3.7 進(jìn)化分析31
• 2.3.8 熒光實(shí)時(shí)定量PCR31-32
• 2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果32-40
• 2.4.1 魚油中各脂肪酸含量的檢測(cè)32-33
• 2.4.2 魚油對(duì)小鼠健康的影響33
• 2.4.3 PCR-DGGE分析33-36
• 2.4.3.1 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物33-34
• 2.4.3.2 DGGE電泳圖譜34-35
• 2.4.3.3 目標(biāo)條帶DNA的純化35-36
• 2.4.4 測(cè)序結(jié)果36-37
• 2.4.5 進(jìn)化分析37-38
• 2.4.6 魚油組中腸道菌群的變化38-39
• 2.4.7 幽門螺旋桿菌qPCR定量結(jié)果39-40
• 2.5 討論40-41
• 2.6 本章小結(jié)41-42
• 第三章 ω-3 PUFAs對(duì)金屬離子損傷的IEC-6細(xì)胞生長(zhǎng)的影響及其機(jī)理研究42-70
• 3.1 引言42
• 3.2 實(shí)驗(yàn)材料與試劑42
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法42-44
• 3.3.1 IEC-6細(xì)胞培養(yǎng)42-43
• 3.3.2 樣品配制43
• 3.3.3 MTT分析43-44
• 3.3.3.1 金屬離子及ω-3PUFAs濃度篩選43
• 3.3.3.2 ω-3PUFAs對(duì)金屬離子損傷細(xì)胞存活率的影響43-44
• 3.3.4 ω-3PUFAs對(duì)金屬離子損傷的IEC-6細(xì)胞的保護(hù)機(jī)制研究44
• 3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果44-68
• 3.4.1 金屬離子及ω-3PUFAs濃度篩選44-47
• 3.4.1.1 Cu~(2+)濃度篩選44
• 3.4.1.2 Cd~(3+)濃度篩選44-45
• 3.4.1.3 Pb~(2+)濃度篩選45
• 3.4.1.4 DHA安全濃度篩選45-46
• 3.4.1.5 EPA安全濃度篩選46-47
• 3.4.2 ω-3PUFAs對(duì)金屬離子損傷細(xì)胞存活率的影響47-57
• 3.4.2.1 DHA對(duì)IEC-6細(xì)胞Cu~(2+)損傷的影響47-48
• 3.4.2.2 EPA對(duì)IEC-6細(xì)胞Cu~(2+)損傷的影響48-50
• 3.4.2.3 DHA對(duì)IEC-6細(xì)胞Cd~(3+)損傷的影響50-52
• 3.4.2.4 EPA對(duì)IEC-6細(xì)胞Cd~(3+)損傷的影響52-53
• 3.4.2.5 DHA對(duì)IEC-6細(xì)胞Pb~(2+)損傷的影響53-55
• 3.4.2.6 EPA對(duì)IEC-6細(xì)胞Pb~(2+)損傷的影響55-57
• 3.4.3 ω-3PUFAs對(duì)金屬離子損傷的IEC-6細(xì)胞的保護(hù)機(jī)制研究57-68
• 3.4.3.1 DHA與Cu~(2+)作用時(shí)細(xì)胞ROS、EGF及IL-6表達(dá)水平的變化57-59
• 3.4.3.2 EPA與Cu~(2+)作用時(shí)細(xì)胞ROS、EGF及IL-6表達(dá)水平的變化59-61
• 3.4.3.3 DHA與Cd~(3+)作用時(shí)細(xì)胞ROS、EGF及IL-6表達(dá)水平的變化61-62
• 3.4.3.4 EPA與Cd~(3+)作用時(shí)細(xì)胞ROS、EGF及IL-6表達(dá)水平的變化62-64
• 3.4.3.5 DHA與Pb~(2+)作用時(shí)細(xì)胞ROS、EGF及IL-6表達(dá)水平的變化64-66
• 3.4.3.6 EPA與Pb~(2+)作用時(shí)細(xì)胞ROS、EGF及IL-6表達(dá)水平的變化66-68
• 3.5 討論68
• 3.6 本章小結(jié)68-70
• 第四章 結(jié)論與展望70-72
• 參考文獻(xiàn)72-79
• 致謝79-80
• 攻讀學(xué)位期間參加的科研項(xiàng)目和成果80

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 黃志清;陳小玲;陳代文;余冰;何軍;;長(zhǎng)鏈n-3多不飽和脂肪酸對(duì)腸上皮細(xì)胞促炎細(xì)胞因子基因mRNA表達(dá)的影響[J];動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào);2012年07期

2 梁榕旺;徐淑莉;韓慶廣;郭熠潔;趙國(guó)琦;;腸上皮細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)調(diào)控研究進(jìn)展[J];飼料工業(yè);2009年07期

  本文關(guān)鍵詞：ω-3長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸對(duì)腸道微生態(tài)的調(diào)節(jié)作用及其對(duì)小腸上皮細(xì)胞損傷的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：355486