目的:三氧化二砷（Arsenic trioxide,ATO）可以激活TGFβ/Smad信號通路引起HSCs活化,并且ATO對PML類泛素化也有調控作用。葡萄籽原花青素（Grape seed proanthocyanidin extract,GSPE）可調節(jié)TGFβ/Smad信號通路拮抗砷誘導的肝纖維化。但目前PML類泛素化是否在ATO誘導的HSCs活化中發(fā)揮作用以及原花青素是否調控PML類泛素化激活TGFβ/Smad信號通路未見報道。因此本研究用ATO和GSPE對HSCs進行干預,驗證ATO是否通過PML類泛素化修飾誘導HSCs活化,為砷引起的肝纖維化的防治提供策略;探討原花青素是否通過調控PML類泛素化修飾拮抗ATO誘導的肝纖維化,為完善GSPE的作用機制提供理論依據(jù)。方法:本研究采用HSCs作為實驗對象,利用ATO（2μmol/L）,GSPE（50 mg/L）,PML小干擾RNA（PML siRNA）,UBC9 小干擾 RNA（UBC9 siRNA）以及 RNF4 小干擾 RNA（RNF4 siRNA）干預細胞,CCK-8分析細胞活性;Western Blot測定PML類泛素化修飾... 

【文章來源】：石河子大學新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PML蛋白類泛素化修飾在ATO誘導的肝纖維化中的作用6.葡萄籽原花青素提取物（Grapeseedproanthocyanidinextract,GSPE）

PML蛋白類泛素化在砷致人HSCs纖維化中作用及原花青素的干預效果15表11ATO和不同濃度的GSPE干預后對HSCs活性的影響（n=3,xs）ATO（mol/L）GSPE（mg/L）細胞活性01.000.000251.120.02500.940.02201.350.02251.170.02500.790.02注：同一時間與對照組比較，P<0.05；同一濃度組與ATO組比較，P<0.05。2.ATO和GSPE對炎癥指標的影響2.1ATO對炎癥指標的影響2mol/L的ATO處理HSCs4h，免疫印跡分析檢測炎癥指標（IL-1，TNF）的表達情況。結果表明，與對照組相比，ATO處理組炎癥因子IL-1（0.450.01）和TNF-（0.350.02）蛋白的表達均上調（P<0.05）（圖3）。圖3ATO對炎癥指標IL-1和TNF-的影響注：同一時間與Ctl組比較，P<0.052.2GSPE對ATO誘導的炎癥指標的影響2mol/L的ATO和不同濃度（25、50mg/L）的GSPE干預HSCs24h后，免疫印跡分析檢測炎癥指標的表達水平。結果發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，ATO組會上調炎癥因子（IL-1，TNF-）的表達水平（P<0.05）；施加不同濃度的GSPE

GSPE干預后對ATO誘導的炎癥因子的影響

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3448871