目的:探討HBVX基因及其產(chǎn)物對肝細胞凋亡相關(guān)基因表達的影響.方法:將實驗用SPF級成年雄性KM小鼠分為實驗組、空質(zhì)粒對照組、生理鹽水對照組,實驗組以構(gòu)建好的PCDNA3.1-HBVX質(zhì)粒,空質(zhì)粒對照組以PCDNA3.1質(zhì)粒,生理鹽水對照組以生理鹽水,通過尾靜脈高壓注入動物體內(nèi),在第48h處死取動物肝組織,以RT-PCR,凝膠回收測序及Westernblot檢測HBVX表達,以RT-PCR半定量檢測動物肝組織內(nèi)Bax,bcl-2及c-myc的表達情況。結(jié)果:實驗組小鼠RT-PCR顯示465bp處有清楚條帶,肝組織內(nèi)有HBVX mRNA的存在,對照組無HBVX mRNA存在,Westernblot檢測有HBVX蛋白的表達;對照組小鼠則無HBVX蛋白表達。通過對小鼠肝組織凋亡相關(guān)因子的半定量RT-PCR,相對于空質(zhì)粒對照組和生理鹽水對照組,轉(zhuǎn)染HBVX基因的小鼠肝組織Bax（1.3127±0.0900vs1.0023±0.1670 P<0.05, 1.3127±0.0900vs0.9094±0.1081 P<0.05）、c-myc（1.6294±0.0672vs1.2869±0... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

基因RTPCR結(jié)果

圖 2 X 基因膠回收測序結(jié)果(從第 222 堿基到第 686 堿基為 X 基因序列在 NCBI 網(wǎng)上進行同源序列分析，結(jié)果如下：>gb|GQ924634.1| Hepatitis B virus isolate M57, complete genomeLength=3215Score = 843 bits (456), Expect = 0.0Identities = 462/465 (99%), Gaps = 0/465 (0%)Strand=Plus/PlusQuery 1 ATGGCTGCTAGGCTGTGCTGCCAACTGGATCCTGCGCGGGACGTCCTTTGTTTACGTCCC 60||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||Sbjct 1374 ATGGCTGCTAGGCTGTGCTGCCAACTGGATCCTGCGCGGGACGTCCTTTGTTTACGTCCC 1433

1.Bax 基因 mRNA 相對表達量的變化：轉(zhuǎn)染表達量較轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒對照組（1.3127±0.照組（1.3127±0.0900vs0.9094±0.1081 P5） 說明 HBVX 能上調(diào) Bax 的表達。2.c-myc 基因 mRNA 相對表達量的變化：轉(zhuǎn)表達量較轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒對照組（1.6294±0.照組（1.6294±0.0672vs0.9757±0.0397 P6） 說明 HBVX 能上調(diào) c-myc 的表達。3.Bcl-2 基因 mRNA 相對表達量的變化：轉(zhuǎn)對表達量較轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒對照組（1.5567±0.組（1.5567±0.1257vs0.5488±0.1278 P<0.0說明 HBVX 能上調(diào) Bcl-2 的表達。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3439166