目的:觀察氧化苦參堿（oxymatrine,OM）在脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）誘導(dǎo)的胰腺星狀細(xì)胞（LTC-14細(xì)胞株）中對Toll樣受體4（toll-like receptor 4,TLR4）通路中相關(guān)細(xì)胞因子的影響。其中包括:TLR4、髓樣細(xì)胞分化因子88（myeloid differentiation factor 88,MyD88）、核轉(zhuǎn)錄因子-kappa B（nuclear factor kappa B,NF-κB）、腫瘤壞死因子-α（Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α）在基因和蛋白水平的表達(dá)變化。探討OM治療慢性胰腺炎（chronic pancreatitis,CP）纖維化的可能分子機制。方法:將LTC-14細(xì)胞株分為4個組,Control組,LPS組,OM+LPS組,OM組。Control組:加無血清無雙抗的培養(yǎng)基培養(yǎng)3h。LPS組:加入含濃度為10μg/ml LPS的無血清無雙抗的培養(yǎng)基孵育3h;OM+LPS組:先加入500μg/ml的OM在無血清無雙抗的培養(yǎng)基中孵育30min,然后加入濃度為10μg/ml LPS繼續(xù)刺... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

免疫熒光觀察OM在LPS誘導(dǎo)LTC-14細(xì)胞中TLR4表達(dá)的影響

A 發(fā)紅色熒光為 TLR4，顯示的是目標(biāo)條帶；發(fā)藍(lán)色熒光為 DAPI，顯示的是 LTC-14 細(xì)胞核。2.2 免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢測 OM 在 LPS 刺激 TLC-14 細(xì)胞中對 NF-κB 細(xì)胞核內(nèi)易位的影響細(xì)胞免疫化學(xué)技術(shù)結(jié)果顯示：Control 組(圖 2 A)：NF-κB 在 LTC-14 細(xì)胞內(nèi)均質(zhì)表達(dá)； LPS 組(圖 2 B)：NF-κB 表達(dá)細(xì)胞核內(nèi)明顯，包漿內(nèi)表達(dá)量明顯減少；OM+LPS 組(圖 2 C)：細(xì)胞漿中 NF-κB 均質(zhì)表達(dá)，較 Control 組無明顯區(qū)別；OM組(圖 2 D)：NF-κB 在細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)量很少，僅在包漿中大量表達(dá)。

2.3 Western blot 研究 OM 對 LPS 誘導(dǎo) LTC-14 細(xì)胞中 TLR4、MyD88、NF-κB達(dá)情況的影響。2.3.1 Western blot 方法觀察 OM 對 LPS 誘導(dǎo) LTC-14 細(xì)胞中 TLR4 蛋白表達(dá)：通過 Western blot 方法可以觀察到：TLR4 在 LTC-14 細(xì)胞中表達(dá)，LPS 組Control 組表達(dá)量明顯升高（p<0.01），OM+LPS 組和 LPS 組相比較，能顯著降TLR4 的表達(dá)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01）。OM 和 Control 組比較，無統(tǒng)計差異。

【參考文獻(xiàn)】：
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