背景:具核梭桿菌（Fn）是一種常見的腸道細(xì)菌,其可能作為條件致病菌參與了炎癥性腸病（IBD）的發(fā)生。目前尚缺乏IBD患者腸道Fn的定量數(shù)據(jù)。目的:建立絕對定量real-time PCR方法,檢測克羅恩�。–D）患者的糞便Fn,分析其與CD炎癥指標(biāo)的相關(guān)性。方法:收集蘇州市立醫(yī)院57例CD患者和41例健康體檢者的糞便樣本,提取基因組DNA。構(gòu)建Fn菌株ATCC 25586特異的nus G（transcription antitermination protein）基因至p UC57質(zhì)粒,作為標(biāo)準(zhǔn)品,以SYBR Green real-time PCR法檢測梯度稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)粒,建立絕對定量標(biāo)準(zhǔn)曲線。評價該檢測方法的敏感性、特異性和穩(wěn)定性,并以之檢測CD患者和健康對照者的糞便Fn豐度,分析Fn豐度與糞便鈣衛(wèi)蛋白（FC）、C反應(yīng)蛋白（CRP）和紅細(xì)胞沉降率（ESR）的相關(guān)性。結(jié)果:本研究建立的糞便Fn絕對定量real-time PCR方法敏感性高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好。CD患者糞便Fn檢出率和豐度均顯著高于健康對照者（P=0. 034; P=0. 039）,且Fn豐度與FC水平呈顯著正相關(guān)（r=... 

【文章來源】：胃腸病學(xué). 2020,25(06)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

CD患者糞便樣本Fn豐度及其與CD炎癥指標(biāo)的相關(guān)性

Fn nus G基因特異的絕對定量real-time PCR檢測顯示，48例CD患者糞便樣本中檢出Fn，檢出率明顯高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義[84.2%(48/57)對65.9%(27/41)，χ2=4.474,P=0.034]。CD患者糞便樣本中的Fn豐度亦明顯高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義[兩組Fn豐度數(shù)據(jù)經(jīng)Y=log10(X copies/g)轉(zhuǎn)化，分別為2.945±0.333和1.846±0.394,P=0.039;圖3A]。圖2 Fn絕對定量real-time PCR熔解曲線(A)和標(biāo)準(zhǔn)曲線(B、C)

Fn絕對定量real-time PCR熔解曲線(A)和標(biāo)準(zhǔn)曲線(B、C)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]糞便生物標(biāo)志物在炎癥性腸病中的應(yīng)用[J]. 葉院寧,汪芳裕.  胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志. 2015(12)



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