目的:探索HBsAg陽性孕婦細(xì)胞是否可進(jìn)入胎兒血循環(huán),HBV通過細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)使胎兒發(fā)生宮內(nèi)感染的機(jī)制。方法:選取2006年7月至2008年3月在南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院產(chǎn)科足月分娩HBsAg陽性孕婦及其新生兒各160例為研究對(duì)象。利用谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶M1基因（glutathione S-transferase M1,GSTM1）、人血管緊張素轉(zhuǎn)換酶基因（angiotensin-converting enzyme genes,ACE）基因多態(tài)性,用等位基因特異性PCR（AS-PCR）和半巢式PCR（hemi-nPCR）方法檢測(cè)母-胎細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)。用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（fluorescence quantitative PCR, FQ-PCR）方法對(duì)母兒HBV DNA和PBMC HBV DNA進(jìn)行定量分析。結(jié)果:1、以GSTM1及ACE基因作為母親的特異性等位基因,收集到56對(duì)信息病例對(duì)中,其中31例新生兒發(fā)生了母兒轉(zhuǎn)運(yùn),占55.35%（31/56）。2、當(dāng)以新生兒外周血PBMC HBV DNA陽性來判斷新生兒HBV宮內(nèi)感染時(shí),母—胎細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)組較未轉(zhuǎn)運(yùn)組新生兒宮內(nèi)感染率要高（χ213.532,P... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：37 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

GSTM1基因多態(tài)性瓊脂糖凝膠電泳圖譜

圖 2.1 GSTM1 基因多態(tài)性瓊脂糖凝膠電泳圖譜：多態(tài)位點(diǎn) ACE 基因內(nèi)含子插入片段約 287bp，經(jīng) PCR 擴(kuò)增后ker 對(duì)照，如無 287bp 插入片段，可擴(kuò)增出 190bp 的缺失型片如有 287bp 的插入片段，可擴(kuò)增出 490bp 的插入型片段（II 基子則擴(kuò)增出 190bp 和 490bp 二條片段（ID 基因型）（圖 2.1）型 ACE（ID）雜合子，胎兒 ACE（II 或 DD）純合子的母嬰病例

像紫外燈下觀察并保存圖片。用引物GSTM1-P1、GSTM1-P2 和GSTM1-P3 對(duì)信息病例對(duì)中的新生兒進(jìn)行hemi-nPCR 反應(yīng),擴(kuò)增母親的GSTM1 基因,片段長度為252bp 。(圖2.3)圖2.3 半巢式PCR檢測(cè)母親特異性GSTM1 基因圖譜M: pUC19DNAPMspl Marker ,PC:陽性對(duì)照(252bp)NC:陰性對(duì)照F1、F2 表示新生兒外周血有母親 DNA ,F3、F4 表示新生兒外周血中無母親 DNA2）① 用引物 ACE-P3、ACE-I1 和 ACE-P1 對(duì)信息病例對(duì)中缺失純合子(DD) 的新生兒進(jìn)行 hemi-nPCR ,擴(kuò)增母親的特異性插入基因( I 基因) ,其中引物ACE-P3 和 ACE- II 擴(kuò)增片段長度為 425bp ,引物 ACE-P1 和 ACE-I1 擴(kuò)增片段長度為 356bp.② 用引物 ACE-P1、ACE-P4 和 ACE-P2 對(duì)信息病例對(duì)中插入純合子( II) 的新生兒進(jìn)行 hemi2nPCR ,擴(kuò)增母親的特異性缺失基因(D 基因) ,其中引物 ACE-P1和 ACE-P4 擴(kuò)增片段長度為 226bp

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]乙型肝炎病毒宮內(nèi)感染的研究現(xiàn)狀及今后工作重點(diǎn)[J]. 王素萍,徐德忠.  中華流行病學(xué)雜志. 2005(04)
[2]乙型肝炎病毒宮內(nèi)傳播因素和機(jī)制的分子流行病學(xué)研究[J]. 徐德忠,閆永平,徐劍秋,王文亮,門可,張景霞,劉斌,劉志華,王福生,蔣美玲,陳向紅.  中華醫(yī)學(xué)雜志. 1999(01)



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