肝纖維化被認(rèn)為是各種慢性肝病導(dǎo)致的肝細(xì)胞彌漫性損傷的一種病理過程,其特征是細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix,ECM）的積累。肝星狀細(xì)胞（HSC）的活化是被認(rèn)為是肝纖維化的重要一步,并導(dǎo)致肝纖維化獲得多種功能,包括收縮,趨化性,和矩陣重塑。HSC活化是肝纖維化發(fā)生發(fā)展進程中最重要的環(huán)節(jié)。通常,抑制細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和衰老是阻斷HSC活化的潛在治療方法。研究發(fā)現(xiàn)microRNA（miRNA）在多種纖維化疾病過程中的具有調(diào)控作用。MiRNA能調(diào)控多種肝纖維化的相關(guān)因子的表達(dá),反過來,肝纖維化又能導(dǎo)致多種miRNA表達(dá)發(fā)生改變。之前,本課題組已證實miR-145與肝纖維化發(fā)生與發(fā)展密切相關(guān),但是miR-145在肝星狀細(xì)胞衰老過程中的作用鮮有報道,這需要進一步的研究。本實驗探討了miR-145在肝纖維化發(fā)生過程中表達(dá)情況,并進一步研究miR-145對活化HSC衰老影響以及其中的分子機制。研究內(nèi)容如下:（1）miR-145,ZEB2和p53在肝纖維化過程中的表達(dá)檢測在體內(nèi),采用腹腔注射四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl₄）6周建... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

HE，Masson和SiriusRed染色觀察肝臟病理組織學(xué)變化

小鼠肝纖維化組織中 Col. I 和α-SMA 的蛋白表達(dá)變化采用 Western blot 技術(shù)檢測正常對照組和模型組中 Col. I 和α-SMA 的蛋白表化，結(jié)果顯示（如圖 3）：與正常對照組相比，模型組小鼠肝臟組織中 Col. ISMA 的蛋白表達(dá)水平均明顯升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）。綜合上果，提示小鼠肝纖維化模型構(gòu)建成功。圖 2. 血清中 ALT,AST, TBIL 和 ALB 的變化Fig.2. Serum level ofALT,AST,ALB, and TBIL were measured (n = 6).

小鼠肝纖維化組織及原代 HSCs 中 miR-145 的表達(dá)變化采用一步法實時定量 PCR 技術(shù)檢測正常對照組和模型組中肝臟組織及原代s 中 miR-145 的表達(dá)情況。結(jié)果顯示（如圖 4）：與正常對照組相比，模型組肝組織中 miR-145 表達(dá)降低，具有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）。并且原代 HSC miR-145 表達(dá)水平同樣明顯下調(diào)（p<0.05），這提示 miR-145 在 CCl4誘導(dǎo)的肝纖維化中，其表達(dá)水平顯著降低。圖 3. Western blot 檢測小鼠肝組織中 Col. I 和 α-SMA 表達(dá).3. Western blot analysis of α‐SMA and Col. I with β‐actin as the loading control. The assays performed at least three times with similar results.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Hepatocellular carcinoma: Epidemiology, risk factors and pathogenesis[J]. Asmaa Ibrahim Gomaa,Shahid A Khan,Mireille B Toledano,Imam Waked,Simon D Taylor- Robinson.  World Journal of Gastroenterology. 2008(27)



本文編號：3259026