目的乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）編碼的x蛋白（HBx）在HBV所致肝細胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的發(fā)生中發(fā)揮關(guān)鍵作用。目前關(guān)于HBx參與HCC病理發(fā)生的確切機理仍不清楚。白細胞介素6（IL-6）作為重要的炎癥因子,不僅能促進肝細胞的增殖,而且在肝癌病人血清呈現(xiàn)高水平。本課題旨在通過研究肝細胞中HBx對IL-6表達的影響,探索HBV在肝癌發(fā)生中的作用機制。方法①在肝細胞株和肝癌細胞株中高表達HBx-GFP,實時熒光定量PCR法和ELISA法分別測定細胞內(nèi)IL-6 mRNA和培養(yǎng)上清液內(nèi)IL-6蛋白水平。②構(gòu)建無活性MyD88（myeloid differentiation factor 88）-GFP表達質(zhì)粒和MyD88 siRNA,檢測MyD88在HBx誘導的IL-6表達中的作用。③利用特異性磷酸化抗體,Western Blot法檢測細胞中磷酸化IRAK-1（Interleukin-1 receptor-associated kinase 1）,磷酸化p38MAPK（mitogen-activated protein ... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

cDNA中GAPDH擴增曲線

人學碩}學位淪文結(jié)果表達HBx增強IL一6蛋白的表達和釋放一ELISA方法檢測。生長良好的L02和SMMC一7721細胞，轉(zhuǎn)染后，分別在12h、24h、36h和收集細胞的培養(yǎng)上清液，根據(jù)IL一6ELISA試劑盒的操作說明進行檢測。結(jié)圖14和圖15，在L02和SMMC一7721細胞中高表達HBx后，各個不同的點上清液中IL一6的表達都顯著增加。圖14LoZ細胞中高表達HBx增強IL一6的表達和釋放L02

【參考文獻】：
期刊論文
[1]HBx基因誘發(fā)肝細胞癌的實驗研究及其機制（英文）[J]. 侯周華,劉國珍,鄭芳,譚德明.  中南大學學報(醫(yī)學版). 2009(04)
[2]HBx基因轉(zhuǎn)染對Huh7細胞中基因轉(zhuǎn)錄的影響[J]. 章莉,鄭大利,黃健,韓澤廣.  腫瘤. 2008(04)
[3]Seek protein which can interact with hepatitis B virus X protein from human liver cDNA library by yeast two-hybrid system[J]. Xiao-Zhong Wang Xiang-Rong Jiang Xiao-Chun Chen Zhi-Xing Chen Dan Li Department of Gastroenterology,Union Hospital of Fujian Medical University,Fuzhou 350001,Fujian Province,China Jian-Yin Lin Laboratory of molecular biology,Fujian Medical University,Fuzhou 350004,Fujian Province,China Qi-Min Tao Liver Disease Insititute,Beijing University,Beijing 100044,China.  World Journal of Gastroenterology. 2002(01)



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