目的乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）編碼的x蛋白（HBx）在HBV所致肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的發(fā)生中發(fā)揮關(guān)鍵作用。目前關(guān)于HBx參與HCC病理發(fā)生的確切機(jī)理仍不清楚。白細(xì)胞介素6（IL-6）作為重要的炎癥因子,不僅能促進(jìn)肝細(xì)胞的增殖,而且在肝癌病人血清呈現(xiàn)高水平。本課題旨在通過研究肝細(xì)胞中HBx對(duì)IL-6表達(dá)的影響,探索HBV在肝癌發(fā)生中的作用機(jī)制。方法①在肝細(xì)胞株和肝癌細(xì)胞株中高表達(dá)HBx-GFP,實(shí)時(shí)熒光定量PCR法和ELISA法分別測(cè)定細(xì)胞內(nèi)IL-6 mRNA和培養(yǎng)上清液內(nèi)IL-6蛋白水平。②構(gòu)建無(wú)活性MyD88（myeloid differentiation factor 88）-GFP表達(dá)質(zhì)粒和MyD88 siRNA,檢測(cè)MyD88在HBx誘導(dǎo)的IL-6表達(dá)中的作用。③利用特異性磷酸化抗體,Western Blot法檢測(cè)細(xì)胞中磷酸化IRAK-1（Interleukin-1 receptor-associated kinase 1）,磷酸化p38MAPK（mitogen-activated protein ... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

cDNA中GAPDH擴(kuò)增曲線

人學(xué)碩}學(xué)位淪文結(jié)果表達(dá)HBx增強(qiáng)IL一6蛋白的表達(dá)和釋放一ELISA方法檢測(cè)。生長(zhǎng)良好的L02和SMMC一7721細(xì)胞，轉(zhuǎn)染后，分別在12h、24h、36h和收集細(xì)胞的培養(yǎng)上清液，根據(jù)IL一6ELISA試劑盒的操作說明進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)圖14和圖15，在L02和SMMC一7721細(xì)胞中高表達(dá)HBx后，各個(gè)不同的點(diǎn)上清液中IL一6的表達(dá)都顯著增加。圖14LoZ細(xì)胞中高表達(dá)HBx增強(qiáng)IL一6的表達(dá)和釋放L02

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]HBx基因誘發(fā)肝細(xì)胞癌的實(shí)驗(yàn)研究及其機(jī)制（英文）[J]. 侯周華,劉國(guó)珍,鄭芳,譚德明.  中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2009(04)
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本文編號(hào)：3253564