脂肪肝這一疾病的發(fā)生與代謝綜合征有著非常緊密的聯(lián)系,例如Ⅱ型糖尿病和肥胖病等疾病。相關(guān)研究表明在人的KLF11基因上發(fā)生錯義突變后將會導致糖尿病的發(fā)生,這主要是由于KLF基因發(fā)生錯義突變后使得胰腺中胰島素的生物合成發(fā)生了障礙,不能有效的合成胰島素。然而,直到目前為止小鼠KLF11基因在外周組織中的作用還不是很清楚。我們的研究證實轉(zhuǎn)錄因子KLF11在db/db Ⅱ型糖尿病小鼠和高脂飲食誘導的肥胖鼠（D1O）的肝組織中mRNA表達水平與對照組相比都有較顯著的降低。并在以上兩種模型小鼠肝組織中通過腺病毒介導的過表達KLF11基因后能夠有效的激活PPARa的信號通路,從而明顯的改善脂肪肝癥狀。同時在db/db II型糖尿病小鼠中過表達KLF11基因也能夠抑制脂合成基因的表達,如SREBP-1c、FAS和ACC。除此之外,KLF11基因在db/dbⅡ型糖尿病小鼠肝中也可以顯著抑制糖異生基因的表達,如PGC-1α、PEPCK和G6pase,從而降低db/db Ⅱ型糖尿病小鼠的血糖水平和改善葡萄糖的耐受性以及增加胰島素的敏感性。反之,在db/m和野生型C57BL/6J小鼠肝組織中通過腺病毒介導的sh... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
材料與方法
    1.實驗材料
        1.1. 實驗動物
        1.2. 菌株和細胞系
        1.3. 質(zhì)粒載體
        1.4. 工具酶及分子量標準
        1.5. 試劑盒
        1.6. 主要化學試劑(按試劑公司分類)
        1.7. 主要儀器及設備
        1.8. 分析軟件
        1.9. 引物序列
    2. 實驗方法
        2.1. 質(zhì)粒載體的構(gòu)建
        2.2 細胞培養(yǎng)
        2.3. 細胞瞬時轉(zhuǎn)染
        2.4. 雙熒光素酶報告實驗測定啟動子活性
        2.5. 總RNA提取及cDNA合成
        2.6. Real-Time PCR實驗
        2.7. Western blot
        2.8. 重組腺病毒的構(gòu)建與包裝
        2.9. 兩次氯化銫密度梯度離心純化重組腺病毒
        2.10. 腺病毒純化后滴度的測定
        2.11. 小鼠肝原代細胞的分離以及培養(yǎng)
        2.12. 肝原代細胞葡萄糖output試驗
        2.13. 小鼠尾靜脈注射腺病毒以及葡萄糖耐受試驗測定(GTT)
        2.14. 胰島素耐受試驗測定(ITT)
        2.15. 小鼠血清總酮體測定
        2.16. 小鼠生化、生理指標的測定
        2.17. 統(tǒng)計分析
結(jié)果
    一.小鼠肝臟中KLF11基因的表達水平受營養(yǎng)狀態(tài)的調(diào)控,并且在db/db Ⅱ型糖尿病鼠和高脂飲食誘導的肥胖小鼠中KLF11基因的表達水平下降
    二.KLF11基因抑制小鼠SREBP-1c基因的啟動子活性
    三.在DIO和db/dbⅡ型糖尿病小鼠肝臟組織中過表達KLF11基因改善了脂肪肝癥狀和提高了機體的葡萄糖耐受性
    四.在db/m小鼠和野生型C57BL/6J小鼠肝組織中特異性敲低KLF11基因后破壞了肝臟脂代謝平衡
    五.在小鼠肝原代細胞中KLF11基因可以調(diào)節(jié)糖脂代謝相關(guān)基因的表達
    六.PPARα介導了小鼠KLF11基因?qū)毎胶蛣游锔谓M織內(nèi)甘油三酯含量的影響
討論
小結(jié)
參考文獻
附錄
綜述
    References
致謝
作者簡介
攻讀博士期間發(fā)表的學術(shù)論文



本文編號：3245057