發(fā)布時間：2021-04-18 14:41

　　PEAK1是定位于細胞骨架actin等部位的非受體酪氨酸蛋白激酶,但是其對錨定在actin上的緊密連接以及緊密連接影響的潰瘍性結(jié)腸炎的調(diào)控機制仍不清楚。我們在PEAK1基因敲除小鼠中沒有觀察到自發(fā)性腸炎表型,但是在硫酸葡聚糖鈉誘導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎模型中,經(jīng)過體重、生存率、組織病理、炎癥因子等方面評估,首次證實了缺失PEAK1基因會加劇腸炎。根據(jù)結(jié)腸組織轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果的提示,我們采用免疫印跡實驗、免疫熒光實驗、免疫共沉淀等方法,在小鼠原代腸上皮細胞和腸上皮細胞系NCM460中探究了缺失PEAK1加劇腸炎的潛在分子機制。實驗結(jié)果表明,敲除PEAK1的腸炎小鼠結(jié)腸組織中促炎因子IL-6顯著上升,敲除PEAK1后腸上皮細胞中REG3β升高,敲低PEAK1后STAT3 Y705磷酸化明顯增加,因此我們提出解釋表型的第一個假說:PEAK1的缺失解除了REG3β對STAT3信號通路的抑制效應(yīng),釋放大量IL-6等炎癥促進因子,從而加重腸炎。在重點開展的緊密連接相關(guān)實驗中,敲除PEAK1顯著減少了AJs蛋白ZO-1和occludin的表達而對粘附連接標志物E-cadherin影響很小。我們對NCM460細... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

PEAK1基因敲除小鼠未觀察到明顯自發(fā)性腸炎表型Figure3.1SpontaneouscolitisisnotobservedinPEAK1deficiencymice.(A)IllsutrationofPEAK1knockoutworkmodelbyCRISPR/Cas9.(B)IdentificationofPEAK1knockout

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文46圖3.2PEAK1敲除小鼠對葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)的急性結(jié)腸炎更加敏感Figure3.2PEAK1deficiencymicearemoresusceptibletoDSS-inducedacutecolitis.(A)ChangeinweightofWTandPEAK1-/-miceovertimewereexpressedasthepercentageoftheinitialbodyweight(means±s.d.,n=6-12,Student’sttest,*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001).(B)Kaplan–MeiersurvivalcurveofDSStreatmentinPEAK1-/-miceandWTlittermates(n=6,log-ranktest,p=0.097).(C,D)ThecolonlengthofWTandPEAK1-/-mice

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文49圖3.3利用轉(zhuǎn)錄組測序分析結(jié)腸組織缺失PEAK1的差異基因表達譜Figure3.3Differentialgene-expressionprofilesofPEAK1/micecolondetectedbyRNAseqanalysis.(A)HeatmappresentationoffractionaldifferentialgenesforWTand

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Tight junctions in inflammatory bowel diseases and inflammatory bowel disease associated colorectal cancer[J]. Jonathan Landy,Emma Ronde,Nick English,Sue K Clark,Ailsa L Hart,Stella C Knight,Paul J Ciclitira,Hafid Omar Al-Hassi.  World Journal of Gastroenterology. 2016(11)
[2]Moxibustion combined with acupuncture increases tight junction protein expression in Crohn’s disease patients[J]. Hai-Xia Shang,An-Qi Wang,Chun-Hui Bao,Huan-Gan Wu,Wei-Feng Chen,Lu-Yi Wu,Rong Ji,Ji-Meng Zhao,Yin Shi.  World Journal of Gastroenterology. 2015(16)



本文編號：3145651