布拉氏酵母菌對炎癥性腸病小鼠的腸黏膜免疫調(diào)節(jié)作用的研究
本文關(guān)鍵詞:布拉氏酵母菌對炎癥性腸病小鼠的腸黏膜免疫調(diào)節(jié)作用的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:背景:炎癥性腸病(inflammatory bowel disease,IBD)是一組慢性非特異性腸道炎癥性疾病,它包含兩個疾病,克羅恩病(Crohn,s disease,CD)和潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative colitis,UC),其病因未明,且診斷和治療頗為困難。用于治療該病的傳統(tǒng)藥物具有花費昂貴,用藥周期長,副反應(yīng)較大,停藥后易復(fù)發(fā)等缺點,甚至一部分經(jīng)傳統(tǒng)藥物治療效果不佳的IBD患者需轉(zhuǎn)向外科行手術(shù)治療。近年來隨著人們對IBD發(fā)病機制及微生態(tài)制劑的深入研究,益生菌制劑逐漸運用于IBD患者的輔助治療中,并取得一定療效。目的:通過布拉氏酵母菌(Saccharomyces boulardii)作用于炎癥性腸病小鼠,探討布拉氏酵母菌對小鼠腸黏膜免疫調(diào)節(jié)的作用。方法:采用2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-Trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)誘導(dǎo)小鼠IBD模型,50只清潔級BALB/c小鼠,體重在18~22g左右,平均6~8周齡,雌雄各半,隨機分為5組,每組10只:正常對照組(A組),模型組(B組),美沙拉嗪治療組(C組),布拉氏酵母菌治療組(D組),布拉氏酵母菌聯(lián)合美沙拉嗪治療組(E組)。各組小鼠均禁食,但不禁水24小時,B、C、D、E四組小鼠予以注入100mg/kg 5%TNBS(m/v)和無水乙醇等體積混合液,脈沖式注入后拔出灌腸管,迅速夾閉小鼠肛門,提起尾巴,使頭朝下倒置約1分鐘,目的促使造模藥液與結(jié)腸黏膜充分接觸,減少倒流量。A組予以灌入等量的生理鹽水。造模結(jié)束后正常飼養(yǎng),A、B兩組予以生理鹽水灌胃,其余各組按相對應(yīng)藥物灌胃治療。每日觀察小鼠一般狀況、體重變化、大便性狀及血便程度。7天后處死老鼠,收集結(jié)腸組織,一部分進行結(jié)腸組織石蠟切片,HE染色,觀察鏡下病理變化。另一部分進行腸組織勻漿,采用酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)測定腸道組織內(nèi)白細(xì)胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)及γ-干擾素(Interferon-γ,IFN-γ)的表達。結(jié)果:一、造模結(jié)束后動物死亡9只,立即重新造模補充數(shù)據(jù),在治療過程中出現(xiàn)死亡動物,不予補充,不納入數(shù)據(jù)。二、造模結(jié)束后A組小鼠活動正常,其余各組小鼠反應(yīng)遲鈍,皮毛松散,進食減少,體重下降。隨著治療的進行,C、D、E組小鼠癥狀改善,B組DAI分?jǐn)?shù)為3.33±0.528、組織損傷大體評分為4.11±0.78、組織學(xué)評分為9.44±1.62、腸組織IFN-γ含量為371.83±14.37pg/ml,均高于其他四組,腸組織IL-10含量為62.41±7.96pg/ml,低于其余各組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。三、C、D兩組各檢測指標(biāo)數(shù)值相差不大,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。四、E組小鼠DAI分?jǐn)?shù)為0.70±0.399、組織損傷大體評分為1.10±0.57、組織學(xué)評分為2.50±1.08、腸組織IFN-γ含量為194.23±16.45pg/ml,均低于B、C、D組,腸組織IL-10含量為100.84±4.305pg/ml,高于B、C、D組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:1、TNBS誘導(dǎo)小鼠炎癥性腸病模型基本成功,造模用時短,簡單易操作。2、布拉氏酵母菌與美沙拉嗪在炎癥性腸病的治療中均有療效,兩組之間相比較無明顯差異,治療效果相當(dāng)。3、美沙拉嗪聯(lián)合布拉氏酵母菌治療效果更佳,優(yōu)于二者單獨用藥。4、布拉氏酵母菌可能是通過調(diào)節(jié)腸道免疫功能,控制炎癥的進一步發(fā)展,進而改善癥狀。
【關(guān)鍵詞】:布拉氏酵母菌 美沙拉嗪 炎癥性腸病 白細(xì)胞介素-10 干擾素-γ
【學(xué)位授予單位】:皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R574.62
【目錄】:
- 摘要7-9
- Abstract9-12
- 前言12-16
- 研究材料和方法16-26
- 1 實驗材料16-17
- 1.1 實驗動物16
- 1.2 實驗器材16-17
- 1.3 試劑17
- 2 造模方法17-18
- 2.1 動物模型的制備及分組17-18
- 2.2 各組治療藥物劑量及配制18
- 3 觀測的指標(biāo)和方法18-24
- 3.1 一般情況及疾病活動指數(shù)DAI18-19
- 3.2 結(jié)腸大體形態(tài)評分19-20
- 3.3 組織學(xué)評分20-21
- 3.4 各組小鼠腸組織IFN-γ及IL-10的表達21-24
- 4 統(tǒng)計方法24-25
- 附技術(shù)路線圖25-26
- 結(jié)果26-33
- 1 各組小鼠的一般狀況26-27
- 2 各組小鼠的DAI評分結(jié)果27-28
- 3 大體形態(tài)損傷評分28-29
- 4 HE染色結(jié)果29-31
- 5 腸組織IFN-γ和IL-10的水平31-33
- 討論33-43
- 1 IBD動物模型及評估33-36
- 2 微生態(tài)失衡與IBD的關(guān)系36-37
- 3 細(xì)胞因子與IBD的關(guān)系37-40
- 4 布拉氏酵母菌對IBD的治療機制初步探討40-41
- 5 課題來源41-42
- 6 本研究的不足之處42-43
- 結(jié)論43-44
- 參考文獻44-49
- 綜述49-60
- 參考文獻55-60
- 作者簡介及讀研期間主要科研成果60-61
- 致謝61-62
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6 本版編輯邋夏洪平 首都醫(yī)科大學(xué)附屬友誼醫(yī)院消化內(nèi)科副主任 李鵬;炎癥性腸病的新療法[N];健康報;2008年
7 中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院消化內(nèi)科教授 胡品津;我國炎癥性腸病學(xué)組已制定了協(xié)作研究計劃[N];健康報;2010年
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本文關(guān)鍵詞:布拉氏酵母菌對炎癥性腸病小鼠的腸黏膜免疫調(diào)節(jié)作用的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
,本文編號:311150
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