MUC2在IBD動(dòng)物模型的作用機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2017-04-15 07:04
本文關(guān)鍵詞:MUC2在IBD動(dòng)物模型的作用機(jī)制研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:研究背景炎癥性腸病(IBD),發(fā)病率逐年上升,已是全球重要消化系統(tǒng)疾病問(wèn)題,主要分為潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis,UC)與克羅恩病(Crohn’s disease,CD),確切病理機(jī)制不明,可能與腸道內(nèi)菌群與免疫介導(dǎo)的粘膜屏障組織損傷等多方面因素綜合作用有關(guān),任何單一因素破壞均可能誘發(fā)IBD,粘蛋白MUC2是組成腸道粘膜屏障的一部分,目前國(guó)內(nèi)對(duì)此研究的較少。目的通過(guò)觀察慢性IBD動(dòng)物模型中結(jié)腸組織學(xué)變化,檢測(cè)小鼠血清及解除組織中CBir1、muc2表達(dá)水平,給與模型組不同的干預(yù)措施,探討muc2在IBD中作用機(jī)制,以便探討IBD相關(guān)發(fā)病機(jī)理。方法雄性的BALb/c小鼠SPF級(jí)60只,完全隨機(jī)分4組,15只/組。①對(duì)照組:不進(jìn)行干預(yù),自由飲用水跟食物。②TNBS/50%乙醇組:在第1天用TNBS/50%乙醇2.0mg/100μl灌腸,第8天用TNBS/50%乙醇2.5mg/100μl灌腸,第15天用TNBS/50%乙醇3.0mg/100μl灌腸。③酮替芬(ketotifen)+TNBS+50%乙醇組:TNBS/50%乙醇同②,應(yīng)用0.5mg酮替芬(溶于100μl生理鹽水,并每次灌腸前30min小鼠的腹腔內(nèi)注射100μl上述酮替芬溶液。④LPS+TNBS+OVA+50%乙醇組:LPS(10μg)與OVA(20μg)加入100μl0.9%氯化鈉溶液中,分別于4個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)(7,9,12,15)腹腔注射100μl,將OVA(50μg)加入100ul0.9%氯化鈉溶液中,并分別在灌腸前腹腔注射(18,19,20,21)。然后對(duì)各組每只小鼠分別進(jìn)行DAI評(píng)分,在第9天各組各處死1只行結(jié)腸組織PAS染色,在第22天處死所有小鼠,測(cè)定各組小鼠血清的muc2、抗-CBir1濃度,并運(yùn)用HE染色所取小鼠的組織,碘酸雪夫染色(Periodic Acid-Schiff stain,PAS)進(jìn)行染色后及免疫組化方法檢測(cè)小鼠IBD動(dòng)物模型觀察MUC2的表達(dá)。運(yùn)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,計(jì)量數(shù)據(jù)正態(tài)性檢驗(yàn)及方差齊性檢驗(yàn),符合正態(tài)分布者用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±S)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述,應(yīng)用t檢驗(yàn)或矯正的t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;不符合正態(tài)分布者用中位數(shù)及(25分位數(shù)-75分位數(shù))[M(P25-P75)]進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述,用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。定性資料的分析應(yīng)用卡方檢驗(yàn)。設(shè)定α=0.05,P0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果(1)正常對(duì)照組:結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞排列整齊,未見(jiàn)炎性細(xì)胞侵潤(rùn),②TNBS+50%酒精組、③TNBS+TTF組、④LPS+OVA+TNBS+50%組對(duì)比正常對(duì)照組,漿細(xì)胞增多,可見(jiàn)淋巴細(xì)胞,淋巴濾泡增多,而LPS+OVA+TNBS+50%乙醇組正常腺體結(jié)構(gòu)基本消失,炎癥程度最高,可見(jiàn)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),甚至可累及全層。(2)HI評(píng)分、DAI評(píng)分②TNBS+50%乙醇組、③TTF+TNBS+50%乙醇組、④LPS+OVA+TNBS+50%乙醇組高于正常對(duì)照組(P0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;②TNBS組、③酮替芬組、④LPS組的碘酸雪夫染色及IHCE方法測(cè)定MUC2表達(dá)低于正常對(duì)照組(P0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,碘酸雪夫染色及IHCE所測(cè)定MUC2表達(dá)②TNBS組低于③酮替芬組(P0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;③酮替芬組PAS染色及免疫組化測(cè)定的MUC2表達(dá)T低于④LPS組(P0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;結(jié)論(1)BALb/c小鼠TNBS+50%乙醇灌腸,成功復(fù)制IBD模型;(2)BALb/c小鼠IBD模型MUC2表達(dá)改變,說(shuō)明MUC2的表達(dá)改變可能與IBD的發(fā)生有關(guān)。(3)酮替芬可能抑制肥大細(xì)胞激活改善改善小鼠IBD模型腸道炎癥
【關(guān)鍵詞】:慢性結(jié)腸炎 黏蛋白2 肥大細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】:鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R-332;R574
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-10
- 縮略詞表10-11
- 前言11-14
- 材料與方法14-22
- 結(jié)果22-30
- 討論30-36
- 結(jié)論36-37
- 參考文獻(xiàn)37-40
- 綜述部分 MUC2 與IBD的研究進(jìn)展40-56
- 參考文獻(xiàn)51-56
- 致謝56
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條
1 于曉麗;韓春山;沈雋;沈李偉;;MUC2在潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機(jī)制中的意義研究[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生;2007年15期
2 吳景良;張理濤;;肥大細(xì)胞免疫生物學(xué)研究進(jìn)展[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)雜志;2008年01期
中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
1 郝卉杰;細(xì)菌鞭毛蛋白在IBD發(fā)病中的作用機(jī)制研究[D];鄭州大學(xué);2012年
本文關(guān)鍵詞:MUC2在IBD動(dòng)物模型的作用機(jī)制研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
,本文編號(hào):307855
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