目的:丙酮酸激酶（pyruvate kinase,PK）是糖酵解中最后一步關鍵酶,其亞型丙酮酸激酶M2型（pyruvate kinase M2,PKM2）對腫瘤細胞的增殖有重要的調節(jié)作用。近期研究發(fā)現(xiàn)PKM2在炎癥反應的病理生理過程中也產(chǎn)生了重要作用。本研究探討PKM2在脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）/右旋半乳糖胺（D-galactosamine,D-Gal）誘導的小鼠急性肝損傷模型中的潛在作用及可能機制。方法:雄性BALB/c小鼠腹腔注入LPS（10μg/kg）/D-Gal（700mg/kg）建立急性肝損傷模型。為了明確PKM2在LPS/D-Gal模型中的變化,我們在不同時間點處死小鼠（LPS/D-Gal注入后0h、2h、4h和6h）,采用免疫印跡分析測定肝組織中PKM2的表達,用比色法檢測肝組織中丙酮酸激酶活性的變化及丙酮酸含量。為了探究PKM2在LPS/D-Gal誘導的小鼠急性肝損傷模型中的作用,我們用PKM2激動劑ML265（其作用是抑制PKM2核轉位,故又稱PKM2核轉位抑制劑）做前處理（在LPS/D-Gal注射前30min腹腔注入）和后處理（在LP... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PKM2核蛋白在LPS/D-Gal模型中表達增強（n=4）

圖 1 PKM2 核蛋白在 LPS/D-Gal 模型中表達增強（n=4）Fig.1 The level of PKM2 nuclear protein increased in the LPS/D-Gal model.2 LPS/D-Gal 模型中丙酮酸激酶活性和丙酮酸含量均降低丙酮酸激酶活性結果如圖 2A 所示，LPS/D-Gal 誘導急性肝損傷模型中，激酶活性降低。如圖 2B 所示，丙酮酸的含量在 LPS/D-Gal 模型中減少。

白的磷酸化水平。在不同樣本比較中，獲取所有磷酸化位點蛋白的組間磷酸化水平調變比值。設置 Fold Change 閾值為 2，獲得組間調變差異的磷酸化位點蛋白。使用 KEGG PATHWAY 對差異基因進行分析。2.11 統(tǒng)計學分析與第一部分相同3.實驗結果3.1 PKM2 激活劑 ML265 下調 LPS/D-Gal 模型中 PKM2 表達Western 結果如圖 3 顯示：經(jīng) PKM2 激活劑 ML265 預處理后，細胞核內 PKM2的表達較 LPS/D-Gal 模型組降低，說明 PKM2 在胞核內聚集減少。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]腫瘤有氧糖酵解的研究進展[J]. 張鳳娟,張紅勝,劉洋.  生命的化學. 2015(03)
[2]Caspase Family Proteases and Apoptosis[J]. Ting-Jun FAN Li-Hui HAN Ri-Shan CONG Jin LIANG College of Marine Life Sciences,Division of Life Science and Technology,Ocean University of China,Qingdao 266003,China;College of Chemistry & Chemical Engineering,Ocean University of China,Qingdao 266003,China.  Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 2005(11)
[3]丙酮酸對大鼠小腸缺血再灌注損傷的保護作用[J]. 郝志強,王為忠,李孟彬,管文賢,羅蘭.  中國臨床康復. 2004(02)



本文編號：3045072