目的:丙酮酸激酶（pyruvate kinase,PK）是糖酵解中最后一步關(guān)鍵酶,其亞型丙酮酸激酶M2型（pyruvate kinase M2,PKM2）對(duì)腫瘤細(xì)胞的增殖有重要的調(diào)節(jié)作用。近期研究發(fā)現(xiàn)PKM2在炎癥反應(yīng)的病理生理過(guò)程中也產(chǎn)生了重要作用。本研究探討PKM2在脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）/右旋半乳糖胺（D-galactosamine,D-Gal）誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷模型中的潛在作用及可能機(jī)制。方法:雄性BALB/c小鼠腹腔注入LPS（10μg/kg）/D-Gal（700mg/kg）建立急性肝損傷模型。為了明確PKM2在LPS/D-Gal模型中的變化,我們?cè)诓煌瑫r(shí)間點(diǎn)處死小鼠（LPS/D-Gal注入后0h、2h、4h和6h）,采用免疫印跡分析測(cè)定肝組織中PKM2的表達(dá),用比色法檢測(cè)肝組織中丙酮酸激酶活性的變化及丙酮酸含量。為了探究PKM2在LPS/D-Gal誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷模型中的作用,我們用PKM2激動(dòng)劑ML265（其作用是抑制PKM2核轉(zhuǎn)位,故又稱PKM2核轉(zhuǎn)位抑制劑）做前處理（在LPS/D-Gal注射前30min腹腔注入）和后處理（在LP... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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PKM2核蛋白在LPS/D-Gal模型中表達(dá)增強(qiáng)（n=4）

圖 1 PKM2 核蛋白在 LPS/D-Gal 模型中表達(dá)增強(qiáng)（n=4）Fig.1 The level of PKM2 nuclear protein increased in the LPS/D-Gal model.2 LPS/D-Gal 模型中丙酮酸激酶活性和丙酮酸含量均降低丙酮酸激酶活性結(jié)果如圖 2A 所示，LPS/D-Gal 誘導(dǎo)急性肝損傷模型中，激酶活性降低。如圖 2B 所示，丙酮酸的含量在 LPS/D-Gal 模型中減少。

白的磷酸化水平。在不同樣本比較中，獲取所有磷酸化位點(diǎn)蛋白的組間磷酸化水平調(diào)變比值。設(shè)置 Fold Change 閾值為 2，獲得組間調(diào)變差異的磷酸化位點(diǎn)蛋白。使用 KEGG PATHWAY 對(duì)差異基因進(jìn)行分析。2.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析與第一部分相同3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1 PKM2 激活劑 ML265 下調(diào) LPS/D-Gal 模型中 PKM2 表達(dá)Western 結(jié)果如圖 3 顯示：經(jīng) PKM2 激活劑 ML265 預(yù)處理后，細(xì)胞核內(nèi) PKM2的表達(dá)較 LPS/D-Gal 模型組降低，說(shuō)明 PKM2 在胞核內(nèi)聚集減少。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3045072