目的 TTV是從一名輸血后肝炎病人血清中分離出的一種新型DNA病毒。TTV感染在各種人群中普遍存在，可存在于無任何癥狀健康者，也可以是一些病因不明肝病及非甲一非庚型暴發(fā)性肝炎患者的病原體和在其他肝炎病毒感染基礎(chǔ)上發(fā)生重疊感染。目前對(duì)TTV的致病性的研究存在爭(zhēng)論，有些學(xué)者認(rèn)為TTV不能致病，有些持相反意見。有學(xué)者認(rèn)為TTV的致病性與其基因型或基因變異有關(guān)。因此研究TTV在各人群中的感染情況，尤其是TTV感染在HBV慢性感染的基礎(chǔ)上重疊感染是否加重其病情，以初步探討TTV的致病性及TTV是否影響HBV的復(fù)制，并探討TTV的基因變異及其準(zhǔn)種復(fù)雜性與其致病性的關(guān)系有重要意義。方法 （1）在ORF1區(qū)設(shè)計(jì)特異性引物建立巢式多聚酶鏈反應(yīng)（PCR），檢測(cè)獻(xiàn)血員、非甲-非庚型肝炎患者及HBV感染患者血清中TTV DNA，對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序，并比較TTV DNA陽性患者與陰性患者之間的肝功能指標(biāo)（ALT、TBIL）的差異。（2）TTV DNA陽性患者采用不對(duì)稱PCR獲得單鏈DNA，然后對(duì)其進(jìn)行SSCP分析，并結(jié)合TTV DNA熔點(diǎn)曲線分析基因變異。（3）在ORF1區(qū)的高變區(qū)（HVR）設(shè)計(jì)特異性引物建... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

TTVDNA陽性者PCR產(chǎn)物電泳圖

(一)SSCP一PAGE電泳結(jié)果所有標(biāo)本均得到較清晰的SSCP條帶，條帶數(shù)為1一8條，少數(shù)標(biāo)本只有1~2條主帶(圖3一圖6)，由于采用不對(duì)稱PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，所得的不同條帶代表不同的基因變異株(準(zhǔn)種)，提示在同一份血清中存在TTV不同的基因變異株。從電泳結(jié)果看，獻(xiàn)血員與乙型肝炎病毒攜帶者組的SSCP條帶數(shù)較其它組少，在重型肝炎患者中SSCP條帶數(shù)相對(duì)較多。234567891011圖3獻(xiàn)血員與乙型肝炎病毒攜帶者SSCP電泳1一4獻(xiàn)血員;5一n乙型肝炎病毒攜帶者。圖4慢性乙型肝炎患者SSCP電泳1一3慢性乙型肝炎患者中度4~11慢性乙型肝炎患者重度圖5慢性重型乙型肝炎患者SSCP電泳圖6非甲一庚型肝炎患者SSCP電泳1一2中度;3一6重度;7~11重型

81皿T印p度的.欣C目匆5圖9.單個(gè)TW克隆DNA的熔點(diǎn)曲線圖(每條曲線代表不同的克隆).軍價(jià)圣疇時(shí)翎劃枷朋明。網(wǎng)翎卜P、︵n﹂優(yōu)︶P·匆公到腸馬臼銘創(chuàng)“島鄧龍洲冗花臼陀例島咫叨犯例島叨l切丁.理.成口e，Cd如5圖10.多個(gè)TTV克隆DNA混合物的熔點(diǎn)曲線圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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