目的:1、探討孕晚期使用乙肝免疫球蛋白對(duì)乙肝病毒S基因變異的影響;2、探討乙肝病毒(HBV)基因分型在HBV宮內(nèi)傳播方面的意義; 方法:收集2006年12月～2007年12在廣州暨南大學(xué)第一臨床附屬醫(yī)院行常規(guī)系統(tǒng)產(chǎn)檢時(shí)乙肝表面抗原(HBsAg)陽(yáng)性、HBV-DNA滴度檢測(cè)＞1.0×10~3copies/ml的孕婦及其所生新生兒,按孕婦是否采取孕28周起HBIG 200 IU/4周肌肉注射分為HBIG實(shí)驗(yàn)組與HBIG對(duì)照組進(jìn)行如下研究:①采集孕婦注射HBIG前(對(duì)照組為初次產(chǎn)檢時(shí))的外周靜脈血和分娩前的外周靜脈血以及其新生兒出生24小時(shí)內(nèi)的外周靜脈血,用ELISA法檢測(cè)孕婦及其新生兒血清乙肝病毒標(biāo)志物(HBV-M);用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Fluorescence Quantitativepolymerase chain reaction,FQ-PCR)法檢測(cè)孕婦及其新生兒血清HBV DNA;②采用巢式PCR擴(kuò)增HBV S區(qū)產(chǎn)物直接測(cè)序;③利用DNASTAR、ALIGN X序列分析軟件包分析乙型肝炎病毒序列,通過(guò)與GENBANK中標(biāo)準(zhǔn)序列進(jìn)行比對(duì),分析HBV基因型以及HBVS基因變異情況;④統(tǒng)計(jì)分析使用SPSS 13.0 for windows軟件包。 結(jié)果: 1.在收集的131組樣本中HBIG實(shí)驗(yàn)組有84組,HBIG對(duì)照組為47例。成功檢測(cè)到HBVS區(qū)序列的共106例,其中屬于HBIG實(shí)驗(yàn)組的有73例,HBIG對(duì)照組有33例。成功采集的新生兒血樣共60例,檢測(cè)其外周血HBV-DNA滴度＞1.0×10~3copies/ml的8例,成功檢測(cè)到HBV S區(qū)序列的有7例。 2.106例孕母HBVS區(qū)序列測(cè)序比對(duì)后,共有26例屬于HBV B基因型,80例為HBV C基因型。HBIG實(shí)驗(yàn)組中B型17例(23.29%),C型56例(76.71),HBIG對(duì)照組B型9例(27.27%)C型24例(72.73%)。7例HBV-DNA陽(yáng)性的新生兒皆為HBV C基因型。 3.與GENBANK標(biāo)準(zhǔn)株比對(duì),106例孕婦在注射HBIG前(對(duì)照組為初次產(chǎn)檢時(shí))感染的HBV S基因測(cè)序檢測(cè)變位點(diǎn)有aa54、75、101、106、113、126、133、134、143、146、158、177、182、200、210、211、250、257,發(fā)生在“a”抗原決定簇的有aa126、133、134、143、146,大多數(shù)位點(diǎn)的突變均導(dǎo)致了氨基酸替換。 4.比對(duì)孕母注射HBIG前(對(duì)照組為初次產(chǎn)檢時(shí))的外周靜脈血HBV S區(qū)序列和分娩前的外周靜脈血HBV S區(qū)序列后未發(fā)現(xiàn)核苷酸的變異。 5.無(wú)論HBIG實(shí)驗(yàn)組還是HBIG對(duì)照組,HBV B基因型感染者與C型感染者,其外周靜脈血HBV-DNA滴度在用藥前后的變化均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 6.7例HBV-DNA陽(yáng)性的新生兒,其HBV S區(qū)序列與母親HBV S區(qū)序列同源性為99.2%～100%。在HBIG對(duì)照組中,1例孕母及其新生兒檢測(cè)到HBV相似株混合感染。 7.HBIG實(shí)驗(yàn)組與HBIG對(duì)照組孕婦的新生兒HBsAb陽(yáng)性率并未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)論: 1、孕晚期注射HBIG并不會(huì)造成孕母注射后至分娩前時(shí)間內(nèi)的HBV S區(qū)核苷酸變異。 2、孕母攜帶的HBV基因型對(duì)HBV宮內(nèi)傳播率無(wú)顯著性影響;3、孕晚期使用HBIG對(duì)HBV-DNA滴度影響不顯著。3、新生兒與其母感染的HBV S區(qū)序列同源性高,即新生兒所感染的HBV來(lái)源于其母。
【學(xué)位單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2008
【中圖分類】：R512.62;R714.2
【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
目錄
前言
    一、HBV及其基因組的形態(tài)與結(jié)構(gòu)
    二、HBV的母嬰垂直傳播
    三、HBIG阻斷母嬰傳播方面研究
    四、HBV S基因變異及意義
材料與方法
    一、實(shí)驗(yàn)材料
    二、實(shí)驗(yàn)方法
結(jié)果
    一、HBV S基因區(qū)的測(cè)序與比較
    二、對(duì)于孕晚期注射HBIG對(duì)孕婦外周血HBV—DNA滴度的影響
    三、孕晚期注射HBIG對(duì)新生兒HBV-M的影響
討論
    一、HBV基因型分型在使用HBIG阻斷母嬰垂直傳播方面的意義
    二、HBV S基因區(qū)及“a”決定簇的變異與宮內(nèi)感染的關(guān)系
    三、HBV相似株的混合感染
    四、孕晚期注射HBIG對(duì)孕婦外周血HBV-DNA含量的影響
    五、注射HBIG對(duì)新生兒HBsAb的影響
參考文獻(xiàn)
附錄1:論文附表
附錄2:論文附圖
附錄3:（常用縮寫(xiě)詞中英文對(duì)照表及氨基酸對(duì)照表）
致謝

【參考文獻(xiàn)】

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