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微囊化豬肝細胞為基礎(chǔ)的流化床式生物反應(yīng)器的豬逆轉(zhuǎn)錄病毒傳播風(fēng)險研究

發(fā)布時間:2020-11-10 00:46
【摘要】: 背景:生物人工肝支持系統(tǒng)作為用來改善肝衰竭病人癥狀和幫助其過渡到肝移植的治療手段之一,因為主要的細胞源:原代豬肝細胞的應(yīng)用,不得不面對豬逆轉(zhuǎn)錄病毒的傳播風(fēng)險。在本實驗室,以微囊化豬肝細胞為基礎(chǔ)的流化床式生物反應(yīng)器已成功運用于肝衰竭實驗豬的治療,本實驗通過檢測此反應(yīng)器的核心構(gòu)件:微囊化豬肝細胞的逆轉(zhuǎn)錄病毒傳播風(fēng)險,來評估此反應(yīng)器的生物安全性。 方法:制備微囊化原代豬肝細胞并培養(yǎng),收集6小時,12小時,24小時,72小時的細胞培養(yǎng)上清,感染HEK-293細胞并傳代,每周收集1次感染細胞,運用RT-PCR檢測微囊化細胞培養(yǎng)上清及感染細胞的豬逆轉(zhuǎn)錄病毒特異基因,RT-qPCR檢測病毒的載量。PK-15細胞作為陽性對照,hepG2細胞作為陰性對照。 結(jié)果:在微囊化原代豬肝細胞的培養(yǎng)上清及感染細胞中均可檢測到豬逆轉(zhuǎn)錄病毒基因,并且在微囊化細胞培養(yǎng)上清中,病毒載量隨時間增長而增加。 結(jié)論:以微囊化豬肝細胞為基礎(chǔ)的流化床式生物反應(yīng)器有豬逆轉(zhuǎn)錄病毒病毒傳播風(fēng)險。
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2010
【分類號】:R318;R575.3
【文章目錄】:
致謝
中文摘要
Abstract
縮略詞
正文
    1.前言
    2.材料與方法
    3.結(jié)果
    4.結(jié)論
    5.討論
    6.圖例
    參考文獻
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本文編號:2877204

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