第一部分慢傳輸型便秘犬模型的建立及評(píng)價(jià)目的:本研究旨在建立慢傳輸型便秘(slow transit constipation,STC)犬模型,并檢測(cè)其胃腸傳輸、排便及結(jié)腸組織病理學(xué)改變情況。方法:觀察和記錄8只比格犬的基線信息,將犬隨機(jī)分為對(duì)照組和造模組,造模組給予肉制罐頭飲食聯(lián)合口服復(fù)方地芬諾酯、鹽酸阿洛司瓊共計(jì)5周,每周測(cè)定胃腸傳輸時(shí)間(gastrointestinaltransittime,GITT),每日記錄排便次數(shù)、大便性狀,比較2組間差別。5周后經(jīng)開腹手術(shù)取直乙交界處的全層結(jié)腸組織,通過光鏡下觀察、電鏡下觀察進(jìn)行組織學(xué)評(píng)價(jià),通過免疫組織化學(xué)分析來比較2組間神經(jīng)組織標(biāo)記物蛋白基因產(chǎn)物9.5(protein gene product 9.5,PGP9.5)、突觸素(synaptophysin)、Cajal 間質(zhì)細(xì)胞(interstitial cell of Cajal,ICC)標(biāo)記物 c-kit 的變化。結(jié)果:8只比格犬均順利完成所有實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,造模干預(yù)后,造模組GITT較對(duì)照組顯著延長(zhǎng)(P=0.00l),造模組大便干硬明顯,排便頻率、大便性狀得分較對(duì)照組均顯著下降(P=0.043,P=0.002)。電鏡下可見造模組肌間神經(jīng)叢神經(jīng)元和Cajal間質(zhì)細(xì)胞出現(xiàn)核周間隙增大、線粒體腫脹、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張等損傷;免疫組化示造模組結(jié)腸組織PGP9.5、synaptophysin累計(jì)光密度值均較對(duì)照組明顯降低(P=0.013,P=0.046),c-kit累計(jì)光密度值2組間無顯著差異。結(jié)論:成功建立了符合臨床表現(xiàn)及病理學(xué)變化特點(diǎn)的STC犬模型,該模型可用于結(jié)腸電刺激干預(yù)的療效觀察和評(píng)價(jià)。第二部分結(jié)腸電刺激對(duì)慢傳輸型便秘模型犬胃腸傳輸、排便及腸神經(jīng)系統(tǒng)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的影響研究目的:探討結(jié)腸電刺激對(duì)慢傳輸型便秘模型犬的胃腸傳輸功能、排便頻率、大便性狀的影響并探討其對(duì)ENS-ICC-SMC網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的影響。方法:觀察和記錄8只比格犬的基線信息,隨機(jī)分為電刺激組和假刺激組,所有犬行開腹手術(shù)植入結(jié)腸電刺激系統(tǒng),待恢復(fù)后進(jìn)入干預(yù)期。采用肉制罐頭飲食聯(lián)合復(fù)方地芬諾酯、鹽酸阿洛司瓊的方法進(jìn)行慢傳輸型便秘(slow transit constipation,STC)造模,共計(jì)5周,第2周開始進(jìn)行個(gè)體化結(jié)腸電刺激(首次刺激前進(jìn)行個(gè)體化參數(shù)篩選)/假刺激(只模擬動(dòng)作,不開啟電刺激),每周測(cè)定胃腸傳輸時(shí)間(gastrointestinal transit time,GITT),每日觀察和記錄犬排便次數(shù)、大便性狀,比較2組間差別。所有犬經(jīng)開腹手術(shù)取直乙交界處的全層結(jié)腸組織,光鏡下觀察結(jié)腸組織形態(tài),免疫組織化學(xué)染色分析2組間PGP9.5、synaptophysin、c-kit變化,Western blot方法檢測(cè)synaptophysin、c-kit、縫隙連接蛋白connexin43、c-kit天然配體干細(xì)胞因子(stem cell growth factor,SCF)在2組間的差異。取出結(jié)腸刺激系統(tǒng),觀察結(jié)腸電刺激裝置植入機(jī)體后的組織相容性。結(jié)果:8只比格犬均順利完成所有實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,所篩選的刺激參數(shù)間存在個(gè)體差異。與假刺激組相比,個(gè)體化結(jié)腸電刺激可以縮短STC模型犬的GITT(P=0.002),增加排便頻率(P=0.042)和大便性狀得分(P=0.035)。電刺激組PGP9.5、synaptophysin免疫組化染色強(qiáng)度明顯升高(P=0.008、P=0.032),c-kit的染色強(qiáng)度兩組間無顯著差異。結(jié)腸電刺激組synaptophysin蛋白表達(dá)顯著增加(P=0.002),c-kit、connexin43、SCF蛋白表達(dá)在2組間無顯著差異。肉眼和光鏡下觀察植入的電刺激裝置未引起嚴(yán)重炎癥反應(yīng),組織相容性較好。結(jié)論:個(gè)體化結(jié)腸電刺激能夠改善STC模型犬的排便、促進(jìn)胃腸傳輸;其作用機(jī)制可能是促進(jìn)腸神經(jīng)系統(tǒng)肌間神經(jīng)叢的再生;動(dòng)物對(duì)植入式結(jié)腸電刺激系統(tǒng)有較好的承受性和組織相容性。
【學(xué)位單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R574.62
【部分圖文】：

粗纖維￡４％；富含維生素及微量元素）４００ｇ／天。在驗(yàn)基礎(chǔ)上，我們預(yù)實(shí)驗(yàn)探索了不同飲食組合對(duì)犬排便肉制罐頭飲食代替標(biāo)準(zhǔn)飼料的效果更加明顯。因此最予肉制罐頭（由煙臺(tái)中寵食品股份有限公司提供，原淀粉等；粗蛋白２６％，粗脂肪２４％，粗纖維夕．５％）?４實(shí)驗(yàn)期間均不限制飲水。??間的測(cè)定??同形狀、各２０根的鋇條（由天津塑料研究所有限公司時(shí)，２４小時(shí)置于明膠空心膠囊（購(gòu)自江蘇力凡膠囊有口咽深處，注視其全部吞咽。收集０小時(shí)起每次所排條的形狀及數(shù)目，直到所有鋇條排出體外。胃ａｌ?ｔｒａｎｓｉｔ?ｔｉｍｅ，?ＧＩＴＴ）定義為９０％的標(biāo)記物（１８根）排終值�。撤N形狀鋇條ＧＩＴＴ的平均值。??

北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士學(xué)位論文???服用標(biāo)準(zhǔn)飼料４００ｇ／天，造模組改為肉制罐頭４００ｇ／天，并給予３ｍｇ／ｋｇ／ｄ復(fù)方地芬??諾酯（常州康普藥業(yè)有限公司）聯(lián)合５ｍｇ／ｄ鹽酸阿洛司瓊（湖北巨勝科技有限公司）??每日清晨口服，其中復(fù)方地芬諾酯置于明膠空心膠囊內(nèi)，用手放置于犬口咽深處，??注視其全部吞咽，鹽酸阿洛司瓊粉末用蒸餾水配成５ｇ／Ｌ的溶液，每日抽�。欤恚煊�??注射器注射至犬口咽深處，注視其全部吞咽。對(duì)照組給予同等數(shù)量的明膠空心膠??囊及蒸餾水，采取同樣的給藥方法。干預(yù)期期間每周測(cè)量一次ＧＩＴＴ，并每日記錄??犬的排便頻率和大便性狀，５周后干預(yù)停止。所有犬行開腹手術(shù)取直乙交界處（距??肛門１５ｃｍ）全層腸壁組織，進(jìn)一步行形態(tài)學(xué)觀察、免疫組織化學(xué)分析。??本研究由中日友好醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意。??

３．排便頻率??表１－３給出了對(duì)照組及造模組犬在干預(yù)期內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)的排便頻率情況。結(jié)??合表１－３和圖１－４可知，兩組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物排便頻率不同，造模組排便頻率較對(duì)照組??下降，主效應(yīng)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｆ＝６．５６８，?Ｐ＝０．０４３）。具體時(shí)間點(diǎn)的比較可得??出自第２周開始造模組和對(duì)照組間排便頻率的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。???表１－３兩組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不同時(shí)間點(diǎn)排便頻率統(tǒng)計(jì)表???分組?對(duì)照組（次／天）?造模組（次／天）?Ｐ??基線?２＿９５±０．４８?３．００士０．３４?０．８７０??第?１?周?３．００±０．５０?２．６５±０．３５?０．２９４??第?２?周?３．０８士０．４１?２．４５士０．２６?０．０４３??第?３?周?２．８８±０．１９?２．３３±０．３３?０．０２８??第?４?周?３．０８士０．２４?２．４０士０．２４?０．００７??第?５?周?２．９５±０．３７?２．３８±０．２６?０．０４４??注：數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示；粗體Ｐ值：戶＜〇．〇５
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 余躍,殷光甫,錢偉,侯曉華;胃起搏對(duì)胃竇主要的興奮性和抑制性神經(jīng)的影響[J];中華消化雜志;2005年09期

本文編號(hào)：2876581