潰瘍性結腸炎(Ulcerative Colitis,UC)是炎癥性腸病(Inflammatory Bowel Disease,IBD)的一種亞型,現(xiàn)有研究成果認為其發(fā)生與發(fā)展過程復雜,遺傳、免疫、環(huán)境以及微生物等因素參與其中。p38是炎癥狀態(tài)下活躍的主要信號之一,活化的p38可活化其下游的MAPKAPK2(MAP kinase-activated protein kinase2,MK2)信號,激活的后者能夠促進TNF-α、IL-6等炎性因子的合成從而能加速炎癥發(fā)展,研究表明UC中p38通路扮演了重要角色。多肽MMI-0100是一個連接細胞穿膜肽的多肽抑制劑,研究證其能夠抑制MK2的磷酸化。因此我們通過UC小鼠模型,檢測MMI-0100是否能夠通過抑制MK2信號而抑制TNF-α,IL-6等因子表達及分泌,從而發(fā)揮減緩UC小鼠結腸炎癥的作用。我們通過給小鼠飲用2%DSS一周以形成急性UC模型,同時將1 mg/kg的MMI-0100給予小鼠,期間監(jiān)測小鼠體重等特征;且在后期收集小鼠結腸,觀察了結腸受損和炎性細胞的浸潤,并檢測了TNF-α,IL-6等因子分泌,以確認MMI-0100是否具有抑制UC小鼠結腸炎癥發(fā)展的效果。此外,使用5 mg/kg5-ASA作為對照來比較其效果。在體外條件下1μg/mL的LPS刺激RAW 264細胞,并且將THP-1細胞在用20 ng/mL的PMA誘導72h使其分化后以同樣劑量LPS刺激,同時將濃度為100、10nM的MMI-0100作用細胞24h,在mRNA及蛋白水平檢測了相關促炎的因子表達,以觀察MMI-0100是否也能抑制體外細胞炎癥因子的分泌。最后檢測了MK2信號的磷酸化以驗證MMI-0100在UC上的作用機制是否也是通過抑制MK2信號而實現(xiàn)的。我們的結果表明:多肽MMI-0100能夠減緩UC小鼠體重下降以及結腸縮短,并且能夠阻礙炎性細胞向結腸組織的浸潤,下調TNF-α、IL-6等炎性細胞因子的表達與分泌,也能夠減緩炎癥對結腸的損傷;同時發(fā)現(xiàn)MMI-0100也能夠下調細胞水平TNF-α、IL-6等炎癥性因子的表達及分泌,且多肽MMI-0100是通過抑制MK2信號的磷酸化而抑制DSS小鼠炎癥的發(fā)展,下調體外細胞LPS引起的促炎因子的合成和分泌的。
【學位單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R574.62
【部分圖文】：

1.1.2 病理學特點UC 和 CD 是 IBD 主要的兩種不同發(fā)病形式，雖然二者的病因、發(fā)病機理以及臨床特征等方面有較多相似的地方，但是仍有差異存在。其一是 UC 癥容易復發(fā)容易引起并發(fā)癥，而且對腸道造成的損傷持續(xù)時間較長，而 CD 發(fā)病并無此特點[11]。其二在于，UC 發(fā)病時炎癥從直腸粘膜開始發(fā)生不同程度的擴散，然后會產生炎癥介質等復雜混合物，引發(fā)更嚴重的炎癥。在組織病理學上，主要有大量中性粒細胞在粘膜層浸潤且可見膿腫而形成的隱窩，常見杯狀細胞受損嚴重等特征[1]；而對于 CD 發(fā)病主要呈現(xiàn)不連續(xù)，節(jié)段性的特點，雖然腸道任何部位都容易受到感染，但是炎癥的發(fā)生最常見于回腸的末端，在病理組織上常見由巨噬細胞（Macrophagocyte，Mφ）形成的肉芽腫[1,12]。再有報道稱，較之 UC，CD 的發(fā)病更容易受遺傳因素的影響[1, 13]，有研究者陸續(xù)研究發(fā)現(xiàn)患有 CD 的人群，下一代患有該病的概率要比正常人高[14]。

據(jù)已有的報道，一方面，有研究者發(fā)現(xiàn)高達 20% 的 IBD 患者其家族史中存在患 IBD 的先例，且患者第一代親屬的患病概率最高[14]，另一方面發(fā)現(xiàn)不少與IBD 發(fā)病有關的敏感基因是與其它免疫疾病關聯(lián)基因重合的[2, 23]。最早開展的與 CD 的敏感基因相關的篩選研究，發(fā)現(xiàn)了 NOD2 基因的兩組CARD15 和 IBD1 [24, 25]。自此之后又陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了較多其他的 IBD 易感基因，截止 2010 年時被發(fā)現(xiàn)的 IBD 敏感基因已經(jīng)達 60 個之多[26]，直到最近幾年研究成果已經(jīng)報道了將近 100 個 IBD 敏感基因[27]。并且這些已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)的 IBD 易感基因涉及到細胞免疫、腸道粘膜屏障等方面。如下圖-2 所見，被發(fā)現(xiàn)的這些敏感基因部分是 UC 高敏感（下圖紅色標注），部分是 CD 高敏感（下圖藍色標注），還有部分基因是對 IBD 的這兩種亞型都高敏感。同時可以看出 IBD 敏感基因中涉及免疫調節(jié)的較多，并且與細胞自噬等相關的敏感基因在 CD 的發(fā)病機理中扮演更重要角色，而 UC 發(fā)病敏感基因與腸道粘膜屏障關系更密切[28]。此外研究還發(fā)現(xiàn)遺傳變異會使得 CD 的發(fā)病率增加[29]，這些基因主要是通過 NF-κB，MAPK 等信號通路來參與調節(jié)。

甚至在 IBD 的發(fā)生、發(fā)展機理中發(fā)揮著很關鍵D患者腸道內的大腸桿菌等致病菌的數(shù)量比正常果見下圖-3[34]，而且這些致病類菌群可粘附到腸效率影響其他有害因素對腸上皮的入侵[34, 35]。者通過自發(fā)性 UC 小鼠模型也證實了腸道菌落群下，在實驗性小鼠的腸道觀察不到與結腸炎現(xiàn)象關發(fā)性 UC 發(fā)生時則會出現(xiàn)致病性菌群粘附在腸道粘況依賴于腸道的典型致病微生物數(shù)量[36, 37]。于腸道微生物菌群本身的認識目前仍不是非常完整多樣性認識的限制性以及可利用手段的局限性，阻互影響的深入探討[38, 39]。因此，將腸道微生物通可能會在了解與 IBD 發(fā)病微生物的相關性、功能和[40, 41]。了解腸道微生物的分布、動力學及其在疾會給探討微生物在病灶中的分布提供新的研究和參
【參考文獻】

相關期刊論文 前4條

1 Joshua C Berkowitz;Joanna Stein-Fishbein;Sundas Khan;Richard Furie;Keith S Sultan;;Declining use of combination infliximab and immunomodulator for inflammatory bowel disease in the community setting[J];World Journal of Gastrointestinal Pharmacology and Therapeutics;2018年01期

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3 Elizabeth R Mann;Xuhang Li;;Intestinal antigen-presenting cells in mucosal immune homeostasis:Crosstalk between dendritic cells,macrophages and B-cells[J];World Journal of Gastroenterology;2014年29期

4 Peter Laszlo Lakatos;;Recent trends in the epidemiology of inflammatory bowel diseases:Up or down?[J];World Journal of Gastroenterology;2006年38期

本文編號：2868006