潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative Colitis,UC)是炎癥性腸病(Inflammatory Bowel Disease,IBD)的一種亞型,現(xiàn)有研究成果認(rèn)為其發(fā)生與發(fā)展過(guò)程復(fù)雜,遺傳、免疫、環(huán)境以及微生物等因素參與其中。p38是炎癥狀態(tài)下活躍的主要信號(hào)之一,活化的p38可活化其下游的MAPKAPK2(MAP kinase-activated protein kinase2,MK2)信號(hào),激活的后者能夠促進(jìn)TNF-α、IL-6等炎性因子的合成從而能加速炎癥發(fā)展,研究表明UC中p38通路扮演了重要角色。多肽MMI-0100是一個(gè)連接細(xì)胞穿膜肽的多肽抑制劑,研究證其能夠抑制MK2的磷酸化。因此我們通過(guò)UC小鼠模型,檢測(cè)MMI-0100是否能夠通過(guò)抑制MK2信號(hào)而抑制TNF-α,IL-6等因子表達(dá)及分泌,從而發(fā)揮減緩UC小鼠結(jié)腸炎癥的作用。我們通過(guò)給小鼠飲用2%DSS一周以形成急性UC模型,同時(shí)將1 mg/kg的MMI-0100給予小鼠,期間監(jiān)測(cè)小鼠體重等特征;且在后期收集小鼠結(jié)腸,觀察了結(jié)腸受損和炎性細(xì)胞的浸潤(rùn),并檢測(cè)了TNF-α,IL-6等因子分泌,以確認(rèn)MMI-0100是否具有抑制UC小鼠結(jié)腸炎癥發(fā)展的效果。此外,使用5 mg/kg5-ASA作為對(duì)照來(lái)比較其效果。在體外條件下1μg/mL的LPS刺激RAW 264細(xì)胞,并且將THP-1細(xì)胞在用20 ng/mL的PMA誘導(dǎo)72h使其分化后以同樣劑量LPS刺激,同時(shí)將濃度為100、10nM的MMI-0100作用細(xì)胞24h,在mRNA及蛋白水平檢測(cè)了相關(guān)促炎的因子表達(dá),以觀察MMI-0100是否也能抑制體外細(xì)胞炎癥因子的分泌。最后檢測(cè)了MK2信號(hào)的磷酸化以驗(yàn)證MMI-0100在UC上的作用機(jī)制是否也是通過(guò)抑制MK2信號(hào)而實(shí)現(xiàn)的。我們的結(jié)果表明:多肽MMI-0100能夠減緩UC小鼠體重下降以及結(jié)腸縮短,并且能夠阻礙炎性細(xì)胞向結(jié)腸組織的浸潤(rùn),下調(diào)TNF-α、IL-6等炎性細(xì)胞因子的表達(dá)與分泌,也能夠減緩炎癥對(duì)結(jié)腸的損傷;同時(shí)發(fā)現(xiàn)MMI-0100也能夠下調(diào)細(xì)胞水平TNF-α、IL-6等炎癥性因子的表達(dá)及分泌,且多肽MMI-0100是通過(guò)抑制MK2信號(hào)的磷酸化而抑制DSS小鼠炎癥的發(fā)展,下調(diào)體外細(xì)胞LPS引起的促炎因子的合成和分泌的。
【學(xué)位單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類(lèi)】：R574.62
【部分圖文】：

1.1.2 病理學(xué)特點(diǎn)UC 和 CD 是 IBD 主要的兩種不同發(fā)病形式，雖然二者的病因、發(fā)病機(jī)理以及臨床特征等方面有較多相似的地方，但是仍有差異存在。其一是 UC 癥容易復(fù)發(fā)容易引起并發(fā)癥，而且對(duì)腸道造成的損傷持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，而 CD 發(fā)病并無(wú)此特點(diǎn)[11]。其二在于，UC 發(fā)病時(shí)炎癥從直腸粘膜開(kāi)始發(fā)生不同程度的擴(kuò)散，然后會(huì)產(chǎn)生炎癥介質(zhì)等復(fù)雜混合物，引發(fā)更嚴(yán)重的炎癥。在組織病理學(xué)上，主要有大量中性粒細(xì)胞在粘膜層浸潤(rùn)且可見(jiàn)膿腫而形成的隱窩，常見(jiàn)杯狀細(xì)胞受損嚴(yán)重等特征[1]；而對(duì)于 CD 發(fā)病主要呈現(xiàn)不連續(xù)，節(jié)段性的特點(diǎn)，雖然腸道任何部位都容易受到感染，但是炎癥的發(fā)生最常見(jiàn)于回腸的末端，在病理組織上常見(jiàn)由巨噬細(xì)胞（Macrophagocyte，Mφ）形成的肉芽腫[1,12]。再有報(bào)道稱(chēng)，較之 UC，CD 的發(fā)病更容易受遺傳因素的影響[1, 13]，有研究者陸續(xù)研究發(fā)現(xiàn)患有 CD 的人群，下一代患有該病的概率要比正常人高[14]。

據(jù)已有的報(bào)道，一方面，有研究者發(fā)現(xiàn)高達(dá) 20% 的 IBD 患者其家族史中存在患 IBD 的先例，且患者第一代親屬的患病概率最高[14]，另一方面發(fā)現(xiàn)不少與IBD 發(fā)病有關(guān)的敏感基因是與其它免疫疾病關(guān)聯(lián)基因重合的[2, 23]。最早開(kāi)展的與 CD 的敏感基因相關(guān)的篩選研究，發(fā)現(xiàn)了 NOD2 基因的兩組CARD15 和 IBD1 [24, 25]。自此之后又陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了較多其他的 IBD 易感基因，截止 2010 年時(shí)被發(fā)現(xiàn)的 IBD 敏感基因已經(jīng)達(dá) 60 個(gè)之多[26]，直到最近幾年研究成果已經(jīng)報(bào)道了將近 100 個(gè) IBD 敏感基因[27]。并且這些已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)的 IBD 易感基因涉及到細(xì)胞免疫、腸道粘膜屏障等方面。如下圖-2 所見(jiàn)，被發(fā)現(xiàn)的這些敏感基因部分是 UC 高敏感（下圖紅色標(biāo)注），部分是 CD 高敏感（下圖藍(lán)色標(biāo)注），還有部分基因是對(duì) IBD 的這兩種亞型都高敏感。同時(shí)可以看出 IBD 敏感基因中涉及免疫調(diào)節(jié)的較多，并且與細(xì)胞自噬等相關(guān)的敏感基因在 CD 的發(fā)病機(jī)理中扮演更重要角色，而 UC 發(fā)病敏感基因與腸道粘膜屏障關(guān)系更密切[28]。此外研究還發(fā)現(xiàn)遺傳變異會(huì)使得 CD 的發(fā)病率增加[29]，這些基因主要是通過(guò) NF-κB，MAPK 等信號(hào)通路來(lái)參與調(diào)節(jié)。

甚至在 IBD 的發(fā)生、發(fā)展機(jī)理中發(fā)揮著很關(guān)鍵D患者腸道內(nèi)的大腸桿菌等致病菌的數(shù)量比正常果見(jiàn)下圖-3[34]，而且這些致病類(lèi)菌群可粘附到腸效率影響其他有害因素對(duì)腸上皮的入侵[34, 35]。者通過(guò)自發(fā)性 UC 小鼠模型也證實(shí)了腸道菌落群下，在實(shí)驗(yàn)性小鼠的腸道觀察不到與結(jié)腸炎現(xiàn)象關(guān)發(fā)性 UC 發(fā)生時(shí)則會(huì)出現(xiàn)致病性菌群粘附在腸道粘況依賴于腸道的典型致病微生物數(shù)量[36, 37]。于腸道微生物菌群本身的認(rèn)識(shí)目前仍不是非常完整多樣性認(rèn)識(shí)的限制性以及可利用手段的局限性，阻互影響的深入探討[38, 39]。因此，將腸道微生物通可能會(huì)在了解與 IBD 發(fā)病微生物的相關(guān)性、功能和[40, 41]。了解腸道微生物的分布、動(dòng)力學(xué)及其在疾會(huì)給探討微生物在病灶中的分布提供新的研究和參
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 Joshua C Berkowitz;Joanna Stein-Fishbein;Sundas Khan;Richard Furie;Keith S Sultan;;Declining use of combination infliximab and immunomodulator for inflammatory bowel disease in the community setting[J];World Journal of Gastrointestinal Pharmacology and Therapeutics;2018年01期

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3 Elizabeth R Mann;Xuhang Li;;Intestinal antigen-presenting cells in mucosal immune homeostasis:Crosstalk between dendritic cells,macrophages and B-cells[J];World Journal of Gastroenterology;2014年29期

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本文編號(hào)：2868006