目的：研究p38MAPK在D-GalN/LPS誘導(dǎo)的急性肝衰竭小鼠模型以及乙肝病毒相關(guān)慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者肝組織中的表達(dá)及其意義。 方法：采用D-GalN/LPS誘導(dǎo)方法構(gòu)建C57BL/6小鼠急性肝衰竭模型,分別在(0、0.5、1、2、4、6、8小時(shí))設(shè)立觀測(cè)組,每組4只,處死動(dòng)物取肝組織標(biāo)本進(jìn)行HE染色觀察肝組織結(jié)構(gòu)的病理變化,運(yùn)用蛋白免疫印跡技術(shù)半定量檢測(cè)及免疫組織化學(xué)染色定位檢測(cè)肝組織中p-p38MAPK的表達(dá)。運(yùn)用免疫組織化學(xué)染色、對(duì)照研究p-p38MAPK在HBV-ACLF、乙肝肝硬化、慢性乙型肝炎(CHB)患者肝組織中的表達(dá)情況。 結(jié)果：1、D-GalN/LPS誘導(dǎo)的急性肝衰竭模型中位生存時(shí)間8.2±0.9小時(shí),死亡率90%。小鼠的肝組織呈現(xiàn)大塊壞死,隨存活時(shí)間的延長(zhǎng),小鼠肝組織炎癥程度逐漸加重。2、蛋白免疫印跡法檢測(cè)p-p38MAPK在肝衰竭小鼠肝組織勻漿中的表達(dá)隨時(shí)間變化持續(xù)增高,與肝損害加重程度一致,半定量分析表達(dá)量顯著高于正常對(duì)照組(p=0.034)。免疫組化染色結(jié)果顯示：炎癥早期主要為竇細(xì)胞表達(dá)p-p38MAPK,隨著肝組織損害加重,肝細(xì)胞表達(dá)p-p38MAPK漸多,壞死肝組織附近大量p-p38MAPK陽(yáng)性肝細(xì)胞分布。3、正常人肝組織中p-p38MAPK的表達(dá)量很低,CHB患者肝組織內(nèi)可見(jiàn)浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞及肝細(xì)胞表達(dá)p-p38MAPK。從慢性肝炎→肝硬化→肝衰竭p-p38MAPK的表達(dá)量呈增多趨勢(shì),與臨床觀察病變程度呈逐漸加重相一致。 結(jié)論：1、D-GalN/LPS誘導(dǎo)的小鼠急性肝衰竭模型中,p-p38MAPK表達(dá)量隨肝組織損害加重而增多,表明p38MAPK信號(hào)通路在肝衰竭病變過(guò)程中占重要地位。2、在HBV-ACLF患者致病過(guò)程中,p38MAPK信號(hào)通路可能發(fā)揮重要作用。
【學(xué)位單位】：中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2011
【中圖分類(lèi)】：R575.3
【部分圖文】：

圖1p38MAPK信號(hào)途徑的圖示。許多細(xì)胞外信號(hào)，例如細(xì)胞應(yīng)激和致炎因子能激活p38MAPK途徑，從而導(dǎo)致二層MAPK磷酸化級(jí)聯(lián)反應(yīng)的開(kāi)始。其中MAPKKKs磷酸化p38MApK特異性MAP以S:MKK3、MKK4或MKK6。它們隨后磷酸化p38MAPK的四種亞兀。(a、p、下不.16)不11二種可選擇的剪切變異體:MxiZ，Exip、p38p2。AsKI能

織形態(tài)學(xué)分析模型0.5h及l(fā)h組與對(duì)照組(oh)無(wú)明顯差別，肝臟形態(tài)正常，被膜紅潤(rùn)、質(zhì)地柔軟，鏡下看:肝小葉結(jié)構(gòu)完整，無(wú)明顯肝細(xì)胞變性胞浸潤(rùn)現(xiàn)象;模型2h組:肝臟表面見(jiàn)散在的點(diǎn)狀出血點(diǎn)，呈暗紅，鏡下看肝小葉結(jié)構(gòu)尚完整，肝細(xì)胞腫脹、氣球樣變，點(diǎn)狀壞死少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn);模型4h組:肝臟表面見(jiàn)散在點(diǎn)片狀出血點(diǎn)，肝臟明顯腫脹，質(zhì)地偏韌，鏡下看:肝小葉結(jié)構(gòu)尚存，部分肝細(xì)性，以灶狀壞死為主，可見(jiàn)大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，肝竇充血;模:肝臟表面出血，呈暗紅色，鏡下看:肝細(xì)胞實(shí)質(zhì)呈大塊或亞大塊肝細(xì)胞溶解消失，僅小葉中央部殘留少數(shù)變性細(xì)胞，肝竇擴(kuò)張并，凋亡小體散在，匯管區(qū)間質(zhì)水腫，血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹，炎癥細(xì)胞p38在肝臟中表達(dá)

6APDH 00.568‘h)圖3各纖l，J、鼠肝)])沙啤}‘}」p一p38MAPK表達(dá)免疫印跡結(jié)果OOdVH、8的d·d時(shí)間點(diǎn)(h)1冬14各糾小鼠JJf一夕}{織仁p:38MAI)K表達(dá)量相對(duì)值比較2.2免疫組化結(jié)果正常對(duì)照組及模型0.5小}].J一、l小時(shí)組小鼠牙「組織結(jié)構(gòu)正常，川一細(xì)胞引「列規(guī)整，小葉結(jié)構(gòu)完整，僅有較少暈的肝竇狀內(nèi)皮細(xì)胞陽(yáng)性染色，偶.lJ’見(jiàn)jJf:實(shí)質(zhì)細(xì)胞陽(yáng)性染色;模找JZ小}I.J一紅}小鼠肝到!‘織結(jié)構(gòu)尚完整，月十細(xì)胞腫脹、z之球樣變，點(diǎn)狀壞死為主，可見(jiàn)少舉炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，p一P38MAPK染色陽(yáng)性的細(xì)胞明顯增多，肝竇狀內(nèi)皮細(xì)胞較多表達(dá)，部分枯否細(xì)胞及肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞也有}JIl性染色;模型4小時(shí)到}.，)Jl:小葉結(jié)構(gòu)尚存
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2860737