發(fā)布時間：2020-10-29 09:52

　　 第一部分:異丙景糖酐抗乙型肝炎病毒的體外實(shí)驗(yàn)研究 目的:通過觀察異丙景糖酐作用后,HepG2.2.15細(xì)胞分泌HBV標(biāo)志物的變化,探討異丙景糖酐在體外條件下對乙型肝炎病毒(HBV)的復(fù)制是否有直接的抑制作用. 方法:以不同濃度的異丙景糖酐溶液作用于HepG2.2.15細(xì)胞72小時(h),以恩替卡韋(10μg/ml)作為陽性對照,以不含任何藥物的胎牛血清培養(yǎng)基為陰性對照;分別于藥物作用后24h、48h、72h取培養(yǎng)上清,并于72h后提取細(xì)胞內(nèi)HBV-DNA。用ABBOT試劑盒檢測培養(yǎng)上清中HBsAg, HBeAg的水平,用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)法檢測細(xì)胞內(nèi)外HBV-DNA水平,以MTT法檢測細(xì)胞成活率。 結(jié)果:濃度為10μg/ml、40μg/ml、100μg/ml的異丙景糖酐溶液作用于HepG2.2.15細(xì)胞72小時后,細(xì)胞成活率分別為93.09%、91.12%、87.03%(P0.05),組間比較無顯著差異,與陰性組比較亦無顯著差異。各用藥組培養(yǎng)上清中的HBsAg、HBeAg及細(xì)胞內(nèi)外HBV-DNA水平較陰性組低,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。用藥組之間比較,高濃度組上述指標(biāo)較低濃度組低,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;HBsAg、HBeAg及細(xì)胞內(nèi)外HBV-DNA的抑制率隨著藥物作用時間的延長而增加,高濃度組的抑制率高于低濃度組,藥物作用72h,各組(10μg/ml、40μg/ml、100μg/ml)HBsAg的抑制率分別為3.43%、6.38%、10.57%(P=0.137);HBeAg的抑制率分別為5.6%、13.8%、19.2%(P=0.660);細(xì)胞內(nèi)HBV-DNA的抑制率分別為0.7%、2.4%、3.5%(P=0.679),差異組間比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。陽性對照(恩替卡韋)作用72h,培養(yǎng)上清HBsAg、HBeAg及細(xì)胞內(nèi)外HBV-DNA水平較陰性組有顯著下降。 結(jié)論:濃度為10μg/ml、40μg/ml、100μg/ml的異丙景糖酐溶液對HepG2.2.15細(xì)胞無毒性作用,對HepG2.2.15細(xì)胞表達(dá)分泌HBsAg、HBeAg及HBV-DNA無明顯的抑制作用。 第二部分:異丙景糖酐抗乙型肝炎病毒的臨床研究 目的:研究異丙景糖酐治療HBeAg陽性慢性乙型肝炎(CHB)患者的療效和安全性,并進(jìn)一步探討可能的抗HBV機(jī)制。 方法:將HBeAg陽性的CHB患者按1:1:1:1隨機(jī)分配至異丙景糖酐200mg、400mg和800mg組及對照組(甘露醇組)。用藥組給予相應(yīng)劑量的異丙景糖酐,對照組給予800mg甘露醇,療程12周。觀察治療前后各組病毒學(xué)、生化學(xué)、血清學(xué)指標(biāo)和安全性指標(biāo)變化情況,血清細(xì)胞因子水平變化情況及不良反應(yīng)發(fā)生情況。 結(jié)果:治療12周后,異丙景糖酐800mg組的病毒應(yīng)答率為18.75%,400mg組和200mg組的病毒應(yīng)答率均為12.5%,組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。800mg組使HBV-DNA水平平均下降(0.96±1.41)log10拷貝/ml,治療前后有顯著性差異(P=0.0006);400mg組、200mg組和對照組HBV-DNA水平分別平均下降(0.28±0.92)log10拷貝/ml、(0.48±1.19)log10拷貝/ml、(0.27±0.84)log10拷貝/ml,組間和組內(nèi)比較均無顯著性差異。HBeAg陰轉(zhuǎn)率、ALT復(fù)常率組間比較均無顯著性差異。最高劑量異丙景糖酐800mg療程12周對患者無明顯不良影響。研究中報道的不良事件主要表現(xiàn)為慢性乙肝肝功能異常。本項(xiàng)研究有一例嚴(yán)重不良事件發(fā)生,但是位于安慰劑組。 800mg組用藥后血清IFN-γ、TNF-α、IL-2水平較用藥前升高,但I(xiàn)FN-γ水平治療前后差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而TNF-α、IL-2水平治療前與治療后12周相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.015;0.023)。其余各組治療后上述細(xì)胞因子水平均較治療前有所升高,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。比較各組治療12周與治療前各細(xì)胞因子水平的差值,800mg組IFN-γ、TNF-α、IL-2治療前后的差值均明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.031,0.003,0.041)。 結(jié)論:異丙景糖酐劑量為800mg時對HBV復(fù)制有一定抑制作用,并顯示了良好的安全性,抗病毒作用的發(fā)揮可能有賴于機(jī)體細(xì)胞免疫系統(tǒng)的激活。為了得到更多的有效性和安全性的資料,需要進(jìn)行擴(kuò)大樣本量的臨床試驗(yàn)。
【學(xué)位單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2008
【中圖分類】：R512.62
【文章目錄】：
符號說明
中文摘要
英文摘要
論文正文：異丙景糖酐抗乙型肝炎病毒的研究
    前言
    第一部分 異丙景糖酐抗乙型肝炎病毒的體外實(shí)驗(yàn)研究
        前言
        1. 材料與方法
        2. 結(jié)果
        3. 討論
        參考文獻(xiàn)
    第二部分 異丙景糖酐抗乙型肝炎病毒的臨床研究
        前言
        1. 研究對象
        2. 研究設(shè)計(jì)
        3. 結(jié)果
        4. 討論
        參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
致謝
攻讀碩士研究生期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文

【參考文獻(xiàn)】

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1 劉平;袁繼麗;倪力強(qiáng);;重視中藥的肝損傷問題[J];中國新藥與臨床雜志;2007年05期

2 ;中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會、傳染病與寄生蟲病學(xué)分會[J];肝臟;2004年01期

本文編號：2860734