發(fā)布時間：2020-10-22 18:22

　　 研究背景與目的潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative colitis,UC)是一種病因尚不明確的反復發(fā)作慢性非特異性腸道炎癥性疾病,近年發(fā)病率明顯上升,研究表明遺傳因素、環(huán)境因素、宿主免疫系統(tǒng)和微生物的相互作用在其發(fā)病過程中起主要作用。在機體炎癥反應的病理生理過程中,血小板是參與炎癥和免疫反應的重要炎癥細胞,研究發(fā)現(xiàn)潰瘍性結(jié)腸炎患者中的血小板形態(tài)改變及血小板功能異常,促進炎癥和促血栓形成作用增強,潰瘍性結(jié)腸炎患者中血小板計數(shù)增加,其中明顯增多的活化血小板在粘膜損傷修復中發(fā)揮重要作用。鉀離子通道參與細胞的去極化和維持細胞膜電位,促進細胞增殖、活化和遷移。電壓依賴性鉀通道1.3(voltage dependent potassium channel 1.3,Kv1.3)和鈣激活鉀通道3.1(calcium-activated potassium channel 3.1,Kca3.1)是兩種在血小板中廣泛表達,調(diào)節(jié)血小板功能的重要電壓門控鉀通道。鉀離子外流是引起炎癥小體活化的重要因素之一,研究顯示血小板Kv1.3通道與血小板活化有關,Kca3.1可能參與此過程,細胞內(nèi)低鉀是激活NLRP3(NOD-like receptor protein 3)炎癥小體的共同特征,阻斷鉀離子外流抑制NLRP3炎癥小體的激活。NLRP3炎性小體具有維持腸道內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定及調(diào)節(jié)炎癥反應的作用,NLRP3基因與潰瘍性結(jié)腸炎的易感性相關。鉀通道可以調(diào)節(jié)細胞內(nèi)外鉀的濃度,具有激活NLRP3炎性體的重要功能。因此,本實驗研究目的是探討潰瘍性結(jié)腸炎患者血小板中鉀通道和NLRP3表達水平的改變,以及與UC臨床特征的關聯(lián)分析。方法收集安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院明確診斷的UC患者17例和11例正常對照組臨床資料。從患者標本中提取血小板,采用RT-PCR方法檢測Kca3.1、Kv1.3及NLRP3 m RNA表達,分析UC患者血小板Kca3.1、Kv1.3及NLRP3 m RNA的表達水平與UC嚴重程度相關性。采用Western-blot方法檢測UC患者血小板中Kca3.1、Kv1.3及NLRP3的蛋白表達水平,分析比較UC患者血小板中Kca3.1、Kv1.3及NLRP3蛋白表達水平與UC嚴重程度相關性。同時分析比較UC患者血小板中Kca3.1、Kv1.3及NLRP3蛋白表達與患者臨床指標ESR、CRP及Mayo評分相關性。結(jié)果1.與正常對照組相比,UC患者血小板中Kca3.1、Kv1.3及NLRP3 m RNA表達量均明顯增加(t=-6.067,-4.991,-18.981;p0.05),與UC嚴重程度無明顯相關(F=0.055,0.103,0.733;P0.05)。2.UC患者血小板中Kca3.1、Kv1.3及NLRP3蛋白表達量均明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(t=-9.627,-7.39,-7.821;p0.05),與UC嚴重程度無明顯相關(F=0.8,0.194,1.293;P0.05)。3.UC患者血小板中Kca3.1與NLRP3蛋白表達水平明顯相關(r=0.877,p0.05),Kv1.3與NLRP3蛋白表達水平有一定的相關性(r=0.478),但無明顯差異(p0.05)。4.UC患者血小板中Kca3.1、Kv1.3及NLRP3蛋白表達與患者臨床指標ESR、CRP及Mayo評分均不相關(P0.05)。結(jié)論UC患者血小板中NLRP3與鉀通道Kca3.1、Kv1.3表達增高,兩者具有一定相關;UC患者血小板中Kca3.1、Kv1.3及NLRP3蛋白表達與UC病情嚴重程度及ESR、CRP及Mayo評分均無明顯相關。
【學位單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R574.62
【部分圖文】：

圖 1 UC 患者血小板中 Kca3.1、Kv1.3 和 NLRP3mRNA 的表達水平與正常對照組比較：**P<0.013.2 UC 患者血小板中 Kca3.1、Kv1.3 及 NLRP3 mRNA 表達與疾病嚴重程度的關聯(lián)分析輕、中、重度三組 UC 患者，Kca3.1 、Kv1.3、NLRP3mRNA 表達水平均高于正常對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。組間比較時，差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表 2表 2 不同嚴重程度 UC 患者血小板中 Kca3.1，Kv1.3 和 NLRP3 mRNA 的相對表達嚴重程度 Kca3.1 Kv1.3 NLRP3輕度 1.04±0.24 0.96±0.23 0.84±0.06

3.3 UC 患者血小板中 Kca3.1、Kv1.3 及 NLRP3 蛋白表達水平的與正常對照組相比，UC 患者血小板中 Kca3.1、Kv1.3 及 NLRP3升高，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。（表 3、圖 2）表 3 對照組和實驗組血小板中 Kca3.1、Kv1.3 及 NLRP3 蛋白表達水平P 值 <0.05 <0.05 <分組 Kca3.1 Kv1.3 NL對照組 0.59±0.15 0.51±0.22 0.6實驗組 1.59±0.38 1.60±0.54 1.4P 值 <0.05 <0.05 <

嚴重程度 UC 患者血小板中 Kca3.1，Kv1.3 和 NLRP3 蛋1 2 3 4 5 6 7 8Kca3.1 Kv1.3 1.51±0.46 1.76±0.64 1.69±0.40 1.58±0.54 1.43±0.30 1.53±0.62 0.800 0.194 >0.05 >0.05
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本文編號：2851949