隨著重癥醫(yī)學(xué)的發(fā)展，近十年來(lái)重癥急性胰腺炎（sever acute pancreatitis,SAP）患者在早期呼吸、循環(huán)和腎功衰竭支持治療效果顯著提高，但是死亡率并沒有明顯下降[1-3]。大多數(shù)人認(rèn)為，重癥急性胰腺炎免疫炎性細(xì)胞產(chǎn)生的眾多炎性因子使遠(yuǎn)處器官損傷，出現(xiàn)循環(huán)、呼吸、泌尿和神經(jīng)系統(tǒng)的嚴(yán)重?fù)p害。然而大多數(shù)急性胰腺炎患者可以阻止過度炎癥反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展，使其表現(xiàn)為輕癥胰腺炎具有自愈傾向[4,5]。但是為什么有20%的患者會(huì)發(fā)展為重癥急性胰腺炎？雖然有多種假說(shuō)試圖解釋這一現(xiàn)象，但其機(jī)制一直未明。目前越來(lái)越多的學(xué)者認(rèn)為抗炎-抑炎平衡紊亂致使機(jī)體不足以拮抗過度的炎癥反應(yīng)是SAP發(fā)生的核心問題。 淋巴細(xì)胞是重要的機(jī)體免疫應(yīng)答細(xì)胞，分別介導(dǎo)體液免疫和細(xì)胞免疫。對(duì)維持機(jī)體抗炎-抑炎平衡狀態(tài)起著重要的作用。然而淋巴細(xì)胞在急性胰腺炎的作用仍不十分清楚。因此進(jìn)一步研究淋巴細(xì)胞在急性胰腺炎中的免疫調(diào)節(jié)功能可以更好地理解SAP發(fā)生發(fā)展。 重癥急性胰腺炎的治療手段多是對(duì)癥治療，目前沒有良好的治療方法抑制過強(qiáng)的免疫反應(yīng)，恢復(fù)免疫平衡，其療效不盡如人意[2,6]。反應(yīng)近年來(lái)間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells, MSCs)在免疫調(diào)節(jié)領(lǐng)域所取得的巨大進(jìn)展，研究發(fā)現(xiàn)可以抑制過強(qiáng)的免疫[7]，為重癥急性胰腺炎的免疫治療提供了新的視角[8]。是否間充質(zhì)干細(xì)胞可以作為免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞，調(diào)節(jié)免疫平衡，抑制炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)，為重癥急性胰腺炎治療提供新的免疫治療策略。 【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?1．研究T、B淋巴細(xì)胞對(duì)急性胰腺炎的作用；2．檢測(cè)B細(xì)胞的亞群調(diào)節(jié)性B細(xì)胞(regulatory B cells,Bregs)在急性胰腺炎的功能；3．探討臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（umbilicalcord mesenchymal stem cells,UCMSCs）通過免疫調(diào)節(jié)作用對(duì)重癥急性胰腺炎大鼠模型的治療效果及其機(jī)制。 【材料方法】 1．通過雨蛙素腹腔誘導(dǎo)不同淋巴細(xì)胞缺陷小鼠及其同系野生型急性胰腺炎小鼠模型；2．檢測(cè)血清淀粉酶、干濕重和胰腺、肺組織病理變化評(píng)價(jià)胰腺炎損傷程度；3．利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)技術(shù)檢測(cè)血清中TNF-α和IFN-γ炎癥因子表達(dá)水平；4．使用流式細(xì)胞技術(shù)比較輕重胰腺炎患者中Bregs的含量；5．分析急性胰腺炎小鼠模型和正常小鼠Bregs的含量和炎癥水平變化關(guān)系；6．使用逆行胰膽管注射�；悄懰徕c造重癥急性胰腺炎大鼠模型；分別在誘導(dǎo)模型后0h，1h，6h，12h四個(gè)時(shí)間點(diǎn)經(jīng)尾靜脈注射UCMSCs的細(xì)胞懸液，以及造模1小時(shí)后給予20ml/kg，10ml/kg，1ml/kg，0.1ml/kg不同劑量的UCMSCs；7．通過檢測(cè)死亡率，血清淀粉酶，腹水量，胰腺干濕重，及胰腺、肺組織病理變化觀察評(píng)價(jià)UCMSCs注射時(shí)間和劑量與治療效果之間關(guān)系。 【結(jié)果】 1．T、B細(xì)胞在小鼠急性胰腺炎的作用 T細(xì)胞缺陷組和T、B細(xì)胞聯(lián)合缺陷組與同系對(duì)照組相比血清淀粉酶、胰腺水腫、病理評(píng)分顯著降低，血清炎癥因子TNF-α和IFN-γ顯著減少（P＜0.05）。B淋巴缺陷組與同系對(duì)照組相比血清淀粉酶、胰腺水腫、病理評(píng)分顯著增高，血清炎癥因子TNF-α和IFN-γ反而增加（P＜0.05）。T細(xì)胞缺陷組和T、B細(xì)胞聯(lián)合缺陷組腺外器官肺組織損傷明顯減輕，B細(xì)胞缺陷組與同系對(duì)照組肺組織損傷無(wú)明顯差異（P＞0.05） 2．Bregs在重癥急性胰腺炎的變化 重癥急性胰腺炎患者Bregs含量顯著低于輕癥胰腺炎患者（P＜0.05）；胰腺炎小鼠模型Bregs的含量也顯著低于正常小鼠模型并且Bregs的變化與血清促炎癥因子負(fù)相關(guān)。 3．臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療重癥急性胰腺炎的治療作用 0h UCMSCs治療組與SAP組相比：死亡率從58%降至10%，腹水量明顯減少，血淀粉酶,炎癥因子和干濕重也顯著性降低。胰和肺組織病理?yè)p傷顯著減輕（P＜0.05）；2、在誘導(dǎo)大鼠胰腺炎后不同時(shí)間點(diǎn)0h、1h、6h給予臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療均有明顯的治療作用，但效果逐漸減弱；3、20ml/kg，10ml/kg，1ml/kg給予臍帶間充質(zhì)干治療，均有明顯的治療作用，但效果逐漸減弱（P＜0.05）。 【結(jié)論】 本研究證實(shí)了淋巴細(xì)胞是重要的參與急性胰腺炎促炎抗炎平衡紊亂，T細(xì)胞的主要作用是促進(jìn)炎癥反應(yīng)。B淋巴細(xì)胞在急性胰腺炎炎癥反應(yīng)中有抑制作用，其機(jī)制可能是B淋巴細(xì)胞的亞型Bregs抑制過強(qiáng)的炎癥反應(yīng)。使用臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞免疫治療可明顯降低SAP的損傷程度并且治療效果具有時(shí)間依賴性和劑量依賴性。
【學(xué)位單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2013
【中圖分類】：R576
【文章目錄】：
縮略語(yǔ)表
中文摘要
Abstract
前言
文獻(xiàn)回顧
第一部分 T 細(xì)胞和 B 細(xì)胞在小鼠急性胰腺炎的作用
    前言
    1 材料和儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 結(jié)果
    4 討論
第二部分 調(diào)節(jié)性 B 細(xì)胞在急性胰腺炎的變化
    1. 材料和儀器
    2. 實(shí)驗(yàn)方法
    3 結(jié)果
    4 討論
第三部分 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療重癥急性胰腺炎
    1 材料和儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 結(jié)果
    4 討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷和研究成果
致謝

【參考文獻(xiàn)】

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1 王建祥;王平;吳海龍;劉峰;周銳;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在大鼠重癥急性胰腺炎中的作用[J];中國(guó)生化藥物雜志;2010年06期

2 江學(xué)良;李兆申;崔慧斐;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在胰腺生理更新和病理再生中的作用[J];世界華人消化雜志;2006年04期

3 王黎明;周建軍;白雯;白檳;李銘;王漢裕;王立華;劉擁軍;;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療17例類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的臨床療效觀察[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;2010年07期

4 李金茂;黎成金;賴大年;王小軍;何顯力;包國(guó)強(qiáng);吳濤;陰繼凱;;溫?zé)岑煼ㄔ鰪?qiáng)前藥氟胞嘧啶對(duì)轉(zhuǎn)基因結(jié)腸癌細(xì)胞株的殺傷作用[J];中華胃腸外科雜志;2006年03期

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