消化性潰瘍是常見的胃腸疾病，壁細(xì)胞分泌的胃酸在潰瘍病的發(fā)生與進(jìn)展中起著舉足輕重的作用，因而對(duì)胃酸分泌的研究一直受到高度重視。由于壁細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)是神經(jīng)、體液因素綜合作用的結(jié)果，在組織、器官水平很難研究單因素對(duì)酸分泌的影響，因而建立體外壁細(xì)胞研究模型十分必要。目前，國內(nèi)尚未建立壁細(xì)胞分離與研究方法，從而限制了壁細(xì)胞的研究進(jìn)程，也影響了胃腸激素作用機(jī)制以及消化性潰瘍的病理生理和藥理研究。 本研究試圖通過以下工作來加強(qiáng)我國在這一領(lǐng)域研究中的某些薄弱環(huán)節(jié)： 1．建立壁細(xì)胞的分離方法并進(jìn)行離體壁細(xì)胞生物活性鑒定：用粗制膠原酶和鈣離子螯合劑EDTA消化鈍性剝離的胃粘膜，分散的胃粘膜細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞淘洗，收集壁細(xì)胞并用Percoll密度梯度離心進(jìn)一步純化。用臺(tái)盼蘭及HE染色鑒定存活度及純度；用丫啶橙、~(14)C-氨基比林?jǐn)z取鑒定壁細(xì)胞的酸分泌功能：用RT-PCR檢測壁細(xì)胞特異的H~+-K~+ ATPase α-亞基基因表達(dá)。 2．離體壁細(xì)胞泌酸作用調(diào)節(jié)機(jī)制的研究，特別是生長抑素-14(SS-14)和某些抑酸藥物對(duì)壁細(xì)胞作用的機(jī)制研究。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)生長抑素受體有5種亞型。傳統(tǒng)觀念認(rèn)為生長抑素抑酸主要是通過抑制G細(xì)胞和ECL細(xì)胞的功能間接實(shí)現(xiàn)的，但生長抑素對(duì)壁細(xì)胞酸分泌有無直接抑制作用，是由何種受體亞型介導(dǎo)，以及生長抑素和它的受體亞型特異性激動(dòng)劑對(duì)H~+-K~+ ATPase有無影響，均尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。我們以~(14)C-氨基比林?jǐn)z取為指標(biāo)，觀察了SS-14及某些生長抑素受體亞型特異性激動(dòng)劑對(duì)組胺誘導(dǎo)的酸分泌的影響；用RT-PCR及原位雜交方法研究了壁細(xì)胞生長抑素受體亞型的表達(dá)；并應(yīng)用RT-PCR及Northern雜交方法，觀察了SS-14及不同受體亞型激動(dòng)劑對(duì)H~+-K~+ATPase α-亞基基因表達(dá)的影響。
【學(xué)位單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：1998
【中圖分類】：R573.1
【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
離體壁細(xì)胞研究模型的建立
    前言
    材料
    技術(shù)路線
    方法
    結(jié)果
    討論
離體壁細(xì)胞泌酸機(jī)制的若干研究
    前言
    材料
    研究內(nèi)容與技術(shù)路線
    方法
    結(jié)果
    討論
參考文獻(xiàn)
綜述
致謝

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