目的探討?zhàn)ひ菏欠駞⑴c填充腸上皮單層細(xì)胞間的微缺損(intestinal epithelial gaps,IEG),評價黏液填充IEG在局部腸屏障功能中的作用。方法取潰瘍性結(jié)腸炎(UC)患者及對照組的回腸末端組織,用AB-PAS、M uc2標(biāo)記黏蛋白,觀察IEG及黏蛋白表達情況。另外,分析了2013年1月至2014年12月39例UC患者及34例對照共聚焦內(nèi)鏡圖片,運用改良Watson分級方法評估局部腸屏障功能。結(jié)果 UC組IEG未被黏液填充率、上皮微缺損率、杯狀細(xì)胞比率[M(P_(25),P_(75)),%]分別為27.52(25.00,29.68)、5.33(3.48,6.62)、17.38(16.00,19.87),對照組分別為12.27(9.78,16.67)、0.27(0.00,0.69)、23.44(20.24,26.18),兩組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。上皮微缺損率與杯狀細(xì)胞比率呈負(fù)相關(guān)(r=-0.74,P0.01)。結(jié)論 UC患者存在局部腸屏障功能障礙;黏液填充IEG,維持局部腸屏障功能。
【部分圖文】：

64山東大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)53卷12期散在吸收細(xì)胞之間，縱切面呈酒杯狀(圖1A三角形)，橫截面呈靶征(圖1B)。按照Watson分級［11］方法，Ⅰ級正常，表現(xiàn)為單個上皮細(xì)胞脫落，無熒光素滲出;Ⅱ級功能性缺損，表現(xiàn)為單個細(xì)胞脫落伴熒光素滲出(圖1A箭頭);Ⅲ級結(jié)構(gòu)性缺損，表現(xiàn)為大片細(xì)胞脫落，伴上皮熒光素滲漏(圖1C、D箭頭)。UC患者回腸末端較對照組有更多的Ⅱ、Ⅲ級IEG結(jié)構(gòu)。圖1CLE下回腸末端IEG圖像A、B:對照組回腸末端杯狀細(xì)胞及IEG圖像(三角形示杯狀細(xì)胞，箭頭示IEG);C、D:UC患者回腸末端的IEG圖像(箭頭)。Fig．1ＲepresentativeconfocalimagesofIEGinterminalileumA，B:ＲepresentativeimagesofIEGandgobletcellsinterminalileumofcontrols(Tri-angleindicatedgobletcells，andarrowindicatedIEG);C，D:ＲepresentativeimagesofIEGinterminalileumofUCpatients(arrows)．2．2黏液填充IEGMuc2是黏液的主要組成成分，免疫熒光方法檢測Muc2表達，熒光顯微鏡下顯示紅色，細(xì)胞核顯示藍色(圖2)。免疫組化法檢測Muc2表達，光學(xué)顯微鏡下呈棕褐色沉淀物(圖3A、3B)。光學(xué)顯微鏡下觀察回腸末端組織AB-PAS染色情況，紫色示腸道黏液成分(圖3C、3D)。通過以上方法，觀察到IEG處有黏蛋白填充，UC患者較對照組則有更多的IEG未被黏液填充。2．3回腸末端局部腸屏障功能的評價用WatsonII/IIIIEG缺損率評估局部腸屏障功能，兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0．001);進而分析了杯狀細(xì)胞數(shù)目占上皮細(xì)胞數(shù)目的百分比，兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0．001)。對上皮微缺損率與杯狀細(xì)胞比率進行Spearman秩相關(guān)分析，兩組之間呈負(fù)相關(guān)(r=－0．74，P＜0．001)。在熒光顯微鏡下觀察IEG未被黏液封堵率情況，兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0．001)。見表1。表1UC組與對照組

周曉艷，等．黏液填充在消化道上皮微缺損及腸屏障功能中的作用65圖2熒光顯微鏡下觀察到IEG由黏液填充(×400)A、B、C:箭頭示IEG處有Muc2表達，三角形示IEG處沒有Muc2表達(UC患者回腸末端);D、E、F:箭頭示IEG處有Muc2表達(正常回腸末端)。Fig．2IEGwasfilledwithmucusunderfluorescencemicroscopy(×400)A，BandC:ArrowsindicatedMuc2expressioninIEG，andtriangleindicatedthatnomucusfilledtheIEGinter-minalileumofUCpatients;D，EandF:ArrowsindicatedMuc2expressioninIEGofterminalileumofcontrols．圖3光學(xué)顯微鏡下觀察到IEG由黏液填充(×400)A、B:箭頭示IEG處有黏液填充，三角形示IEG處沒有黏蛋白填充;C、D:箭頭示IEG(無核結(jié)構(gòu))處有黏液填充。Fig．3IEGwasfilledwithmucusunderlightmicroscopy(×400)A，B:ArrowsindicatedthatIEGwasfilledwithmucus，andtriangleindicatedthatnomucusfilledtheIEG;C，D:ArrowsindicatedIEG(seedlessstructure)wasfilledwithmucus．

周曉艷，等．黏液填充在消化道上皮微缺損及腸屏障功能中的作用65圖2熒光顯微鏡下觀察到IEG由黏液填充(×400)A、B、C:箭頭示IEG處有Muc2表達，三角形示IEG處沒有Muc2表達(UC患者回腸末端);D、E、F:箭頭示IEG處有Muc2表達(正常回腸末端)。Fig．2IEGwasfilledwithmucusunderfluorescencemicroscopy(×400)A，BandC:ArrowsindicatedMuc2expressioninIEG，andtriangleindicatedthatnomucusfilledtheIEGinter-minalileumofUCpatients;D，EandF:ArrowsindicatedMuc2expressioninIEGofterminalileumofcontrols．圖3光學(xué)顯微鏡下觀察到IEG由黏液填充(×400)A、B:箭頭示IEG處有黏液填充，三角形示IEG處沒有黏蛋白填充;C、D:箭頭示IEG(無核結(jié)構(gòu))處有黏液填充。Fig．3IEGwasfilledwithmucusunderlightmicroscopy(×400)A，B:ArrowsindicatedthatIEGwasfilledwithmucus，andtriangleindicatedthatnomucusfilledtheIEG;C，D:ArrowsindicatedIEG(seedlessstructure)wasfilledwithmucus．

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本文編號：2818677