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黏液填充在消化道上皮微缺損及腸屏障功能中的作用

發(fā)布時間:2020-09-15 07:19
   目的探討?zhàn)ひ菏欠駞⑴c填充腸上皮單層細胞間的微缺損(intestinal epithelial gaps,IEG),評價黏液填充IEG在局部腸屏障功能中的作用。方法取潰瘍性結(jié)腸炎(UC)患者及對照組的回腸末端組織,用AB-PAS、M uc2標記黏蛋白,觀察IEG及黏蛋白表達情況。另外,分析了2013年1月至2014年12月39例UC患者及34例對照共聚焦內(nèi)鏡圖片,運用改良Watson分級方法評估局部腸屏障功能。結(jié)果 UC組IEG未被黏液填充率、上皮微缺損率、杯狀細胞比率[M(P_(25),P_(75)),%]分別為27.52(25.00,29.68)、5.33(3.48,6.62)、17.38(16.00,19.87),對照組分別為12.27(9.78,16.67)、0.27(0.00,0.69)、23.44(20.24,26.18),兩組差異均有統(tǒng)計學意義(P0.01)。上皮微缺損率與杯狀細胞比率呈負相關(guān)(r=-0.74,P0.01)。結(jié)論 UC患者存在局部腸屏障功能障礙;黏液填充IEG,維持局部腸屏障功能。
【部分圖文】:

圖像,黏液,杯狀細胞


64山東大學學報(醫(yī)學版)53卷12期散在吸收細胞之間,縱切面呈酒杯狀(圖1A三角形),橫截面呈靶征(圖1B)。按照Watson分級[11]方法,Ⅰ級正常,表現(xiàn)為單個上皮細胞脫落,無熒光素滲出;Ⅱ級功能性缺損,表現(xiàn)為單個細胞脫落伴熒光素滲出(圖1A箭頭);Ⅲ級結(jié)構(gòu)性缺損,表現(xiàn)為大片細胞脫落,伴上皮熒光素滲漏(圖1C、D箭頭)。UC患者回腸末端較對照組有更多的Ⅱ、Ⅲ級IEG結(jié)構(gòu)。圖1CLE下回腸末端IEG圖像A、B:對照組回腸末端杯狀細胞及IEG圖像(三角形示杯狀細胞,箭頭示IEG);C、D:UC患者回腸末端的IEG圖像(箭頭)。Fig.1RepresentativeconfocalimagesofIEGinterminalileumA,B:RepresentativeimagesofIEGandgobletcellsinterminalileumofcontrols(Tri-angleindicatedgobletcells,andarrowindicatedIEG);C,D:RepresentativeimagesofIEGinterminalileumofUCpatients(arrows).2.2黏液填充IEGMuc2是黏液的主要組成成分,免疫熒光方法檢測Muc2表達,熒光顯微鏡下顯示紅色,細胞核顯示藍色(圖2)。免疫組化法檢測Muc2表達,光學顯微鏡下呈棕褐色沉淀物(圖3A、3B)。光學顯微鏡下觀察回腸末端組織AB-PAS染色情況,紫色示腸道黏液成分(圖3C、3D)。通過以上方法,觀察到IEG處有黏蛋白填充,UC患者較對照組則有更多的IEG未被黏液填充。2.3回腸末端局部腸屏障功能的評價用WatsonII/IIIIEG缺損率評估局部腸屏障功能,兩組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001);進而分析了杯狀細胞數(shù)目占上皮細胞數(shù)目的百分比,兩組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001)。對上皮微缺損率與杯狀細胞比率進行Spearman秩相關(guān)分析,兩組之間呈負相關(guān)(r=-0.74,P<0.001)。在熒光顯微鏡下觀察IEG未被黏液封堵率情況,兩組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001)。見表1。表1UC組與對照組

黏液,熒光顯微鏡,箭頭,腸屏障功能


周曉艷,等.黏液填充在消化道上皮微缺損及腸屏障功能中的作用65圖2熒光顯微鏡下觀察到IEG由黏液填充(×400)A、B、C:箭頭示IEG處有Muc2表達,三角形示IEG處沒有Muc2表達(UC患者回腸末端);D、E、F:箭頭示IEG處有Muc2表達(正;啬c末端)。Fig.2IEGwasfilledwithmucusunderfluorescencemicroscopy(×400)A,BandC:ArrowsindicatedMuc2expressioninIEG,andtriangleindicatedthatnomucusfilledtheIEGinter-minalileumofUCpatients;D,EandF:ArrowsindicatedMuc2expressioninIEGofterminalileumofcontrols.圖3光學顯微鏡下觀察到IEG由黏液填充(×400)A、B:箭頭示IEG處有黏液填充,三角形示IEG處沒有黏蛋白填充;C、D:箭頭示IEG(無核結(jié)構(gòu))處有黏液填充。Fig.3IEGwasfilledwithmucusunderlightmicroscopy(×400)A,B:ArrowsindicatedthatIEGwasfilledwithmucus,andtriangleindicatedthatnomucusfilledtheIEG;C,D:ArrowsindicatedIEG(seedlessstructure)wasfilledwithmucus.

黏液,箭頭,腸屏障功能,黏蛋白


周曉艷,等.黏液填充在消化道上皮微缺損及腸屏障功能中的作用65圖2熒光顯微鏡下觀察到IEG由黏液填充(×400)A、B、C:箭頭示IEG處有Muc2表達,三角形示IEG處沒有Muc2表達(UC患者回腸末端);D、E、F:箭頭示IEG處有Muc2表達(正;啬c末端)。Fig.2IEGwasfilledwithmucusunderfluorescencemicroscopy(×400)A,BandC:ArrowsindicatedMuc2expressioninIEG,andtriangleindicatedthatnomucusfilledtheIEGinter-minalileumofUCpatients;D,EandF:ArrowsindicatedMuc2expressioninIEGofterminalileumofcontrols.圖3光學顯微鏡下觀察到IEG由黏液填充(×400)A、B:箭頭示IEG處有黏液填充,三角形示IEG處沒有黏蛋白填充;C、D:箭頭示IEG(無核結(jié)構(gòu))處有黏液填充。Fig.3IEGwasfilledwithmucusunderlightmicroscopy(×400)A,B:ArrowsindicatedthatIEGwasfilledwithmucus,andtriangleindicatedthatnomucusfilledtheIEG;C,D:ArrowsindicatedIEG(seedlessstructure)wasfilledwithmucus.

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本文編號:2818677

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