目的：炎癥性腸病(inflammatory bowel disease, IBD)包括潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis, UC)和克羅恩病(Crohn's disease, CD),是一種慢性的腸道炎癥性疾病,在臨床上具有不易治愈、反復發(fā)作的特點,嚴重影響患者的生活質(zhì)量。盡管其發(fā)病原因不明,局部黏膜的過度免疫反應在炎癥過程的起始和加劇中起重要作用,尤其是細胞因子在免疫反應中有直接作用。白細胞介素35(interlukin 35, IL-35)是新發(fā)現(xiàn)的炎癥抑制性因子,為IL-12家族中的最新成員,屬于I型細胞因子超家族成員,IL-35具有IL-12家族的典型結(jié)構(gòu)特點,是由IL-12家族α鏈(IL-12a)p35和β鏈Ebi3兩個亞基通過二硫鍵共價相連組成的異源二聚體蛋白。既往研究表明人體組織中IL-35并不呈組成性表達,但是在炎癥刺激的情況下可表達與調(diào)節(jié)性T細胞及活化漿細胞。IL-35可通過促進調(diào)節(jié)性T細胞活化和抑制Th17細胞增殖而發(fā)揮生物學效應。本研究擬通過測定健康人和炎癥性腸病患者血清及腸黏膜IL-35的表達水平,探討IL-35與炎癥性腸病的可能關系。方法：在山東大學齊魯醫(yī)院2013.9～2014.4根據(jù)腹痛、腹瀉、血便等臨床癥狀和結(jié)腸鏡檢查及病理結(jié)果,納入20例UC患者(其中輕度者6例,中度與重度者各7例)、7例CD患者。UC嚴重程度根據(jù)Mayo評分,而CD則根據(jù)CD活動指數(shù)評分(CDAI)進行評估。此外,納入因息肉復查的15例非IBD患者作為對照。取實驗組和對照組禁食后血液,離心后取上清,用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清IL-35的表達水平。行結(jié)腸鏡檢查時,每位納入對象均取3塊活檢標本,其中1塊標本石蠟包埋進行染色分析,另外2塊存于-80℃用于后續(xù)RNA和蛋白質(zhì)的提取及測定,即用免疫組化、qRT-PCR和Western Blot對IL-35在腸粘膜組織中的表達進行定位、定量分析,比較并進行統(tǒng)計學分析。結(jié)果：血清IL-35的表達：UC組及CD組,血清IL-35的表達水平均顯著低于對照組,在UC組輕度與中度、重度患者中表達存在統(tǒng)計學差異,但中度與重度之間無明顯差異。而且IL-35含量水平均隨著病情加重而降低,與嚴重度呈中度負相關(R=-0.636,P0.05)。腸黏膜IL-35的表達：免疫組化法檢測對照組結(jié)腸黏膜不表達IL-35, UC及CD患者病變腸黏膜中的IL-35表達水平均明顯升高,患者染色陽性細胞位于炎癥浸潤的間質(zhì),上皮細胞無表達,主要表達于單核淋巴細胞。qRT-PCR檢測UC及CD患者病變腸黏膜中Ebi3及IL-12p35表達水平明顯高于正常黏膜,差異有統(tǒng)計學意義。Ebi3及IL-12p35表達水平在UC和CD組的表達無統(tǒng)計學意義。而且兩者表達與UC活動性沒有明顯相關關系。Western Blot結(jié)果顯示IL-35在UC組與CD組表達水平高于對照組,且UC組比CD組表達水平高,差異有統(tǒng)計學意義。中重度UC表達水平比輕度略高,但差異無明顯統(tǒng)計學意義。結(jié)論：IL-35在IBD患者中血清的含量降低、在病變腸粘膜組織中表達升高可能表示抗炎不足在IBD機制中起一定作用,而且血清中含量與UC活動性有關,有望成為IBD新的檢測和治療靶點。但本研究包括病例較少,仍需要大規(guī)模的實驗研究完善IL-35的作用機制。
【學位單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2015
【中圖分類】：R574.62
【部分圖文】：

（ｅ）邐（ｆ）逡逑圖３．１１心３５在廝黏膜中的表達３和６：忙－３５在１１仁患者結(jié)腸粘膜中的表達；￡：和（１：忙－３５在〔０逡逑患者巧腸粘膜的表化：ｅ和ｆ：忙－３５么對照巧結(jié)腸粘膜的表化（ａｃｅＸ２００；邋ｂｄｆＸ４００；紅逡逑色箭頭示染色ｍ性細胞）。忙－３５主要表達Ｔ間質(zhì)單核細胞細胞（如紅箭頭所示），上皮細胞逡逑無表達。逡逑２２逡逑

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【參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 張耀源;張孔;;支氣管哮喘患者血清白細胞介素35水平變化及意義[J];中山大學學報(醫(yī)學科學版);2012年03期

本文編號：2812800