目的：炎癥性腸病(inflammatory bowel disease, IBD)包括潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis, UC)和克羅恩病(Crohn's disease, CD),是一種慢性的腸道炎癥性疾病,在臨床上具有不易治愈、反復(fù)發(fā)作的特點(diǎn),嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。盡管其發(fā)病原因不明,局部黏膜的過(guò)度免疫反應(yīng)在炎癥過(guò)程的起始和加劇中起重要作用,尤其是細(xì)胞因子在免疫反應(yīng)中有直接作用。白細(xì)胞介素35(interlukin 35, IL-35)是新發(fā)現(xiàn)的炎癥抑制性因子,為IL-12家族中的最新成員,屬于I型細(xì)胞因子超家族成員,IL-35具有IL-12家族的典型結(jié)構(gòu)特點(diǎn),是由IL-12家族α鏈(IL-12a)p35和β鏈Ebi3兩個(gè)亞基通過(guò)二硫鍵共價(jià)相連組成的異源二聚體蛋白。既往研究表明人體組織中IL-35并不呈組成性表達(dá),但是在炎癥刺激的情況下可表達(dá)與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及活化漿細(xì)胞。IL-35可通過(guò)促進(jìn)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞活化和抑制Th17細(xì)胞增殖而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。本研究擬通過(guò)測(cè)定健康人和炎癥性腸病患者血清及腸黏膜IL-35的表達(dá)水平,探討IL-35與炎癥性腸病的可能關(guān)系。方法：在山東大學(xué)齊魯醫(yī)院2013.9～2014.4根據(jù)腹痛、腹瀉、血便等臨床癥狀和結(jié)腸鏡檢查及病理結(jié)果,納入20例UC患者(其中輕度者6例,中度與重度者各7例)、7例CD患者。UC嚴(yán)重程度根據(jù)Mayo評(píng)分,而CD則根據(jù)CD活動(dòng)指數(shù)評(píng)分(CDAI)進(jìn)行評(píng)估。此外,納入因息肉復(fù)查的15例非IBD患者作為對(duì)照。取實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組禁食后血液,離心后取上清,用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清IL-35的表達(dá)水平。行結(jié)腸鏡檢查時(shí),每位納入對(duì)象均取3塊活檢標(biāo)本,其中1塊標(biāo)本石蠟包埋進(jìn)行染色分析,另外2塊存于-80℃用于后續(xù)RNA和蛋白質(zhì)的提取及測(cè)定,即用免疫組化、qRT-PCR和Western Blot對(duì)IL-35在腸粘膜組織中的表達(dá)進(jìn)行定位、定量分析,比較并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果：血清IL-35的表達(dá)：UC組及CD組,血清IL-35的表達(dá)水平均顯著低于對(duì)照組,在UC組輕度與中度、重度患者中表達(dá)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但中度與重度之間無(wú)明顯差異。而且IL-35含量水平均隨著病情加重而降低,與嚴(yán)重度呈中度負(fù)相關(guān)(R=-0.636,P0.05)。腸黏膜IL-35的表達(dá)：免疫組化法檢測(cè)對(duì)照組結(jié)腸黏膜不表達(dá)IL-35, UC及CD患者病變腸黏膜中的IL-35表達(dá)水平均明顯升高,患者染色陽(yáng)性細(xì)胞位于炎癥浸潤(rùn)的間質(zhì),上皮細(xì)胞無(wú)表達(dá),主要表達(dá)于單核淋巴細(xì)胞。qRT-PCR檢測(cè)UC及CD患者病變腸黏膜中Ebi3及IL-12p35表達(dá)水平明顯高于正常黏膜,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Ebi3及IL-12p35表達(dá)水平在UC和CD組的表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而且兩者表達(dá)與UC活動(dòng)性沒(méi)有明顯相關(guān)關(guān)系。Western Blot結(jié)果顯示IL-35在UC組與CD組表達(dá)水平高于對(duì)照組,且UC組比CD組表達(dá)水平高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。中重度UC表達(dá)水平比輕度略高,但差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：IL-35在IBD患者中血清的含量降低、在病變腸粘膜組織中表達(dá)升高可能表示抗炎不足在IBD機(jī)制中起一定作用,而且血清中含量與UC活動(dòng)性有關(guān),有望成為IBD新的檢測(cè)和治療靶點(diǎn)。但本研究包括病例較少,仍需要大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)研究完善IL-35的作用機(jī)制。
【學(xué)位單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2015
【中圖分類】：R574.62
【部分圖文】：

（ｅ）邐（ｆ）逡逑圖３．１１心３５在廝黏膜中的表達(dá)３和６：忙－３５在１１仁患者結(jié)腸粘膜中的表達(dá)；￡：和（１：忙－３５在〔０逡逑患者巧腸粘膜的表化：ｅ和ｆ：忙－３５么對(duì)照巧結(jié)腸粘膜的表化（ａｃｅＸ２００；邋ｂｄｆＸ４００；紅逡逑色箭頭示染色ｍ性細(xì)胞）。忙－３５主要表達(dá)Ｔ間質(zhì)單核細(xì)胞細(xì)胞（如紅箭頭所示），上皮細(xì)胞逡逑無(wú)表達(dá)。逡逑２２逡逑

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【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 張耀源;張孔;;支氣管哮喘患者血清白細(xì)胞介素35水平變化及意義[J];中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版);2012年03期

本文編號(hào)：2812800