研究背景;肝臟再生過程是一個(gè)多步驟、多因子、涉及到多種信號(hào)的精確而有序的復(fù)雜過程,而血管形成是所有器官包括肝臟再生的基本條件。肝竇是特化的毛細(xì)血管網(wǎng),肝再生過程中,肝血竇的重構(gòu)涉及到血管內(nèi)皮細(xì)胞及其它細(xì)胞的分裂增殖。內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移、粘著、排列以至最后形成完整的肝血竇必定涉及到肝竇內(nèi)皮細(xì)胞質(zhì)膜蛋白質(zhì)的變化。從膜蛋白的角度入手,檢測和鑒定與肝臟再生和血管形成相關(guān)的蛋白,對(duì)揭示肝再生的機(jī)制是一個(gè)有益的嘗試。 研究目的;運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)的方法觀察肝臟再生過程中肝竇內(nèi)皮細(xì)胞質(zhì)膜蛋白質(zhì)組學(xué)的動(dòng)態(tài)變化。對(duì)那些在肝臟再生過程中發(fā)生變化的蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定,以期尋找在肝血竇重構(gòu)時(shí)內(nèi)皮細(xì)胞表面差異表達(dá)的質(zhì)膜蛋白質(zhì),為進(jìn)一步研究肝臟再生機(jī)制奠定基礎(chǔ)。 研究方法;以肝大部切除術(shù)制備大鼠肝臟再生模型。術(shù)后3天后對(duì)肝大部切除術(shù)組和假手術(shù)組的大鼠肝臟進(jìn)行活體硅膠灌注,分離質(zhì)膜。提取質(zhì)膜蛋白進(jìn)行16-BAC/SDS-PAGE電泳系統(tǒng)分離,將差異表達(dá)蛋白點(diǎn)進(jìn)行膠內(nèi)消化,HCT質(zhì)譜儀鑒定,數(shù)據(jù)庫搜索確定差異蛋白的性質(zhì)。 研究結(jié)果;高倍電鏡分析表明硅膠分離肝竇狀隙內(nèi)皮細(xì)胞質(zhì)膜是有效的。而質(zhì)譜鑒定的結(jié)果也顯示16BAC/SDS-PAGE電泳系統(tǒng)分離膜蛋白質(zhì)的成功。經(jīng)質(zhì)譜鑒定發(fā)現(xiàn)11個(gè)表達(dá)上調(diào)的蛋白,8個(gè)下調(diào)的蛋白。這些蛋白質(zhì)的上調(diào)或下調(diào)響應(yīng)了肝竇狀隙中正在發(fā)生的變化。 結(jié)論;有多個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞膜蛋白或與膜相關(guān)的蛋白響應(yīng)了肝竇狀隙的重構(gòu)。差異蛋白質(zhì)組學(xué)是揭示復(fù)雜生理過程機(jī)制的有效方法。
【學(xué)位單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2007
【中圖分類】：R575

【參考文獻(xiàn)】

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