發(fā)布時(shí)間：2020-08-31 18:18

　　 第一部分急性水腫型及急性壞死型胰腺炎大鼠模型的制作 目的建立簡(jiǎn)便、易復(fù)制、重復(fù)性好的急性水腫型胰腺炎(AEP)和急性壞死型胰腺炎(ANP)模型,為實(shí)驗(yàn)的第二部分和第三部分提供實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。方法30只健康雄性SD大鼠,隨機(jī)分為正常對(duì)照組、AEP組、ANP組,每組10只。AEP組腹腔注射雨蛙素,40ug/kg,共2次,第一次注射后12小時(shí)造模成功。ANP組腹腔注射精氨酸,2g/kg,共2次,第一次注射后24小時(shí)造模成功。正常對(duì)照組,給予同等劑量的生理鹽水腹腔注射。各組大鼠于實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)檢測(cè)血漿淀粉酶(AMY)、胰腺/體重比值以及胰腺組織病理學(xué)變化。結(jié)果AEP組和ANP組大鼠AMY均較對(duì)照組明顯升高,ANP組升高更明顯;胰腺/體重比值也顯著升高,ANP組胰腺重量增加更明顯,與AEP組比較也有顯著增加;兩組的胰腺組織病理檢查顯示,AEP組大鼠胰腺組織表現(xiàn)為明顯水腫,胰腺葉間隔、小葉間隔間隙增大,炎性細(xì)胞浸潤(rùn),腺泡水腫明顯;ANP組大鼠胰腺葉間隔、小葉間隔間隙增大,炎性細(xì)胞浸潤(rùn),腺泡水腫,部分壞死,小葉結(jié)構(gòu)破壞,可見實(shí)質(zhì)內(nèi)出血。結(jié)論雨蛙素40ug/kg兩次和精氨酸2g/kg兩次腹腔注射,可以誘發(fā)大鼠AEP和ANP,此兩種動(dòng)物模型操作簡(jiǎn)便,容易復(fù)制,重復(fù)性好,模型形成迅速。 第二部分組織腎素-血管緊張素系統(tǒng)在不同類型急性胰腺炎發(fā)病機(jī)制中的作用 目的觀察組織腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)在AEP和ANP中的變化,組織RAS與細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β以及RAS與急性胰腺炎(AP)嚴(yán)重程度的關(guān)系,進(jìn)一步闡明組織RAS在AP發(fā)病機(jī)制中的作用。方法30只健康雄性SD大鼠,隨機(jī)分為正常對(duì)照組、AEP組、ANP組,每組10只。采用雨蛙素腹腔注射誘導(dǎo)AEP模型,精氨酸腹腔注射誘導(dǎo)ANP模型,各組于造模成功后處死大鼠,觀察大鼠血漿血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)、腎素、AMY、TNF-α、IL-1β水平變化,檢測(cè)胰腺/體重比值、胰腺組織病理變化,血管緊張素原和AngⅡ受體AT1在胰腺組織內(nèi)的免疫組化定位,RT-PCR法檢測(cè)胰腺組織局部血管緊張素原、腎素及AngⅡ受體AT1mRNA水平。結(jié)果AEP組和ANP組大鼠血漿AMY、TNF-α、IL-1β、AngⅡ、腎素水平均明顯升高,在ANP組中升高更明顯,統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異顯著(p0.05)。AEP組和ANP組大鼠血管緊張素原、腎素、AT1 mRNA水平較對(duì)照組明顯升高,ANP組較AEP組也略有升高。血漿AngⅡ水平與血漿TNF-α、IL-1β水平和胰腺組織病理評(píng)分有一定的相關(guān)性,血漿TNF-α、IL-1β水平和胰腺組織病理評(píng)分也有一定的相關(guān)性。血管緊張素原和AngⅡ受體AT1在胰腺組織內(nèi)主要定位于胰腺血管壁和導(dǎo)管壁。結(jié)論在胰腺組織中存在自己獨(dú)立的RAS系統(tǒng),在AP發(fā)病時(shí)被激活,并進(jìn)一步激活TNF-α、IL-1β,共同參與了AP的發(fā)病機(jī)制。 第三部分絡(luò)沙坦對(duì)急性壞死性胰腺炎及合并肺損傷的防治作用 目的研究AngⅡ受體AT1拮抗劑絡(luò)沙坦(Losartan)對(duì)ANP大鼠是否有保護(hù)作用。方法40只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組,正常對(duì)照組、ANP組、Losartan預(yù)防組,Losartan治療組。采用大劑量精氨酸腹腔注射誘導(dǎo)ANP模型,預(yù)防組于造模前90分鐘給予Losartan 200ug/kg,兩次,每次間隔1小時(shí),治療組于造模后30分鐘給予Losartan 200ug/kg,兩次,每次間隔1小時(shí)。各組于造模后24小時(shí)處死大鼠,觀察大鼠血漿AngⅡ、腎素、AMY、TNF-α、IL-1β水平變化,檢測(cè)肺組織髓過氧化物酶(MPO)、肺濕/干重比值、胰腺/體重比值、胰腺和肺組織病理變化,RT-PCR法檢測(cè)胰腺組織血管緊張素原、腎素及AngⅡ受體AT1 mRNA的水平。結(jié)果ANP組AngⅡ、腎素、AMY、TNF-α、IL-1β、胰腺/體重比值、肺組織MPO、肺濕/干重比值均較對(duì)照組明顯升高;胰腺組織血管緊張素原、腎素及受體AT1 mRNA的水平也較對(duì)照組升高,Losartan預(yù)防和治療組血漿AMY、TNF-α、IL-1β、肺組織MPO、肺濕/干重比值、胰腺/體重比值較ANP組明顯下降,胰腺和肺組織病理?yè)p傷明顯減輕。血漿AngⅡ、腎素水平和胰腺組織血管緊張素原、腎素及AngⅡ受體AT1 mRNA的水平較ANP組變化不明顯。結(jié)論Losartan對(duì)血漿AngⅡ、腎素水平及胰腺組織血管緊張素原、腎素及受體AT1 mRNA水平無明顯影響,可以減少TNF-α、IL-1β的產(chǎn)生,對(duì)ANP及合并的肺損傷具有保護(hù)作用。
【學(xué)位單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2007
【中圖分類】：R576
【部分圖文】：

三、 各組大鼠組織病理學(xué)表現(xiàn)大體病理變化：AEP組大鼠可見腹腔少量積液，胰腺明顯水腫。ANP組大鼠可見腹腔內(nèi)較多積液，胰腺明顯水腫，散在出血斑，可見局部皂化斑，見圖3.1～3.3。圖3.1 正常對(duì)照組胰腺大體病理 圖3.2 AEP組大鼠胰腺大體病理表現(xiàn)

ANP組 10 9.33±1.76*p<0.01 *與AEP組比 p<0.05對(duì)照組AEP組ANP組10.008.006.004.002.000.00圖2 三組大鼠胰腺/體重比值(g/kg)三、 各組大鼠組織病理學(xué)表現(xiàn)大體病理變化：AEP組大鼠可見腹腔少量積液，胰腺明顯水腫。ANP組大鼠可見腹腔內(nèi)較多積液，胰腺明顯水腫，散在出血斑，可見局部皂化斑，見圖3.1～3.3。

圖3.3 ANP組大鼠胰腺大體病理表現(xiàn)AEP組大鼠胰腺組織表現(xiàn)為明顯水腫, 胰腺潤(rùn)，腺泡水腫明顯。ANP組大鼠胰腺葉間隔泡水腫，部分壞死，小葉結(jié)構(gòu)破壞，可見實(shí)大鼠胰腺組織病理評(píng)分有顯著性差異。見表表4. 三組大鼠胰腺組織病理評(píng)分鼠數(shù)(只) 10 10 10 00

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2809161