【摘要】：目的:建立小鼠實(shí)驗(yàn)性潰瘍性結(jié)腸炎(UC)模型,研究子宮內(nèi)膜再生細(xì)胞控制UC發(fā)生發(fā)展的作用機(jī)理。方法:建立DSS誘導(dǎo)的BALB/c小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型,觀察造模期間實(shí)驗(yàn)小鼠的臨床病理表現(xiàn),對(duì)該模型進(jìn)行評(píng)估。ERC干預(yù)實(shí)驗(yàn)分三組進(jìn)行(正常組:自由飲用不含DSS的飲用水;未治療組:自由飲用4%DSS溶液+經(jīng)靜脈注射PBS緩沖液;ERC組:自由飲用4%DSS溶液+靜脈注射以PBS緩沖液重懸的ERC),第7天,未治療組和ERC組改為正常飲水。第2、4、6、8天,ERC組經(jīng)靜脈注射ERCs(1×106/0.25ml/只)。實(shí)驗(yàn)期間每天觀察并記錄各組小鼠的體重、大便性狀及血便特征,并進(jìn)行疾病活動(dòng)指數(shù)評(píng)分(DAI)。第14天,處死全部小鼠,測量結(jié)腸長度;采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測脾臟CD3+CD8+、CD4+CD25+、CD11c+MHC-Ⅱ+細(xì)胞數(shù)量;采用熒光實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測結(jié)腸組織IL-2、TNF-α、IL-4、IL-10的mRNA轉(zhuǎn)錄水平;通過免疫組織化學(xué)方法檢測結(jié)腸組織Mac-1(CD11b)、MPO的蛋白表達(dá)水平。分析上述指標(biāo)的變化,評(píng)價(jià)ERC對(duì)小鼠UC模型腸道修復(fù)的促進(jìn)作用。結(jié)果:DSS損傷的小鼠出現(xiàn)體重下降、血便、結(jié)腸黏膜潰瘍性改變和結(jié)腸縮短等嚴(yán)重結(jié)腸炎表現(xiàn),其病理學(xué)改變包括黏膜固有層中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞浸潤,腺窩扭曲變形,黏膜下層淋巴濾泡形成,固有基層增厚。注射ERC的小鼠結(jié)腸炎癥得到緩解,與未治療組比較,ERC組脾臟CD3+CD8+細(xì)胞數(shù)量明顯減少(P0.01)、CD4+CD25+細(xì)胞數(shù)量明顯增加(P0.01)、CD11c+MHC-Ⅱ+細(xì)胞數(shù)量顯著減少(P0.01);結(jié)腸組織內(nèi)IL-2、TNF-α的轉(zhuǎn)錄水平降低(P0.01),IL-4、IL-10的mRNA轉(zhuǎn)錄水平升高(P0.01);結(jié)腸組織中的Mac-1(CD11b)、MPO蛋白表達(dá)水平均明顯降低(P0.01);結(jié)論:1.成功建立小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型,證實(shí)ERC能夠有效控制該模型UC的發(fā)生發(fā)展。2.ERC可能是通過抑制樹突狀細(xì)胞的成熟分化、T細(xì)胞的增殖以及增進(jìn)Treg細(xì)胞的產(chǎn)生等機(jī)制,發(fā)揮其免疫抑制作用。3.ERC可以通過對(duì)抑炎因子及促炎因子的調(diào)控達(dá)到控制UC的作用。4.ERC有望成為臨床治療UC的新方法。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R574.62

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本文編號(hào)：2804795