【摘要】：非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是指除外酒精和其它明確的損害肝臟的因素，以彌漫性肝細胞大泡性脂肪變?yōu)橹饕卣鞯呐R床病理綜合癥,包括非酒精性單純性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎及其相關性肝纖維化、肝硬化，甚至肝癌,與胰島素抵抗和遺傳易感性等關系密切。最近的研究表明巨噬細胞的表型轉換可能在NAFLD中起到了重要作用,參與了NAFLD的演進。 巨噬細胞有兩種不同的表型狀態(tài),分別為經典活化型即M1型,替代活化型M2型。M1型亞群巨噬細胞被IFN-γ、GM-CSF、TNF所誘導，M1型亞群巨噬細胞通常被認為是正向作用的效應細胞，是一種炎癥介質。M2型亞群巨噬細胞主要通過IL-4、IL-10、IL-13、慢性病毒感染及皮質醇激素等誘導刺激，主要參與寄生蟲感染、免疫、炎癥下調、組織修復、凋亡小體及誘導血管再生中發(fā)揮重要作用。目前有研究認為巨噬細胞的不同表型狀態(tài)與NAFLD有著密切關系，既往研究主要關注了巨噬細胞在肝臟組織中的作用，很少關注皮下脂肪組織及網膜脂肪組織中的巨噬細胞在NAFLD中的作用。 臨床資料及方法 病例選擇： 1.選取2012年4～10月在我院診斷的NAFLD伴單純性膽囊結石及非NAFLD伴單純性膽囊結石，且年齡為18～60歲的患者納入分析。明確為NAFLD的患者27例（NAFLD組），男10例，女17例；排除NAFLD及其他一切肝病,且肝功正常的單純性膽囊結石患者28例（非NAFLD組），男5例，女23例。 2.收集患者臨床資料:登記患者姓名、住院號、年齡、性別、BMI、腹圍。所有納入研究患者均簽署知情同意書,醫(yī)院倫理中心備案。肝組織標本、皮下脂肪組織及網膜脂肪組織在獲得患者知情同意后通過腹腔鏡手術獲得,皮下脂肪組織從上腹部的腹壁脂肪組織獲得，網膜脂肪從鄰近膽囊的大網膜獲得。 3.實驗室檢測:所有研究對象均于禁食飲水12h后，于入院次日清晨抽取肘靜脈血。采用全自動生化分析儀測定如下血液學指標：血糖、丙氨酸轉氨酶（ALT）、天冬氨酸轉氨酶（AST）、總膽紅素（TB）、胰島素、甘油三酯（TG）、游離脂肪酸（FFA）,并計算胰島素抵抗指數(HOMA-IR)。 4.病理學診斷標準：肝組織行HE染色，皮下脂肪組織、網膜脂肪組織分別行HE染色及免疫組化檢測�？笴D68免疫組織化學標記巨噬細胞，抗CD11C和抗CD206分別標記M1亞群巨噬細胞及M2亞群巨噬細胞。對肝組織切片的診斷采用NAFLD活動度評分（NAS）。 5. ELISA檢測血清中IL-6、MCP-1的值并分析血清中IL-6與MCP-1和皮下、網膜巨噬細胞、M1亞群巨噬細胞、M2亞群巨噬細胞的相關性。 6.利用SPSS19及Prism5軟件，對皮下脂肪組織、網膜脂肪組織的CD68、CD11C及CD206陽性細胞與肝臟脂肪變、NAS評分進行相關性分析。 結果 1. NAFLD組與非NAFLD患者比較，在年齡、腹圍、血糖、ALT、AST、TB、FFA差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)；而BMI、胰島素、TG、胰島素抵抗指數(HOMA-IR,即空腹血糖×空腹胰島素/22.5)較非NAFLD組患者升高(P0.05)。 2. NAFLD組與非NAFLD組比較，皮下脂肪組織及網膜脂肪組織CD68、CD11C及CD206陽性染色數量均較非NAFLD組顯著增加(P0.05)。 3.兩組患者皮下脂肪組織及網膜脂肪組織巨噬細胞、M1亞群巨噬細胞及M2亞群細胞巨噬細胞數量比較，NAFLD組皮下脂肪組織及網膜脂肪組織的巨噬細胞多于非NAFLD組,NAFLD組皮下脂肪組織巨噬細胞數量的均值為（26.5510.74）個，網膜脂肪組織巨噬細胞數量的均值為（41.5010.47）個；非NAFLD組皮下脂肪組織巨噬細胞數量的均值為（15.575.67）個，網膜脂肪組織巨噬細胞數量的均值為（29.9311.49）個,兩組比較差異有顯著統(tǒng)計學意義(P0.01)。NAFLD組皮下脂肪組織M1亞群巨噬細胞數量的均值為（9.934.51）個，網膜脂肪組織M1亞群巨噬細胞數量的均值為（14.523.62）個；非NAFLD組皮下脂肪組織M1亞群巨噬細胞數量的均值為（4.181.98）個，網膜脂肪組織M1亞群巨噬細胞數量的均值為（8.174.39）個,兩組比較差異有顯著統(tǒng)計學意義(P0.01)。NAFLD組皮下脂肪組織M2亞群巨噬細胞數量的均值為（15.226.74）個，非NAFLD組皮下脂肪組織M2亞群巨噬細胞數量的均值為（9.603.55）個，兩組比較差異有顯著統(tǒng)計學意義(P0.01)。NAFLD組網膜脂肪組織M2亞群巨噬細胞數量的均值為（21.1511.25）個,非NAFLD組網膜脂肪組織M2亞群巨噬細胞數量的均值為（19.868.47）個,兩組比較差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）。NAFLD組皮下脂肪組織M1/M2的均值為0.660.23，網膜脂肪組織M1/M2的均值為0.590.27；非NAFLD組皮下脂肪組織M1/M2的均值為0.450.16，網膜脂肪組織M1/M2的均值為0.420.20,兩組比較差異有顯著統(tǒng)計學意義(P0.01)。 4.在NAFLD組中M1亞群巨噬細胞、M2亞群巨噬細胞的數量與NAS評分的相關性，對NAFLD患者的肝臟損害進行NAS評分,27例NAFLD患者中,1例為7分,4例為6分,7例為5分,3例為4分,7例為3分,4例為2分,1例為1分。在NAFLD患者的皮下脂肪組織中CD68陽性細胞、CD11C陽性細胞及CD206陽性細胞與NAS評分呈正相關(r=0.496,r=0.589, r=0.657, P0.01)。NAFLD患者的網膜脂肪組織中,CD68陽性細胞及CD11C陽性細胞與NAS評分呈正相關（r=0.426,P0.05；r=0.465,P0.01),CD206與NAS評分無明顯相關(r=0.32,P0.05)。但皮下及網膜脂肪組織的CD11C/CD206陽性細胞與NAS評分無明顯相關(r=0.242,r=0.168, P0.05)。 5. NAFLD組與非NAFLD組比較,NAFLD組IL-6的水平高于非NAFLD組,但差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),非NAFLD組MCP-1高于NAFLD組,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。在NAFLD組血清IL-6與皮下及網膜脂肪組織中巨噬細胞、M1亞群巨噬細胞及M2亞群巨噬細胞無明顯相關(r=0.082,r=-0.158,r=-0.010,r=0.212, r=0.019, r=0.277,P0.05);血清MCP-1與皮下及網膜脂肪組織中巨噬細胞、M1亞群巨噬細胞及M2亞群巨噬細胞無明顯相關(r=0.006,r=0.084,r=0.007, r=-0.189, r=-0.059, r=-0.179, P0.05)。血清中IL-6及MCP-1與NAS評分無明顯相關(r=-0.166,r=0.077, P0.05)。 結論 1. NAFLD患者的BMI、胰島素、TG、胰島素抵抗指數較非NAFLD組顯著升高，提示NAFLD患者與胰島素抵抗密切相關。 2.在NAFLD患者的皮下脂肪組織及網膜脂肪組織的巨噬細胞數量、M1亞群巨噬細胞數量、M2亞群巨噬細胞的數量及M1/M2都同時增加,以M1亞群巨噬細胞增加更為明顯，說明皮下脂肪組織及網膜脂肪組織中的巨噬細胞表型轉換可能參與了NAFLD的疾病進展。 3. NAFLD患者無論皮下脂肪還是網膜脂肪的巨噬細胞都與肝臟脂肪變、炎癥、纖維化密切相關，因皮下脂肪更易取得，臨床上可否將皮下脂肪的巨噬細胞及各亞型數量作為預測NAFLD嚴重程度的指標需進一步研究。 4.血清中巨噬細胞相關的炎癥因子IL-6及MCP-1不能很好的反映NAFLD患者肝臟的脂肪變、炎癥及纖維化程度。
【學位授予單位】：第三軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R575.5

【參考文獻】

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本文編號：2798381