【摘要】：目的：研究雙歧桿菌對新生鼠NEC模型中新生鼠的癥狀及腸道組織形態(tài)學(xué)影響。為在新生兒NEC治療中使用雙歧桿菌提供基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究依據(jù)。 方法： 1、實驗動物及分組：生后24小時內(nèi)的36只新生鼠隨機分為3組，每組12只，分別為：對照組、實驗組、治療組。對照組：不添加雙歧桿菌，不進行NEC造模；實驗組：進行NEC造模；治療組：在進行NEC造模的同時添加雙歧桿菌。 2、雙歧桿菌的添加方法：在鼠配方奶中添加雙歧桿菌，濃度為1*10~8cfu/ml,劑量為2次/日。 3、NEC造模方法：對進行造模的新生鼠進行人工喂養(yǎng)（6次/日），100%氮氣缺氧90秒，4℃冷刺激10分鐘，每日2次，連續(xù)滿3天。 4、組織獲�。航＝Y(jié)束后立即處死小鼠，在距盲腸0.5cm處，取遠端回腸組織長度約0.5cm置于中性甲醛中固定，石蠟包埋制作病理切片。 5、實驗檢測指標：各組新生鼠實驗前后的生長發(fā)育指標變化；新生鼠發(fā)生NEC的癥狀比較；NEC的發(fā)病率；H.E染色下腸道粘膜組織病理學(xué)評分。 6、統(tǒng)計學(xué)方法：采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS17.0進行統(tǒng)計，計量資料以平均值±標準差表示，各組間的比較采用方差分析，發(fā)生率比較采用Χ2檢驗，P0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果： 1.實驗組體重增長低于對照組及治療組（㧟0.28±0.05VS2.16±0.28VS0.56±0.07），三組間體重變化具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。實驗組身長增長（0.35±0.14）低于另外兩組，治療組身長增長（0.71±0.02）低于對照組（1.23±0.06）而高于實驗組，組間比較具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 2.實驗組發(fā)生腹脹、便血等NEC臨床癥狀發(fā)生率為50%，治療組為20%，對照組則無NEC臨床癥狀，實驗組高于治療組，兩者間比較（χ~2=2.00）具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 3.實驗組NEC發(fā)病率為58.33%，對照組為0%，治療組為33.33%，治療組發(fā)病率低于實驗組，比較具有統(tǒng)計學(xué)差異。（P0.05）三組腸道粘膜組織病理學(xué)平均評分分別為：實驗組為1.75±0.75，治療組為0.83±0.71，對照組為0�？梢妼嶒灲M的病理學(xué)損傷最嚴重（P0.05）。 結(jié)論： 1.雙歧桿菌可有效減輕新生鼠NEC造成的生長發(fā)育的遲緩。 2.使用雙歧桿菌可減輕新生鼠NEC引起的腹脹，便血的癥狀。 3.添加雙歧桿菌可減少新生鼠NEC的發(fā)病率，減輕其病理學(xué)變化的嚴重程度。 目的： 通過熒光定量PCR方法檢測添加雙歧桿菌影響新生鼠壞死性小腸結(jié)腸炎的腸道粘黏膜組織中TLR2、TLR4、TLR9的表達量。為了解雙歧桿菌對NEC的保護作用機制提供分子生物學(xué)研究。 方法： 使用第一部分實驗各組獲得的新生鼠的回盲部腸道組織進行熒光定量PCR檢測組織中TLR2、TLR4、TLR9mRNA的表達量。采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS17.0進行統(tǒng)計，P0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果： 以對照組為參照，TLR2在實驗組中的表達量是它的0.48倍，治療組是它的2.49，治療組表達量高于實驗組；TLR4在實驗組中表達量為對照組的3.48倍，治療組中的表達量是其1.25倍，實驗組表達量高于治療組；TLR9表達量是對照組的0.47倍，治療組中表達量是對照組的4.00倍，治療組表達高于實驗組。以上各組間比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論： 雙歧桿菌減少NEC發(fā)病率及損傷可能與其能增加TLR2、TLR9表達，而降低TLR4的表達相關(guān)。 目的： 研究雙歧桿菌在新生鼠壞死性小腸結(jié)腸炎病理損傷發(fā)生前對TLR2、TLR4、TLR9的表達量影響，為應(yīng)用雙歧桿菌預(yù)防NEC疾病的發(fā)病提供分子生物學(xué)依據(jù)。 方法： 45只出生24小時內(nèi)的新生鼠隨機分為三組，分別是對照組（n=15）、實驗組（n=15）、治療組（n=15）。各組處理方式與第一部分一致，分別于NEC造模過程中的24小時、48小時、72小時中每組處死5只新生鼠。用qRT-PCR方法測量獲取腸道組織中TLR2、TLR4、TLR9的表達量。比較在不同時間段三中基因表達量的變化過程。采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS17.0進行統(tǒng)計，P0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果： 各組TLR2表達在24小時內(nèi)的差異變化不大（P0.05）；48小時后實驗組的TLR2mRNA是對照組的1.07倍，治療組是3.75倍，治療組高于實驗組（P0.05）；72小時后可見治療組TLR2表達量（對照組的5.97倍）高于實驗組（對照組的0.72倍）。在24小時內(nèi)TLR4的表達量在三組間無明顯差異（P0.05）；48小時后實驗組表達量是對照組的3.45倍，而治療組是對照組的1.33倍，實驗組表達量高于另兩組；在72小時后實驗組TLR4表達量是對照組的8倍遠高于治療組（對照組的2.02倍），兩者比較具有統(tǒng)計學(xué)意義。TLR9的表達在24小時內(nèi)三組無明顯差異（P0.05）；48小時后治療組增高，表達量是對照組的3.44倍高于另外兩組的表達量，組間比較有顯著統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）；72小時后治療組的TLR9表達量繼續(xù)增高，（對照組的5.56倍）與實驗組和對照組表達量相比有差異（P0.05）。 結(jié)論： 添加雙歧桿菌可預(yù)防NEC的發(fā)生，可能與其能在該病的病理損傷早期增加TLR2、TLR9表達,降低TLR4表達有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：廣州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R574.6

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前3條

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本文編號：2793422