【摘要】： 【背景】 我國(guó)是乙型肝炎病毒(HBV)感染的高發(fā)區(qū)。人群中乙型肝炎病毒(HBV)感染率較高且絕大多數(shù)為慢性化,是導(dǎo)致慢性肝炎、肝硬化和肝癌的主要原因,嚴(yán)重威脅人們健康。持久而高水平的HBV復(fù)制是病情發(fā)展為肝硬化及肝癌的危險(xiǎn)因素�？共《臼侵委熉砸腋蔚年P(guān)鍵已成為全球的共識(shí)。雖然近年病毒性肝炎的抗病毒藥物治療方面取得了令人欣喜的進(jìn)展,但目前臨床上應(yīng)用的抗病毒藥物的不良反應(yīng)較大,且獲得的療效“非常有限”。最大限度地長(zhǎng)期抑制或消除HBV,是治療慢乙肝的關(guān)鍵。聯(lián)合當(dāng)前使用的抗病毒藥物,免疫治療有可能持久抑制病毒復(fù)制,從而有希望清除cccDNA最終能獲得完全應(yīng)答,因此,免疫調(diào)節(jié)治療是慢性乙型肝炎治療的重要手段之一。但目前尚缺乏有效的乙型肝炎特異性免疫治療方法。乙肝免疫調(diào)節(jié)治療需要進(jìn)一步研究。慢性HBV感染時(shí),患者對(duì)HBV的特異性細(xì)胞免疫低下,免疫耐受,T細(xì)胞功能低下,改善T細(xì)胞功能可作為探索慢乙肝抗病毒免疫治療的一個(gè)方向。病毒重疊感染發(fā)生干擾的現(xiàn)象已被證實(shí),利用這種現(xiàn)象,有研究者將減毒麻疹疫苗接種慢性HBV感染者,觀察到部分患者血清HBV載量下降,IL-2、IFN-r增高,提示乙肝病毒下降的原因可能與麻疹病毒激活的特異細(xì)胞免疫時(shí)產(chǎn)生的多種細(xì)胞因子對(duì)HBV-DNA復(fù)制有關(guān)。麻疹病毒重疊感染對(duì)慢性HBV感染者免疫作用值得進(jìn)行深入研究。 【目的】本研究對(duì)慢性HBV攜帶者自然重疊感染麻疹后血清HBV載量進(jìn)行觀察,并以慢性HBV攜帶者、麻疹患者作為對(duì)照,旨在了解慢性HBV攜帶者重疊感染麻疹后血清HBV-DNA載量的變化,并通過三組細(xì)胞因子比較,進(jìn)一步探索麻疹病毒感染誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)在乙型肝炎免疫清除病毒中發(fā)揮的作用。 【資料和方法】 1.23例慢性HBV攜帶者重疊感染麻疹患者(重疊感染組),來(lái)源于2006-2008年廣州市疾病控制中心麻疹流行病學(xué)調(diào)查收集的標(biāo)本,HBV-DNA陽(yáng)性,HBsAg(+),麻疹抗體(+),其中男13例,女10例,年齡5～14歲;27例慢性HBV攜帶患者(HBV感染組),來(lái)源于2006年12月～2008年7月我院門診,其中男15例,女12例,年齡6～15歲;27例麻疹患者(麻疹組),來(lái)源于2006-2008年廣州市疾病控制中心麻疹流行病學(xué)調(diào)查收集的標(biāo)本,其中男16例,女11例,年齡5～12歲。采集靜脈血5ml,離心分離血清,- 20℃保存待測(cè)。 2.熒光定量PCR檢測(cè)HBV-DNA:HBV-DNA熒光定量PCR檢測(cè)試劑購(gòu)自中山大學(xué)達(dá)安基因公司,操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行,使用儀器為PE-5700熒光定量PCR儀,由計(jì)算機(jī)軟件SmartcyclerⅡ分析計(jì)算定量結(jié)果。報(bào)告結(jié)論以IU /ml表示,并作對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后進(jìn)行計(jì)算,病例均以 500IU/ml為陰性結(jié)果。 3.Luminex液相蛋白芯片定量檢測(cè)細(xì)胞因子:7種細(xì)胞因子Luminex液相蛋白芯片試劑盒購(gòu)自美國(guó)Panomic公司,操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行,使用儀器為L(zhǎng)uminex200分析儀(美國(guó)Panomic公司),由計(jì)算機(jī)軟件Luminex100 intergrated system 2.3分析計(jì)算定量結(jié)果。 4.酶聯(lián)免疫吸附分析法定性檢測(cè)HBeAg、HBsAg:人電化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫吸附分析法(Elisa)乙型肝炎e抗原試劑盒購(gòu)自夏門新創(chuàng)公司,操作及結(jié)果判定嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行,使用儀器為Alisei全自動(dòng)酶免分析儀。 5.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:采用SPSS 11.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,HBV DNA因定量所測(cè)得值個(gè)體差異較大即離散度較大呈偏態(tài)分布,故對(duì)其進(jìn)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換,取其對(duì)數(shù)值進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析。采用單因素方差分析,組間兩兩比較q檢驗(yàn),并對(duì)部分?jǐn)?shù)據(jù)進(jìn)行雙變量相關(guān)性分析。以P0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 【結(jié)果】 1.血清HBV-DNA載量對(duì)數(shù)值(IU/ml):重疊感染組(5.3579±1.4813),慢性HBV組(7.2549±0.9853),兩組比較差異具有顯著性(P0.05),重疊感染組水平顯著低于HBV組。 2.三組IFN-r、TNF-a水平有差別,(P0.05)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,重疊感染組水平最高,其次為MV組,最后是HBV組。兩兩比較,重疊感染組水平均與其余兩組有差別(P0.05)且均高于其余兩組。 3.三組血清IL-4,IL-5水平有差別,(P0.01)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,重疊感染組水平最低,其次為MV組,最高是HBV組。兩兩比較,重疊感染組水平均與其余兩組有差別(P0.05)且均低于其余兩組。 4.三組IL-2、RANTES及IL-10的水平無(wú)差別,(P0.05)。 5.HBV-DNA載量與各細(xì)胞因子的關(guān)系:HBV-DNA載量水平與IL-4,IL-5水平均呈正相關(guān)關(guān)系(P0.05), IL-4(r=0.61)、IL-5(r=0.55)。HBV-DNA載量水平與IFN-r、TNF-a水平均呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(P0.05), IFN-r(r=-0.71)、TNF-a(r=-0.57)。HBV-DNA定量與IL-2、RANTES水平無(wú)相關(guān)性(P0.05)。 6.重疊感染組HBeAg陽(yáng)性率18/23,78%;慢性HBV組HBeAg陽(yáng)性率22/27,81%,兩組無(wú)差別,(P0.05)。 【結(jié)論】 1.重疊感染組血清HBV-DNA載量水平明顯低于慢性HBV組,麻疹病毒重疊感染對(duì)血清HBV載量有一定的抑制作用。 2.重疊感染組血清與對(duì)照組比較,Th1型細(xì)胞因子IFN-r、TNF-a水平升高,Th2型細(xì)胞因子IL-4,IL-5水平降低提示慢性HBV攜帶者重疊感染麻疹后,Th1型細(xì)胞應(yīng)答增強(qiáng)。 3.重疊感染組和慢性HBV組HBV-DNA載量水平與IL-4,IL-5水平均呈正相關(guān),與IFN-r、TNF-a水平均呈負(fù)相關(guān)提示慢性HBV攜帶者重疊感染麻疹后HBV-DNA復(fù)制減弱與Thl型細(xì)胞應(yīng)答增強(qiáng)、Th2型細(xì)胞應(yīng)答減弱有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：廣州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R512.62
【圖文】：

TNF-a標(biāo)曲

IL-4標(biāo)曲

HBV-DNA標(biāo)曲

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2787064