【摘要】： 背景與目的:熱休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)是一組廣泛存在于自然界原核、真核細(xì)胞中,高度保守的細(xì)胞保護(hù)性蛋白,對細(xì)胞的生長、發(fā)育、分化及凋亡具有調(diào)節(jié)作用。當(dāng)機(jī)體受到高溫、炎癥、缺血、腫瘤等不良刺激,尤其是高溫刺激時,會大量表達(dá)HSPs以維持細(xì)胞形態(tài)和功能。近年來一些研究表明,高熱刺激(42℃熱水浴、電熱板加熱)、冷水浴(23℃)或藥物(異丙腎上腺素、亞砷酸鹽或BRX-220)預(yù)處理后可誘導(dǎo)動物胰腺內(nèi)大量表達(dá)HSP70和(或)HSP60,從而減輕雨蛙素、牛黃膽酸鈉或精氨酸等誘導(dǎo)的大鼠或小鼠胰腺急性炎癥反應(yīng),改善急性胰腺炎所致的胰腺形態(tài)學(xué)改變,降低血清淀粉酶及TNF-α、IL-1、IL-6等炎性細(xì)胞因子水平。但也有一部分研究結(jié)果顯示誘導(dǎo)HSP70高表達(dá)對急性胰腺炎的保護(hù)作用并不明顯。因此目前關(guān)于HSP70對于急性胰腺炎的保護(hù)作用仍無明確結(jié)論,而且之前研究中所用誘導(dǎo)HSPs表達(dá)的方法在臨床實(shí)際應(yīng)用中不易實(shí)現(xiàn)。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑谟谔接憸厣睇}水(42℃)腹腔灌洗這種新的誘導(dǎo)方法對大鼠胰腺內(nèi)HSP70表達(dá)的影響,對雨蛙素誘導(dǎo)的大鼠急性胰腺炎的保護(hù)作用及可能存在的機(jī)制。 方法:雄性Wistar大鼠,250g左右,72只,隨機(jī)分為7組。A組(n=6)腹腔麻醉后行假手術(shù),12小時后處死,取胰腺組織用Western blot方法測HSP70。B組(n=36)再隨機(jī)分成6個亞組,每組6只大鼠,B1組-B6組分別在42℃溫生理鹽水腹腔灌洗30分鐘后的第0、3、6、12、24和36小時處死,取胰腺組織用Western blot方法測HSP70。C組(n=6)禁食12小時后給予腹腔注射常溫生理鹽水四次,0.25ml/次,每次間隔1小時,于最后一次注射后的第6小時處死。D組(n=6)和E組(n=6)禁食12小時后按20ug/kg劑量給予腹腔注射雨蛙素四次,每次間隔1小時。分別于注射完最后一次后的第6小時和12小時處死。F組和G組先給予溫生理鹽水腹腔灌洗30分鐘,12小時后按D組和E組的方法腹腔注射雨蛙素,并分別于注射完最后一次雨蛙素后的第6小時和12小時處死。C、D、E、F和G五組大鼠處死后均留取血清測淀粉酶、TNF-α、IL-6及TAP,留取胰腺組織行HE染色,觀察組織形態(tài)學(xué)改變。 結(jié)果:和A組相比,B組大鼠胰腺內(nèi)HSP70表達(dá)明顯升高。灌洗后0小時到12小時HSP70表達(dá)逐漸升高,灌洗后12小時表達(dá)達(dá)到峰值,之后逐漸減少。和C組相比,D、E兩組大鼠血清淀粉酶、TNF-α和IL-6水平明顯升高。組織形態(tài)學(xué)上,胰腺炎相關(guān)病理改變(水腫、炎癥浸潤、腺泡壞死、出血和脂肪壞死)評分顯著升高。F組較D組相比血清淀粉酶、TNF-α和IL-6濃度下降明顯,且胰腺炎相關(guān)病理改變明顯減輕。G組和E組相比,僅有血清IL-6濃度下降較明顯,而組織形態(tài)學(xué)上水腫和炎癥浸潤改善不明顯。D組和E組血清TAP濃度雖較C組和相應(yīng)的F組和G組偏高,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論:溫生理鹽水腹腔灌洗可誘導(dǎo)大鼠胰腺內(nèi)HSP70表達(dá),表達(dá)的量隨著時間的改變而不同,腹腔灌洗后3小時HSP70表達(dá)即有明顯增加,到12小時達(dá)到峰值,之后逐漸下降。溫生理鹽水腹腔灌洗預(yù)處理對雨蛙素誘導(dǎo)的大鼠急性胰腺炎具有保護(hù)作用,可改善胰腺組織形態(tài)學(xué)改變,降低血清淀粉酶和炎性細(xì)胞因子水平。此保護(hù)作用可能與其誘導(dǎo)胰腺內(nèi)HSP70高表達(dá)有關(guān),推測可能的機(jī)制是誘導(dǎo)胰腺內(nèi)高表達(dá)HSP70可抑制急性胰腺炎發(fā)病過程中炎性細(xì)胞因子的釋放,從而減輕胰腺炎癥反應(yīng)。
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R576
【圖文】：

westernblot所測胰腺內(nèi)HSP7O表達(dá)情況

胰腺的腺泡細(xì)胞壞死、出血和脂肪壞死這兩項(xiàng)上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，水腫和炎癥細(xì)胞浸潤的減輕無明顯差異，但組織形態(tài)學(xué)總體評分仍較E組明顯降低。(見表2.2、圖2.6、圖2.7)表2.2胰腺組織形態(tài)學(xué)改變評分分fll水腫月泉泡壞夕匕C全 }}1.125士 0.3770.0()()士0.000D全日 2.833士0.246*2.000士0.522*E組 1.917士0.515*1.125士0.43;弓*F組 2.00()土 0.5220.917士0.195G鄉(xiāng)日 2.167士 0.4920.417士。一95‘出血_和脂肪壞死 0.00()士0.0()() 1.250士0.54理* 1.542士0.838* 0.583士0.359「‘O一25士 0.226‘’炎癥浸潤 0.167士0.2161.:375士0.569* 0.958士0.620* 0.8:玉3士0.326’ 0.792士0.3:;4J總分 1.292士0.512 7.458士1.010木 5.542士 1.777* 4.333士0.889 3.500士0.769，’注:“*”與C組相比，P<0.01，“a”與D組相比，P<0.01，“b”與E組相比，P< 0.01。聶‘。·。。評分 8.00C組D組E組分組F組G組圖2.6各組大鼠胰腺組織形態(tài)學(xué)總體評分

胰腺的腺泡細(xì)胞壞死、出血和脂肪壞死這兩項(xiàng)上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，水腫和炎癥細(xì)胞浸潤的減輕無明顯差異，但組織形態(tài)學(xué)總體評分仍較E組明顯降低。(見表2.2、圖2.6、圖2.7)表2.2胰腺組織形態(tài)學(xué)改變評分分fll水腫月泉泡壞夕匕C全 }}1.125士 0.3770.0()()士0.000D全日 2.833士0.246*2.000士0.522*E組 1.917士0.515*1.125士0.43;弓*F組 2.00()土 0.5220.917士0.195G鄉(xiāng)日 2.167士 0.4920.417士。一95‘出血_和脂肪壞死 0.00()士0.0()() 1.250士0.54理* 1.542士0.838* 0.583士0.359「‘O一25士 0.226‘’炎癥浸潤 0.167士0.2161.:375士0.569* 0.958士0.620* 0.8:玉3士0.326’ 0.792士0.3:;4J總分 1.292士0.512 7.458士1.010木 5.542士 1.777* 4.333士0.889 3.500士0.769，’注:“*”與C組相比，P<0.01，“a”與D組相比，P<0.01，“b”與E組相比，P< 0.01。聶‘。·。。評分 8.00C組D組E組分組F組G組圖2.6各組大鼠胰腺組織形態(tài)學(xué)總體評分

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 陳學(xué)清,姜泊,宋于剛,智發(fā)朝,鞏蘭波;早期生長反應(yīng)因子-1和組織因子在大鼠胰腺炎組織中的表達(dá)[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2004年11期

2 程書榜,王成友,徐敏;溫生理鹽水持續(xù)腹腔灌洗預(yù)處理對大鼠急性胰腺炎的影響[J];肝膽外科雜志;2003年01期

3 肖衛(wèi)民,蔣碧梅,石永忠,劉梅冬,唐道林,夏珂,王慷慨,張華莉,鄧恭華,肖獻(xiàn)忠;從凋亡信號通路探討熱休克蛋白保護(hù)過氧化氫所致心肌細(xì)胞凋亡的機(jī)制[J];中國動脈硬化雜志;2003年04期

本文編號：2785633