【摘要】：目的 動(dòng)態(tài)觀察大鼠肝纖維化過(guò)程中Dicer酶在肝臟中的表達(dá)情況,初步探討Dicer與肝纖維化病變進(jìn)展的關(guān)系及其可能的機(jī)制。 方法 1.建立40%CCl4誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化模型:49只雄性SD大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組,其中實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組都被分為1周組、2周組、3周組、4周組、5周組、6周組和7周組。實(shí)驗(yàn)組給予40%CCl4橄欖油溶液1ml/kg腹腔注射,每周1次,對(duì)照組給予同等濃度的生理鹽水和橄欖油混懸液腹腔注射。分別于造模第1周至第7周末處死相對(duì)應(yīng)的實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組大鼠,采集血清標(biāo)本及肝臟組織標(biāo)本。 2.對(duì)肝組織進(jìn)行常規(guī)HE染色及觀察大鼠肝臟組織病理變化情況,評(píng)價(jià)大鼠肝纖維化程度。 3.檢測(cè)血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase,ALT)及天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate aminotransferase,AST)濃度,評(píng)價(jià)肝細(xì)胞功能狀態(tài)。 4.采用實(shí)時(shí)定量反轉(zhuǎn)錄PCR (Realtime RT-PCR)方法檢測(cè)正常對(duì)照組及模型組各只大鼠肝臟組織中Dicer的表達(dá)。 結(jié)果 1.實(shí)驗(yàn)組大鼠血清中ALT及AST的水平從第二周開(kāi)始明顯升高,與對(duì)照組大鼠相比差異有顯著性(P0.05)。 2.隨著造模時(shí)間的延長(zhǎng),對(duì)照組大鼠肝臟小葉結(jié)構(gòu)、肝細(xì)胞形態(tài)大小等無(wú)明顯改變,未見(jiàn)明顯炎癥細(xì)胞浸潤(rùn);對(duì)實(shí)驗(yàn)組大鼠,隨著CCl4作用的時(shí)間和劑量逐漸增加,大鼠肝纖維化程度逐步加重。 3.在大鼠肝纖維化的過(guò)程中,實(shí)驗(yàn)組大鼠肝臟組織中的Dicer表達(dá)水平從第四周開(kāi)始升高,在第五周時(shí)達(dá)到峰值,第六周時(shí)Dicer的表達(dá)水平又開(kāi)始下調(diào),根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)論,其差異是有顯著性的(P 0.05)。其中,實(shí)驗(yàn)組大鼠在第五周時(shí)肝臟組織中Dicer的表達(dá)明顯高于正常對(duì)照組織,差異有顯著性(P 0.05),在其他各時(shí)間點(diǎn),實(shí)驗(yàn)組大鼠肝臟組織中的Dicer表達(dá)水平與對(duì)照組相比無(wú)明顯差異(P0.05)。另外,對(duì)于對(duì)照組大鼠,在各時(shí)間點(diǎn)肝臟組織中Dicer的表達(dá)水平無(wú)明顯差異(P0.05)。 4. Spearman秩相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析表明在模型組大鼠肝纖維化過(guò)程中,肝臟組織中Dicer的表達(dá)水平與大鼠體重和肝功能指標(biāo)ALT、AST之間無(wú)顯著相關(guān)性(P0.05)。 結(jié)論 1.在大鼠肝纖維化過(guò)程中,肝臟組織中Dicer的表達(dá)水平與大鼠體重和肝功能指標(biāo)ALT、AST之間無(wú)顯著相關(guān)性。 2.在CCl4誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化形成過(guò)程中,Dicer的表達(dá)水平呈一過(guò)性升高,提示RNA干擾系統(tǒng)可能參與了肝硬化的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R575.2

【參考文獻(xiàn)】

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1 燕飛,成卓敏;RNA干擾機(jī)制研究進(jìn)展[J];遺傳;2005年01期

本文編號(hào)：2785465