發(fā)布時(shí)間：2020-08-03 15:04

【摘要】： 目的:研究H.pylori感染與胃黏膜細(xì)胞Foxp3、TGF-β1、IL-10表達(dá)的關(guān)系,為支持H.pylori通過誘導(dǎo)Foxp3、TGF-β1及IL-10表達(dá),抑制機(jī)體免疫功能,參與免疫逃逸提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法: 1.胃鏡下經(jīng)滅菌活檢鉗取入選病例胃黏膜組織,經(jīng)H.pylori分離培養(yǎng)鑒定或特異性PCR聯(lián)合尿素酶試驗(yàn)將110例入選者分為H.pylori感染陽性組與陰性組,依據(jù)胃鏡與病理檢查分為胃癌組和非胃癌組。 2.采用原位雜交技術(shù)檢測(cè)各組胃竇部黏膜活檢組織中Foxp3mRNA、TGF-β1mRNA的表達(dá)情況;利用ELISA法檢測(cè)胃體部黏膜組織IL-10蛋白的含量。 3.建立H.pylori感染胃黏膜上皮細(xì)胞株的體外模型。利用ELISA法檢測(cè)感染細(xì)胞培養(yǎng)上清中TGF-β1、IL-10的含量。 結(jié)果: 1.非胃癌組H.pylori感染率76.3%,胃癌組H.pylori感染率63.3%,總感染率為72.7%。 2. Foxp3mRNA在非胃癌組陽性表達(dá)44例,陰性表達(dá)36例,在胃癌組陽性表達(dá)22例,陰性表達(dá)8例,兩組間表達(dá)率差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);在H.pylori感染陽性組陽性表達(dá)率67.5%,陰性組陽性表達(dá)率為43.3%,兩組間表達(dá)率差別有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。 3. TGF-β1mRNA在非胃癌組陽性表達(dá)51例,陰性表達(dá)29例,在胃癌組陽性表達(dá)22例,陰性表達(dá)8例,兩組之間表達(dá)率差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);在H.pylori感染陽性組表達(dá)率為75.0%,陰性組陽性表達(dá)率為43.3%,兩組間表達(dá)率差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。Foxp3mRNA和TGF-β1mRNA表達(dá)的相關(guān)系數(shù)為0.872(p0.01),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 4. IL-10在H.pylori感染陽性組為3.03±0.88pg/ml; H.pylori感染陰性組為0.82±0.26 pg/ml。H.pylori陽性組IL-10蛋白含量較H.pylori陰性組明顯增高(p0.01)。 5. H.pylori體外感染模型細(xì)胞培養(yǎng)上清TGF-β1的含量于共培養(yǎng)后迅速開始增高,2h達(dá)高峰,高含量一直維持到12h;IL-10含量于共培養(yǎng)后1h時(shí)開始增高,1.5h達(dá)高峰,隨后迅速下降,2h時(shí)已降至共培養(yǎng)初始水平,低水平一直維持到12h。 結(jié)論: 1.山西地區(qū)有消化系統(tǒng)癥狀病人的H.pylori感染率72.7%。 2. H.pylori感染陽性組胃黏膜活檢組織Foxp3 mRNA表達(dá)水平高于陰性組,提示H.pylori感染的胃黏膜局部聚集較多的Foxp3陽性表達(dá)的Treg細(xì)胞,參與胃黏膜局部免疫功能的抑制。 3. H.pylori感染陽性組胃黏膜活檢組織TGF-β1mRNA與IL-10蛋白表達(dá)水平均高于陰性組,H.pylori感染模型細(xì)胞培養(yǎng)上清TGF-β1與IL-10表達(dá)水平均高于對(duì)照組,體內(nèi)外結(jié)果的一致性表明:H.pylori感染可誘導(dǎo)胃黏膜細(xì)胞局部TGF-β1與IL-10的分泌。 4. Foxp3mRNA和TGF-β1mRNA的表達(dá)可能存在相關(guān)性。 本研究提示,H.pylori感染機(jī)體后,可誘導(dǎo)高表達(dá)Foxp3的Treg細(xì)胞、TGF-β1與IL-10表達(dá)上調(diào),抑制機(jī)體胃黏膜局部免疫功能,為H.pylori的持續(xù)性感染提供了微環(huán)境。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R573
【圖文】：

10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 M圖 1 H.pylori-cagA-PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果1：陽性對(duì)照；5：陰性對(duì)照；3、4、9、10：陽性標(biāo)本；2、6、7、8：陰性標(biāo)本；M：markerbp

10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 M圖 1 H.pylori-cagA-PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果1：陽性對(duì)照；5：陰性對(duì)照；3、4、9、10：陽性標(biāo)本；2、6、7、8：陰性標(biāo)本；M：markerbp

11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 M圖 3 H.pylori-vacA PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果1：陽性對(duì)照；5：陰性對(duì)照；2、3、9、11：陽性標(biāo)本；4、6、7、8、10：陰性標(biāo)本；M：marker2.4 H.pylori 感染鑒定參照 H.pylori 感染的科研診斷標(biāo)準(zhǔn)[13]，H.pylori 培養(yǎng)陽性或下列四項(xiàng)斷為 H.pylori 感染：(1)H.pylori 形態(tài)學(xué)(涂片、組織學(xué)染色或免疫組化染色)(2)尿素酶依賴性試驗(yàn)(RUT、13C 或 14C—UBT)(3)血清學(xué)試驗(yàn)(ELISA 或免疫印跡試驗(yàn)等)(4)特異的 PCR 檢測(cè)位雜交技術(shù)檢測(cè)胃竇部黏膜組織中 Foxp3mRNA、 TGF-β1mRNA3.1 石蠟切片制備:(1)固定：取-70℃冰箱保存的胃竇部黏膜組織，加入含 0.1％DEP.1MPBS（PH7.0-7.6）固定液，固定 1h；

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 高瑞紅;姚紅;郝素珍;;幾種培養(yǎng)幽門螺桿菌方法的比較[J];山西醫(yī)藥雜志;2009年03期

2 張萬岱;幽門螺桿菌若干問題的共識(shí)意見[J];中華內(nèi)科雜志;2000年05期

本文編號(hào)：2779799