【摘要】： 高遷移率族蛋白B 1(High mobility group box protein 1, HMGB1)是人們早在30年前就發(fā)現(xiàn)的一種非組蛋白核內(nèi)結(jié)構(gòu)蛋白。起初人們認(rèn)為它在細(xì)胞核內(nèi)能與DNA結(jié)合,對DNA重組、修復(fù)、復(fù)制和基因轉(zhuǎn)錄起重要作用。近年研究發(fā)現(xiàn):HMGB1不僅在細(xì)胞核內(nèi)發(fā)揮作用,它被釋放到細(xì)胞外時,可作為一種有效的炎癥介質(zhì)誘發(fā)和促進(jìn)炎癥反應(yīng)。 業(yè)已證明,內(nèi)毒素血癥時,革蘭氏陰性細(xì)菌所釋放的脂多糖(LPS)及前炎癥因子TNF-α、IL-1、γ-IFN等的釋放可刺激誘導(dǎo)單核/巨噬細(xì)胞主動分泌HMGB1;壞死組織細(xì)胞也可以被動釋放HMGB1。HMGB1細(xì)胞外釋放能進(jìn)一步引發(fā)炎癥反應(yīng)。HMGB1基因敲除動物(HMGB-/-)的壞死細(xì)胞,因不釋放HMGB1,促炎作用明顯降低。胞外的HMGB1介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的機(jī)制雖還不完全清楚。但是研究已發(fā)現(xiàn)它可作為晚期細(xì)胞因子參與信號傳導(dǎo);通過進(jìn)一步引發(fā)產(chǎn)生TNF-α等多種細(xì)胞因子和血管粘附分子、促炎細(xì)胞趨化作用、削弱腸上皮細(xì)胞的功能等啟動炎癥反應(yīng)。HMGB1與凋亡細(xì)胞的染色質(zhì)緊密結(jié)合,不被釋放細(xì)胞外,即使凋亡細(xì)胞被巨噬細(xì)胞清除時HMGB1也不被釋放,從而避免炎癥反應(yīng)發(fā)生。值得指出的是, HMGB1與其它已知的促炎細(xì)胞因子相比具有出現(xiàn)晚、且持續(xù)時間長的特點(diǎn)�？笻MGB1抗體或HMGB1拮抗物以及抑制其釋放藥物都能有效緩解實(shí)驗(yàn)動物炎癥反應(yīng),并使其存活率增加。這些發(fā)現(xiàn)引起了國內(nèi)外學(xué)者的極大關(guān)注。普遍認(rèn)為HMGB1有可能成為抗炎和防治組織病理損傷重要靶點(diǎn)。 Fang等發(fā)現(xiàn)即使沒有原發(fā)性肝損傷發(fā)生,全身敗血癥和內(nèi)毒素血癥也可引發(fā)肝組織中HMGB1表達(dá)也增加,并可能參與肝損傷過程。各種原發(fā)因素引起的肝損傷時,往往并發(fā)腸源性內(nèi)毒素血癥;枯否細(xì)胞(Kupffer cells, KCs)占肝臟總體積的2.1%,是體內(nèi)巨噬細(xì)胞的最大群體。原發(fā)損傷和腸源性內(nèi)毒素血癥能誘導(dǎo)肝內(nèi)枯否細(xì)胞激活或過度激活,釋放腫瘤壞死因子(TNF-α)等炎性介質(zhì)。這些因素均是誘導(dǎo)HMGB1表達(dá)釋放的重要因素。為此,我們推測在急性肝損傷時,肝內(nèi)HMGB1的釋放也會增多和介導(dǎo)肝損傷甚至肝衰竭。本研究分以下三部分對其進(jìn)行了研究: 第一部分HMGB1在肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和枯否細(xì)胞中的分布及誘導(dǎo)表達(dá)和釋放 HMGB1在正常和經(jīng)誘導(dǎo)后的肝組織中的表達(dá)水平,特別是在肝細(xì)胞未發(fā)生壞死時,肝內(nèi)枯否細(xì)胞能否主動釋放HMGB1關(guān)系到其參與炎癥反應(yīng)的作用。但以往對其在正常肝組織中的分布的研究結(jié)果不相一致;而且尚未見關(guān)于枯否細(xì)胞表達(dá)和釋放的報(bào)道。因此本課題首先對上述問題進(jìn)行研究。 實(shí)驗(yàn)一HMGB1和A-box基因的克隆、原核表達(dá)、純化及活性鑒定 重組HMGB1和Abox蛋白是研究判別其作用的金標(biāo)準(zhǔn)物資,故我們首先對其進(jìn)行純化提取。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號】：R575


本文編號：2778492