【摘要】： 目的:構建高脂飲食大鼠非酒精性脂肪肝病(nonalcoholicfatty liver disease,NAFLD)模型,探討胰島素抵抗(insulinresistance,IR)、脂質(zhì)代謝、炎癥反應在NAFLD發(fā)病機制中的作用;觀察非諾貝特對NAFLD大鼠IR、脂質(zhì)代謝、炎癥反應的影響及對NAFLD的療效,研究其作用機制,為臨床上非諾貝特治療NAFLD提供理論依據(jù)。 方法:將40只雄性SD大鼠隨機分為兩組:正常飲食組16只,予以普通飼料喂養(yǎng);高脂飲食組24只,予以高脂飼料(普通飼料+14%豬油+1%膽固醇)喂養(yǎng)。第8周末兩組分別隨機處死8只鑒定成模,稱為8周正常飲食組(normal diet group 8weeks,NG8w)和8周高脂飲食組(high fat diet group 8 weeks,HG8w)。第9周開始將高脂飲食組剩下的大鼠隨機分為2組:12周高脂飲食組(high fat diet group 12 weeks,HG12w)8只及非諾貝特組(Fenofibrate group,FG)8只,正常飲食組剩下的8只稱為12周正常飲食組(normal diet group 12 weeks,NG12w),此三組于實驗第12周末處死。FG于實驗第9-12周以非諾貝特20mg/kg·d灌胃;NG12W和HG12W于實驗第9-12周以生理鹽水2mL/d灌胃。所有大鼠處死前隔夜禁食并稱重,每只大鼠經(jīng)門靜脈取血,離心分離血清,用于測定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(Aspartateaminotransferase,AST)、甘油三酯(trigly geride,TG)、總膽固醇(total cholesterol,TC)、空腹血糖(fasting bloodglucose,FBS)、血清胰島素(fasting insulin,FIns)、游離脂肪酸(free fatty acids,FFAs)、腫瘤壞死因子-α(tumornecrosis factor-α,TNF-α),計算空腹胰島素抵抗指數(shù)(fastinginsulin resistance index,FIRI);游離肝臟并稱重,計算肝指數(shù);取小塊肝組織剪碎,倒入玻璃勻漿器中勻漿,制成10%的肝組織勻漿,用于測定肝勻漿FFAs、TG、TC含量;取大鼠肝右葉組織病理切片,HE染色,評價肝臟脂肪變性程度。RT-PCR半定量方法測定過氧化物酶體增殖物激活受體α(peroxisomeproliferator activated receptor alpha,PPARα)mRNA表達水平。 結果:(1)與同期正常飲食組比較,HG8w和HG12w組大鼠體重、肝指數(shù)、FIns、FIRI、血清ALT、AST、TG、TC、FFAs、TNF-α水平及肝勻漿TG、TC、FFAs均升高,比較均有統(tǒng)計學差異(均p＜0.05);FG組大鼠的體重、肝指數(shù)、FIns、FIRI、血清ALT、AST、TC、FFAs、TNF-α水平及肝勻漿TG、TC、FFAs均較HG12w明顯降低、但仍較NG12w升高,比較均有統(tǒng)計學差異(均p＜0.05),FG組的血清TG水平低于HG12w組,比較有統(tǒng)計學差異(p＜0.05),但與NG12w組比較無統(tǒng)計學差異;各組大鼠血糖沒有明顯變化(均p＞0.05);(2)與同期正常飲食組比較,HG8w和HG12w組大鼠PPARαmRNA的表達水平明顯降低,HG12w比HG8w表達水平更低,而FG組大鼠的肝臟PPARαmRNA的表達水平較HG12w組高,而較NG12w組低,比較均有統(tǒng)計學差異(均p＜0.05);(3)肝組織切片HE染色光鏡下可見,HG8w大鼠肝臟出現(xiàn)大泡性脂肪變性,HG12w大鼠肝臟大泡性脂肪變性呈彌漫性、伴有炎癥細胞浸潤,FG組大鼠肝小葉內(nèi)仍可見肝細胞呈大泡性脂肪變性及氣球樣變,但脂肪變性程度較HG12w減輕,偶見炎癥細胞浸潤;(4) PPARαmRNA表達與反映IR、脂質(zhì)代謝、炎癥反應的各項指標呈負相關。 結論: 1.持續(xù)高脂飼料喂養(yǎng)SD大鼠8周可成功構建NAFLD模型。 2.非諾貝特對SD大鼠NAFLD有部分治療作用,為臨床應用該藥治療NAFLD提供了理論依據(jù)。 3.非諾貝特通過促進大鼠肝細胞PPARα的表達來發(fā)揮調(diào)脂、抗炎、改善IR的作用,從而影響NAFLD的發(fā)生發(fā)展。
【學位授予單位】：中南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2009
【分類號】：R575
【圖文】：

FG于實驗第9一12周以非諾貝特20mg瓜g·d灌胃;NG12W和HG12W于實驗第9一12周以生理鹽水ZmUd灌胃。每周測量各只大鼠的體重并記錄，精確記錄每天飼料的投入量及剩余量，并根據(jù)體重調(diào)整藥物用量。見圖1一1:圖1一1實驗流程圖

【參考文獻】

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本文編號：2777538