【摘要】：目的：探討荔枝核總黃酮（total flavone of Litchi ChinensisSonn,TFL）對膽管阻塞型肝纖維化大鼠肝組織Toll樣受體2(toll-likereceptor2,TLR2)、Toll樣受體4（toll-like receptor4,TLR4）蛋白表達的影響及其抗肝纖維化可能的作用機制。方法：雄性SD大鼠80只，隨機分為假手術(shù)組、膽總管結(jié)扎組、膽總管結(jié)扎+TFL小劑量（100mg·kg-1·d-1）組（以下簡稱TFL小劑量組）和膽總管結(jié)扎+TFL大劑量（200mg·kg-1·d-1）組（以下簡稱TFL大劑量組）。除假手術(shù)組外，其余各組均采用膽總管結(jié)扎法（common bile duct ligation,CBDL）制備肝纖維化大鼠模型。在造模后第二日開始，假手術(shù)組、膽總管結(jié)扎組給予生理鹽水5ml/kg灌胃，TFL小劑量組、TFL大劑量組分別給予TFL100mg/kg、200mg/kg灌胃，均1次/天，共4周，第4周末處死全部大鼠，留取肝臟左葉組織。HE、Masson染色觀察大鼠肝組織病理學(xué)改變；免疫組化法(immunohistochemistry，IHC)及免疫印跡法（Western blot，WB)檢測TLR2、TLR4在四組大鼠肝組織內(nèi)的表達。結(jié)果：Masson染色結(jié)果顯示：假手術(shù)組、膽總管結(jié)扎組、TFL小劑量組、 TFL大劑量組的膠原面積（μm2）分別為：377.4±19.8、1172.5±108.4、1092.7±105.2、772.9±168.9；膽總管結(jié)扎組膠原纖維面積與假手術(shù)組比較差異顯著（P0.01），TFL大劑量治療組膠原纖維面積與膽總管結(jié)扎組相比有顯著性差異（P0.01）,TFL小劑量治療組膠原纖維面積與膽總管結(jié)扎組相比無差異。免疫組化染色提示：TLR2、TLR4主要表達于肝細胞、庫普弗細胞、內(nèi)皮細胞以及膽管上皮細胞等多種細胞的細胞質(zhì)和細胞膜。假手術(shù)組肝組織內(nèi)TLR2、TLR4蛋白呈陰性或弱陽性表達，膽總管結(jié)扎組肝組織中TLR2、TLR4的蛋白表達均明顯高于假手術(shù)組，呈淡黃色、棕黃色或棕褐色染色，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.01）。TFL小劑量組肝組織內(nèi)TLR2、TLR4蛋白陽性表達低于膽總管結(jié)扎組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。TFL大劑量組肝組織內(nèi)TLR2、TLR4蛋白表達較膽總管結(jié)扎組明顯降低，大部分以淡黃色染色為主，偶見棕黃色及棕褐色染色，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.01）。假手術(shù)組、膽總管結(jié)扎組、TFL小劑量組、 TFL大劑量組的TLR2陽性細胞表達評分分別為：0.6±0.5、4.0±0.9、3.8±0.9、1.8±0.7；四組TLR4陽性細胞表達評分分別為：0.4±0.5、3.3±0.6、3.1±0.5、1.4±0.5；蛋白質(zhì)印跡法檢測假手術(shù)組、膽總管結(jié)扎組、TFL小劑量組、TFL大劑量組的TLR2蛋白表達結(jié)果分別為：0.4±0.0、0.7±0.1、0.7±0.0、0.5±0.0；WB法檢測上述各組TLR4蛋白表達結(jié)果分別為：0.3±0.0、0.6±0.1、0.6±0.0、0.4±0.0；假手術(shù)組肝組織TLR2、TLR4蛋白有少量表達，膽總管結(jié)扎組肝組織中TLR2、TLR4的蛋白表達均明顯高于TFL大劑量治療組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.01），TFL小劑量治療組肝組織內(nèi)TLR2、TLR4蛋白陽性表達與模型組相比降低，但仍明顯高于假手術(shù)組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.01）。結(jié)論：TLR2和TLR4蛋白表達增加可能與膽總管結(jié)扎大鼠肝纖維化的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，大劑量TFL能抑制肝纖維化大鼠肝組織TLR2、TLR4的表達，并改善膽總管結(jié)扎大鼠肝組織纖維化程度。
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R575.2
【圖文】：

圖 2. 各組大鼠肝組織HE染色（X200）A:假手術(shù)組; B:BDL組;C:TFL小劑量組;D:TFL大劑量組Figure 2 The histopathological changes in rats liver tissue were assessed by HE staining(×200). A:sham-operated group, B:bile duct ligation group(BDL), C:BDL with low-doseTFL treatment group,D:BDL with high-dose TFL treatment group25

圖 3. 各組大鼠肝組織Masson染色圖片（X100）A:假手術(shù)組;B:BDL組;C:TFL小劑量組;D:TFL大劑量組Figure 3 The histopathological changes in rats liver tissue were assessed by Masson staining (×100).A:sham-operated group, B:bile duct ligation group(BDL), C:BDL with low-dose TFL treatmentgroup,D:BDL with high-dose TFL treatment group

圖 4. 各組大鼠肝組織TLR2蛋白免疫組織化學(xué)染色(x400) A:假手術(shù)組; B:BDL組; C:TFL小劑量組; D:TFL大劑量組Figure 4 The expressions of TLR2 in rats liver tissue were assessed by immunohistochemicalstaining(×400）.A:sham-operated group, B:bile duct ligation group(BDL), C:BDL with low-dose TFLtreatment group,D:BDL with high-dose TFL treatment group29

【參考文獻】

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本文編號：2775316