發(fā)布時間：2020-07-28 14:05

【摘要】：【目的】探討IL-38在炎癥性腸病(inflammatory bowel diseases,IBD)患者和葡聚糖硫酸鈉(dextran sulphate sodium,DSS)誘導(dǎo)的結(jié)腸炎小鼠中的表達(dá)及細(xì)胞來源,并通過干預(yù)DSS小鼠中IL-38表達(dá)探究其在IBD發(fā)生中的作用及機(jī)制。【方法】收集IBD病人和對照者外周靜脈血和結(jié)腸活檢標(biāo)本,建立DSS結(jié)腸炎小鼠模型,利用RT-q PCR和Western Blotting檢測人和小鼠腸道組織IL-38 m RNA和蛋白表達(dá),免疫組化和免疫熒光檢測IL-38的細(xì)胞定位,酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗檢測血清IL-38的表達(dá)。腹腔注射m IL-38重組蛋白干預(yù)DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎小鼠,采用疾病活動指數(shù)、結(jié)腸長度及組織病理學(xué)評分進(jìn)行炎癥評估,RT-q PCR檢測小鼠結(jié)腸組織中炎性因子的表達(dá)水平。體外培養(yǎng)RAW264.7細(xì)胞和骨髓來源的巨噬細(xì)胞,脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激后給予m IL-38重組蛋白干預(yù),通過RT-q PCR檢測炎性因子的表達(dá)�！窘Y(jié)果】結(jié)腸組織中IL-38 m RNA表達(dá)在克羅恩病(Crohn's disease,CD)和潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis,UC)患者中較對照者明顯升高,而各組血清中IL-38的表達(dá)沒有統(tǒng)計學(xué)差異,DSS和對照組小鼠腸道和外周血的IL-38表達(dá)結(jié)果與人體結(jié)果類似。免疫組化顯示IL-38主要表達(dá)于人和小鼠粘膜固有層細(xì)胞。免疫熒光顯示人和小鼠腸粘膜中IL-38主要來源于B細(xì)胞,小鼠中還有少部分來源于巨噬細(xì)胞。m IL-38重組蛋白干預(yù)DSS小鼠模型能顯著改善小鼠體重下降和結(jié)腸長度縮短、減少疾病活動度評分和降低病理學(xué)評分,并明顯下調(diào)小鼠結(jié)腸組織中IL-1β、TNF-?和CCL-2等炎性因子的基因表達(dá)。體外實(shí)驗顯示,給予m IL-38重組蛋白干預(yù)巨噬細(xì)胞,IL-38能明顯抑制LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞中IL-1β、IL-6、TNF-?、IL-10、CCL-2和CCL-7的m RNA表達(dá),和骨髓來源的巨噬細(xì)胞中IL-1β、IL-6、TNF-?和CCL-7的m RNA表達(dá)。【結(jié)論】IL-38在IBD的腸粘膜炎癥中發(fā)揮抑炎作用,可能通過抑制巨噬細(xì)胞炎癥因子分泌發(fā)揮作用,是IBD治療的潛在靶點(diǎn)。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R574
【圖文】：

IL-38在IBD患者中的表達(dá)

圖2 - IL-38在DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎小鼠中的表達(dá)3. IL-38在腸道組織中的細(xì)胞來源為進(jìn)一步證實(shí) IBD 患者 IL-38 的細(xì)胞來源，用免疫熒光雙染法標(biāo)記 IL-38 和T 細(xì)胞的 CD3、B 細(xì)胞的 CD19 或巨噬細(xì)胞 CD68 來檢測 UC 和 CD 患者的結(jié)腸樣本（圖三）。雙染結(jié)果表明 IL-38+細(xì)胞（紅色熒光）與 CD19+B 細(xì)胞的一部分（綠色熒光）完全重合，并且 CD19/IL-38 雙陽性細(xì)胞呈現(xiàn)黃色。相反，在 CD3+T細(xì)胞或 CD68+單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞中未發(fā)現(xiàn) IL-38+細(xì)胞（圖 3A）。因此，在 IBD患者的炎癥粘膜中，B 細(xì)胞為 IL-38 的主要細(xì)胞來源，而非單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞或T 細(xì)胞。在 DSS 誘導(dǎo)的結(jié)腸炎小鼠的結(jié)腸組織中也有類似的結(jié)果，此外一小部分 IL-38+細(xì)胞與 CD68+單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞重合。但在 CD3+T 細(xì)胞中未檢測到 IL-38+細(xì)胞（圖 3B）。因此，在 DSS 誘導(dǎo)的結(jié)腸炎小鼠中，IL-38 主要來源于 B 細(xì)胞或

26圖3 - IL-38在腸道組織中的細(xì)胞來源L-38干預(yù)對DSS結(jié)腸炎小鼠腸道炎癥的影響綜上結(jié)果證實(shí)在結(jié)腸炎中 IL-38 表達(dá)增加，下一步我們將探索 IL-38 在生中的作用。我們用小鼠 IL-38 重組蛋白干預(yù) DSS 誘導(dǎo)的結(jié)腸炎小鼠，構(gòu)建及 IL-38 干預(yù)的具體過程如圖 4A 所示。在第 8 天處死小鼠，然后

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9 周峰;姜挺;葛柳青;蔣益;陳志濤;趙杰;夏冰;沈駿;冉志華;錢家鳴;;腫瘤壞死因子超家族15基因與炎癥性腸病的相關(guān)性研究[A];第九次全國消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會議專題報告論文集[C];2009年

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4 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京朝陽醫(yī)院西院 主治醫(yī)師 高輝;炎癥性腸病為什么需要隨訪[N];家庭醫(yī)生報;2016年

5 南京醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院腸病中心 張發(fā)明 何植;糞菌移植會顛覆傳統(tǒng)治療觀嗎[N];健康報;2017年

6 通訊員 李曉姍 楊雋瑩;讓炎癥性腸病不再被視為”綠色癌癥“[N];家庭醫(yī)生報;2017年

7 中山大學(xué)附屬第六醫(yī)院消化內(nèi)科 張敏;炎癥性腸病愛糾纏年輕人[N];保健時報;2016年

8 通訊員 李曉姍;不可小覷拉肚子 當(dāng)心炎癥性腸病損健康[N];家庭醫(yī)生報;2016年

9 本報記者 朱國旺;當(dāng)心炎癥性腸病來襲[N];中國醫(yī)藥報;2014年

10 通訊員 高翔;炎癥性腸病患者增多[N];湖北日報;2002年

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3 李晨;Cdc42對炎癥性腸病中Thl7細(xì)胞作用的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

4 王波;血漿激肽釋放酶-激肽系統(tǒng)在炎癥性腸病發(fā)病中的作用及機(jī)制研究[D];蘇州大學(xué);2017年

5 馮爵榮;英夫利西單抗治療炎癥性腸病原發(fā)性不應(yīng)答的分子機(jī)制及預(yù)測因子[D];武漢大學(xué);2018年

6 張虹;電針調(diào)控內(nèi)源性大麻素受體介導(dǎo)炎癥性腸病的機(jī)制研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2019年

7 翁一潔;炎癥性腸病患者腸道菌群失調(diào)分析及其與飲食關(guān)系的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2019年

8 閆思超;雙氫青蒿素對小鼠炎癥性腸病模型藥效作用及調(diào)節(jié)Th/Treg平衡的機(jī)制研究[D];中國中醫(yī)科學(xué)院;2019年

9 王曉兵;NPSR1在炎癥性腸病中的基因多態(tài)性和表達(dá)及其對人CD4+T淋巴細(xì)胞調(diào)控作用的研究[D];武漢大學(xué);2015年

10 周長玉;炎癥性腸病動物模型的建立及外源性IL-10和益生菌誘導(dǎo)粘膜免疫耐受治療炎癥性腸病的效應(yīng)探討[D];吉林大學(xué);2004年

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本文編號：2772985