【摘要】：目的:了解survivin在活化的肝星狀細胞中的表達及其意義。 方法:實驗分為原代肝星狀細胞組、活化的肝星狀細胞組、肝癌細胞組、正常肝細胞組,RT-PCR法測定各組細胞survivin mRNA的表達,以GAPDH作為內(nèi)參照。用免疫熒光方法檢測各組survivin的表達差異,熒光顯微鏡下取不同的高倍鏡視野,計算陽性細胞百分率。用western-blotting法檢測各組細胞survivin蛋白的表達。 結果:RT-PCR結果顯示:survivin mRNA在活化的肝星狀細胞的表達明顯高于肝細胞和原代肝星狀細胞,肝癌細胞中的表達最高。細胞免疫熒光顯示:survivin在活化的肝星狀細胞中明顯表達,陽性率為66.07%±8.55%,明顯高于肝細胞(9.74%±2.68%)和原代肝星狀細胞(9.95%±2.53%),比較有統(tǒng)計學意義(p0.05)。而且肝細胞及原代肝星狀細胞表達熒光強度很弱,在肝癌細胞中表達率最高,陽性率達69.41%±9.10%。Western-blotting的結果顯示: survivin蛋白在活化的肝星狀細胞中明顯表達,明顯高于肝細胞和原代肝星狀細胞,在肝癌細胞中表達最高。 結論:抗凋亡基因Survivin在活化的肝星狀細胞HSC-T6細胞中高表達,為開辟肝纖維化基因治療提供了理論基礎。
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R575.2
【圖文】：

實驗結果提取的原代 HSCS顯微鏡下剛分離出的 HSCS 呈圓形，邊界培養(yǎng) 24h 的 HSCS 細胞爬片 α-SMA 免疫 HSCS 未活化。一周后鏡下可見細胞體積的 HSC 樣，臺盼蘭拒染實驗鑒定活細胞48 小時的細胞爬片進行 desmin 和 GFAP[1(93.7 士 0.53)%，見圖 2.

培養(yǎng) 24h 的 HSCS 細胞爬片 α-SMA 免 HSCS 未活化。一周后鏡下可見細胞體的 HSC 樣，臺盼蘭拒染實驗鑒定活細胞48 小時的細胞爬片進行 desmin 和 GFAP(93.7 士 0.53)%，見圖 2.圖 1 剛提取的原代 HSCS（×250）

圖 3 總 RNA 電泳圖注：1：HSC-T6 組；2：CBRH-7912.2 CBRH-7919、HSC-T6、BRL 細胞RT-PCR 結果顯示：各組細胞的 GA條帶均勻一致；在 260 bp 處組可見到不AlphaImager 凝膠成像系統(tǒng)對擴增產(chǎn)物中 survivin mRNA 相對表達值（survivi中 survivin mRNA 相對表達值（survivin相對表達值為 0.533 ±0.020，BRL 的相與 HSC-T6 細胞組間比較，p<0.05,差異胞組間比較，p<0.05,差異有統(tǒng)計學意義較，p<0.05,差異有統(tǒng)計學意義。BRL 組

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