【摘要】：目的:了解survivin在活化的肝星狀細(xì)胞中的表達(dá)及其意義。 方法:實(shí)驗(yàn)分為原代肝星狀細(xì)胞組、活化的肝星狀細(xì)胞組、肝癌細(xì)胞組、正常肝細(xì)胞組,RT-PCR法測(cè)定各組細(xì)胞survivin mRNA的表達(dá),以GAPDH作為內(nèi)參照。用免疫熒光方法檢測(cè)各組survivin的表達(dá)差異,熒光顯微鏡下取不同的高倍鏡視野,計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞百分率。用western-blotting法檢測(cè)各組細(xì)胞survivin蛋白的表達(dá)。 結(jié)果:RT-PCR結(jié)果顯示:survivin mRNA在活化的肝星狀細(xì)胞的表達(dá)明顯高于肝細(xì)胞和原代肝星狀細(xì)胞,肝癌細(xì)胞中的表達(dá)最高。細(xì)胞免疫熒光顯示:survivin在活化的肝星狀細(xì)胞中明顯表達(dá),陽(yáng)性率為66.07%±8.55%,明顯高于肝細(xì)胞(9.74%±2.68%)和原代肝星狀細(xì)胞(9.95%±2.53%),比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。而且肝細(xì)胞及原代肝星狀細(xì)胞表達(dá)熒光強(qiáng)度很弱,在肝癌細(xì)胞中表達(dá)率最高,陽(yáng)性率達(dá)69.41%±9.10%。Western-blotting的結(jié)果顯示: survivin蛋白在活化的肝星狀細(xì)胞中明顯表達(dá),明顯高于肝細(xì)胞和原代肝星狀細(xì)胞,在肝癌細(xì)胞中表達(dá)最高。 結(jié)論:抗凋亡基因Survivin在活化的肝星狀細(xì)胞HSC-T6細(xì)胞中高表達(dá),為開辟肝纖維化基因治療提供了理論基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R575.2
【圖文】：

實(shí)驗(yàn)結(jié)果提取的原代 HSCS顯微鏡下剛分離出的 HSCS 呈圓形，邊界培養(yǎng) 24h 的 HSCS 細(xì)胞爬片 α-SMA 免疫 HSCS 未活化。一周后鏡下可見細(xì)胞體積的 HSC 樣，臺(tái)盼蘭拒染實(shí)驗(yàn)鑒定活細(xì)胞48 小時(shí)的細(xì)胞爬片進(jìn)行 desmin 和 GFAP[1(93.7 士 0.53)%，見圖 2.

培養(yǎng) 24h 的 HSCS 細(xì)胞爬片 α-SMA 免 HSCS 未活化。一周后鏡下可見細(xì)胞體的 HSC 樣，臺(tái)盼蘭拒染實(shí)驗(yàn)鑒定活細(xì)胞48 小時(shí)的細(xì)胞爬片進(jìn)行 desmin 和 GFAP(93.7 士 0.53)%，見圖 2.圖 1 剛提取的原代 HSCS（×250）

圖 3 總 RNA 電泳圖注：1：HSC-T6 組；2：CBRH-7912.2 CBRH-7919、HSC-T6、BRL 細(xì)胞RT-PCR 結(jié)果顯示：各組細(xì)胞的 GA條帶均勻一致；在 260 bp 處組可見到不AlphaImager 凝膠成像系統(tǒng)對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物中 survivin mRNA 相對(duì)表達(dá)值（survivi中 survivin mRNA 相對(duì)表達(dá)值（survivin相對(duì)表達(dá)值為 0.533 ±0.020，BRL 的相與 HSC-T6 細(xì)胞組間比較，p<0.05,差異胞組間比較，p<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義較，p<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。BRL 組

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5 黃遠(yuǎn)軍;杏林增輝[N];大眾科技報(bào);2009年

6 茅臺(tái)集團(tuán)董事長(zhǎng)、總工程師 季克良;科學(xué)破譯神秘茅臺(tái) 釀造高品位生活[N];經(jīng)理日?qǐng)?bào);2005年

7 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院肝病研究所 程勇衛(wèi) 唐望先 段瑞嫻 劉紅艷 林菊生 楊玉珍 武漢市第七人民醫(yī)院肝病所 虞滌霞;核酸對(duì)肝纖維化的影響[N];保健時(shí)報(bào);2009年

8 劉道安;抗肝纖維化中藥篩選工作又有突破[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2001年

9 陶春祥;維生素E防治肝纖維化[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2001年

10 ;黃芪總苷對(duì)肝星狀細(xì)胞增殖和合成膠原的抑制作用[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

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3 范海濤;Survivin與VEGF的檢測(cè)及二者反義寡核苷酸對(duì)膀胱癌的治療研究[D];吉林大學(xué);2010年

4 李紅玲;Survivin在非霍奇金淋巴瘤中的表達(dá)及其反義寡核苷酸對(duì)淋巴瘤細(xì)胞增殖與凋亡的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

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5 劉洪翔;Survivin 在結(jié)直腸腺瘤癌變過程中的表達(dá)及其與p53、Ki-67表達(dá)的關(guān)系[D];鄭州大學(xué);2004年

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本文編號(hào)：2758454