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巴柳氮鈉對(duì)實(shí)驗(yàn)性末端回腸炎的防治作用及腸上皮細(xì)胞TLR2、TLR4的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-07-15 09:43
【摘要】:目的:本研究通過(guò)回腸-盲腸側(cè)側(cè)吻合術(shù)建立大鼠實(shí)驗(yàn)性末端回腸炎動(dòng)物模型觀察巴柳氮鈉的防治作用及對(duì)腸上皮細(xì)胞TLR2、TLR4的影響。 方法:清潔級(jí)、雄性健康SD大鼠100只,隨機(jī)分為A-E五組:正常對(duì)照組(A)、造模對(duì)照組(B)、巴柳氮鈉50mg.kg-1.d-1組(C)、75mg.kg-1.d-1組(D)及100mg.kg-1.d-1組(E),每組20只。B-E組分別行回腸末端-盲腸側(cè)側(cè)吻合術(shù)、A組只作腹腔注射麻醉。造模后2周時(shí),C-E組大鼠分別給予巴柳氮鈉50mg.kg-1.d-1、75mg.kg-1.d-1、100mg.kg-1.d-1懸液各1ml灌胃處理,A、B組予以生理鹽水1ml灌胃作為對(duì)照,期間觀察術(shù)后動(dòng)物的一般狀態(tài)。術(shù)后第4、8周分批處死動(dòng)物,取距吻合口1-3cm處末端回腸組織,行蘇木素-伊紅(hematoxylin-eosin staining,HE)染色,觀察五組大鼠末端回腸組織的病理變化,進(jìn)行肉眼、鏡下炎癥評(píng)分(histopathological score,HS)及上皮間淋巴細(xì)胞(intraepitheliallymphocyte,IEL)計(jì)數(shù)。使用免疫組化(immunohistochemistry, IHC)染色(Elivison二步法)檢測(cè)各組末端回腸炎粘膜中TLR2、TLR4的表達(dá)情況。 結(jié)果: 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的一般情況術(shù)后3-5天,所有造模SD大鼠均出現(xiàn)一般狀況差,其中體重下降較明顯,此時(shí)造模組和巴柳氮鈉各組與正常對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2-4周各組體重逐步恢復(fù),4周后各時(shí)期五組的體重下降無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 2、末端回腸組織肉眼組織病理學(xué)評(píng)分4周時(shí),所有造模SD大鼠末端回腸組織肉眼觀均為以急性炎癥為主的表現(xiàn),但造模組炎癥較巴柳氮鈉各組重,評(píng)分有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);隨著巴柳氮鈉灌胃劑量的增加,三組炎癥程度逐漸減輕,評(píng)分有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。8周時(shí),造模組炎癥明顯,而巴柳氮鈉各組炎癥程度依次減輕,四組評(píng)分有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 3、末端回腸組織光鏡下組織病理學(xué)評(píng)分4周時(shí),各手術(shù)組末端回腸組織鏡下觀均為急性炎癥為主的表現(xiàn),B組的HS高于A、C、D、E組(P0.05);隨著巴柳氮鈉灌胃劑量的增加,三組炎癥程度依次減輕,評(píng)分有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。8周時(shí),B、C-E組進(jìn)入慢性炎癥表現(xiàn),B組與A、C-E組相比,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而此時(shí)期C-E組炎癥明顯減輕,三組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 4、末端回腸組織上皮間淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)4周時(shí),B組上皮間淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)高于A、C-E組(P0.05);C-E組上皮間淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)高于A組(P0.05),隨著巴柳氮鈉灌胃劑量的增加,C-E三組間淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)依次降低(P0.05)。8周時(shí),B組鏡下以上皮間淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)粘膜及粘膜下層為主,與A、C-E組相比,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。C-E組鏡下上皮間淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)依次減少,三組評(píng)分有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其中E組與A組相比,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 5、末端回腸組織TLR2、TLR4的表達(dá)4周時(shí),B組末端回腸組織TLR2、TLR4平均吸光度(A)值高于A、C-E組(P0.05),C-E組TLR2、TLR4平均吸光度(A)值高于A組(P0.05),隨著巴柳氮鈉灌胃劑量的增大,C-E組TLR2、TLR4平均吸光度(A)值依次降低(P0.05)。8周時(shí),造模組TLR2、TLR4的平均吸光度(A)值高于A、C-E組(P0.05);C-D組TLR2、TLR4的平均吸光度值高于A組(P0.05),而E組TLR2、TLR4的平均吸光度值接近A組(P0.05)。TLR2、TLR4的平均吸光度(A)值與鏡下組織病理學(xué)評(píng)分呈正相關(guān)(P0.05)。 結(jié)論: 1、巴柳氮鈉對(duì)實(shí)驗(yàn)性末端回腸炎具有防治作用,且呈時(shí)間劑量依賴關(guān)系。 2、在實(shí)驗(yàn)性末端回腸炎發(fā)病過(guò)程中TLR2、TLR4表達(dá)增加,且巴柳氮鈉對(duì)實(shí)驗(yàn)性末端回腸炎的防治作用可能與其阻斷或抑制腸組織TLR2、TLR4的信號(hào)傳導(dǎo)及免疫應(yīng)答有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號(hào)】:R574
【圖文】:

體重,大鼠,動(dòng)態(tài)變化


組體重與A組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。至術(shù)后4、6、8周,各組的一般狀況,體重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中,正常對(duì)照組大鼠除體重有所下降外,一般狀況無(wú)明顯變化。見(jiàn)表1,圖1表1 各組SD大鼠體重對(duì)比(g)n=19 術(shù)前 術(shù)后 3 天 1 周 2 周 3 周 4 周 6 周 8 周A 組 250.42±7.20 233.68±4.36 255.32±7.31 263.74±7.51 289.63±7.83 301.53±7.53 319.40±5.33 49.60±4.2B 組 254.89±9.92 220.37±8.12a224.58±4.72a241.74±8.26a268.58±10.18b300.95±11.05 320.40±5.21 351.5±7.26C 組 258.79±10.86 224.63±6.87a225.68±4.90a241.21±6.78a279.00±5.35c299.32±6.13 321.40±5.25 328.90±68.6D 組 254.53±14.01 220.21±6.92a224.68±6.31a242.32±7.42a283.37±5.99d301.00±6.32 321.10±5.38 352.00±6.88E 組 256.84±10.89 218.32±5.62a225.11±5.21a244.74±8.00a282.08±10.90 301.95±4.81 320.50±4.90 349.50±8.11注:aP<0.05,B-E組與A組之間比較;bP<0.05, B組與C-E組之間比較;cP<0.05, C組與D、E組之間比較;dP<0.05,D組與E組比較。

炎癥,肉眼,體重


各組明顯(P<0.05);8周時(shí),造模組出現(xiàn)腸管明顯充血、腫脹、粘連,甚至糜爛及出血,腸腔狹窄等表現(xiàn),與巴柳氮鈉各組相比評(píng)分明顯增加(P<0.05)。見(jiàn)表2、圖2及圖5體重

本文編號(hào):2756327

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