【摘要】： 目的: 觀察促炎性細胞因子IL-32在克羅恩病(Crohn’s disease)患者腸黏膜中的表達情況,研究CARD15、IRGM、ATG16L1、NKX2-3基因的單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms, SNP)位點與中國人克羅恩病易感性的關(guān)系,為深入研究克羅恩病的發(fā)病機制奠定基礎(chǔ),亦為該病的防治提供實驗依據(jù)。 方法: ⑴收集臨床確診的克羅恩病患者(47例)及其健康對照(16名)的組織標本,經(jīng)病理檢驗,通過免疫組化以及western blot方法觀察IL-32在克羅恩病患者腸黏膜內(nèi)的表達情況,檢驗IL-32在克羅恩病患者腸黏膜中的表達與意義。⑵提取克羅恩病患者(32例)和健康對照個體(30名)的外周血,抽提白細胞基因組DNA,檢測CARD15_rs2066842、IRGM_rs13361189、ATG16L1_rs2241880以及NKX2-3_ rs10883365的SNP多態(tài)性與克羅恩病的關(guān)系,根據(jù)靶序列片段設(shè)計相應的引物,PCR擴增目的片段,經(jīng)純化后測序,測序結(jié)果分組做統(tǒng)計分析。 結(jié)果: ⑴與對照相比,經(jīng)免疫組化法和western blot法檢測的IL-32在克羅恩病患者腸黏膜中表達上調(diào),二者的表達量有顯著性差異(P㩳0.05)。⑵克羅恩病病例組和健康對照組基因頻率和基因型頻率的組間比較顯示: CARD15_rs2066842、IRGM_rs13361189、ATG16L1_rs2241880以及NKX2-3_rs10883365的SNP分布頻率的差異均無統(tǒng)計學意義(P㧐0.05)。提示這四個基因多態(tài)性位點可能與中國人克羅恩病的易感性無關(guān)。 結(jié)論: ⑴IL-32無論在克羅恩病患者還是在健康對照個體的腸黏膜內(nèi)均有表達,但在克羅恩病患者腸黏膜內(nèi)IL-32表達上調(diào),研究顯示IL-32表達上調(diào)能加重克羅恩病的炎癥反應。⑵國外研究報道的與高加索人克羅恩病相關(guān)的CARD15_rs2066842,IRGM_ rs13361189、ATG16L1_rs2241880以及與日本人克羅恩病易感性的NKX2-3_rs10883365的SNP位點可能與我國克羅恩病患者的易感性無關(guān),這些SNP的變異至多是增加了中國人罹患克羅恩病的風險。
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R574.62
【圖文】：

圖 1. 克羅恩病的發(fā)病機制示意圖Fig.1. schematic of Pathogenesis of Crohn's disease注：圖片來源于 Renzo Caprilli, Why does Crohn's disease usually occur interminal ileum? Journal of Crohn's and Colitis （2008） 2, 352 356腸腔是免疫系統(tǒng)的重要組成部分，廣闊的表面時刻都接觸大量抗原，能區(qū)分食物和共生菌中的侵入病原體和無害抗原。當克羅恩病發(fā)生時，對無害抗原耐受性丟失。防御機制受集合淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)、隱窩小結(jié)、淋巴細胞等腸相關(guān)淋巴樣組織（gut-associated lymphoid tissue，GALT）的調(diào)節(jié)[4]。集合淋巴結(jié)是由免疫細胞組成的結(jié)構(gòu)，數(shù)量眾多，分布于小腸特別在回腸末端，是 GALT 最復雜的一部分，與回腸克羅恩病部位一致�？肆_恩病的發(fā)病高峰在 15～25 歲，一個相似的平行峰代表了集合淋巴結(jié)可以與年齡相對應[5]。此外，CARD15 缺陷通過免疫系統(tǒng)過度反應誘導集合淋巴結(jié)發(fā)育異常，增加了腸黏膜的通透性[6]。

_IL-32在克羅愚病感者腸貓浪中的衰達Fg_3..TheexpressionsofIL-321的theirdestirii}mucusawithCrnlnsdsease

結(jié) 果1 CARD15_rs2066842 單核苷酸多態(tài)性與克羅恩病的相關(guān)性1.1 CARD15_rs2066842 PCR 基因擴增片段的電泳結(jié)果（見圖 5A）圖 5A 為 CARD15_rs2066842 PCR 產(chǎn)物電泳圖，擴增的目的片段為 484bp

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 龍靖華;智發(fā)朝;張迎春;張以洋;鐘長青;姚國鵬;陳正彥;林勇;智佳;關(guān)婧;;NOD2/CARD15基因突變與中國人克羅恩病相關(guān)性的研究[J];胃腸病學;2007年06期

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本文編號：2754185